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文档简介
2026事业单位笔试-广西-广西病理技术(医疗招聘)历年参考题库含答案详解一、选择题从给出的选项中选择正确答案(共100题)1、福尔马林是病理组织学中最常用的固定液,其常用浓度为多少?A.5%~10%B.20%~30%C.1%~3%D.50%~70%2、石蜡切片的标准厚度一般控制在什么范围?A.1~2μmB.3~5μmC.6~8μmD.10~15μm3、HE染色中使细胞核呈蓝紫色的染液是?A.伊红B.苏木精C.台盼蓝D.甲基绿4、组织脱水过程中最常用的脱水剂是?A.乙醇B.丙酮C.甲醇D.异丙醇5、组织透明的目的是什么?A.杀死细菌B.置换脱水剂并为石蜡渗透做准备C.固定组织D.染色标记6、冷冻切片最常用的冷冻介质是?A.甘油B.OCT包埋剂C.石蜡D.明胶7、免疫组化染色中,抗原修复的目的是?A.增强染色背景B.暴露被甲醛固定遮蔽的抗原表位C.缩短染色时间D.增强特异性8、帕拉平(Paraplast)是一种常用的石蜡包埋材料,其熔化温度约为?A.35~40℃B.52~58℃C.70~75℃D.80~85℃9、在细胞学涂片制备中,巴氏染色法常用于检测?A.细菌B.结核杆菌C.脱落细胞D.寄生虫10、组织切片脱蜡应使用哪种试剂?A.乙醇B.二甲苯C.水D.甲醛11、Masson三色染色中,胶原纤维呈现的颜色是?A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色12、病理切片出现皱褶的主要原因不包括?A.切片刀不锋利B.切片厚度不均C.组织过硬D.盖玻片过大13、PAS染色主要用于显示组织中的?A.脂肪B.糖原和黏液物质C.铁盐D.钙盐14、苏木精染液老化后会出现哪种现象?A.染色颜色加深B.出现沉淀且染色效果下降C.变成无色D.粘度降低15、免疫荧光染色中,直接法与间接法的主要区别是?A.荧光素种类不同B.一抗是否直接标记荧光素C.观察波长不同D.固定方式不同16、组织冰冻切片时,切片机冷室温度一般应设置在?A.-5~0℃B.-15~-20℃C.4~8℃D.20~25℃17、肾组织活检标本固定时间过长(超过24小时)会导致什么后果?A.细胞核染色更清晰B.抗原性增强C.细胞形态学改变和抗原性下降D.切片更薄18、Reticulin(网织纤维)染色常用的方法有?A.普鲁士蓝法B.银染法C.苏丹黑B法D.刚果红法19、病理标本送检时,申请单上必须包含的基本信息不包括?A.患者姓名B.病理编号C.临床诊断D.医师签名20、电镜制样中常用的固定剂是?A.10%中性福尔马林B.2.5%戊二醛C.95%乙醇D.丙酮21、在常规石蜡切片制作过程中,组织固定最常用的固定液是:A.95%乙醇B.10%中性福尔马林C.丙酮D.甲醇22、HE染色中,苏木精染色的原理是:A.酸性染料与碱性物质结合B.碱性染料与酸性物质结合C.偶联反应着色D.金属盐沉淀着色23、冰冻切片制作时,最常用的冷冻剂是:A.液氮B.干冰C.固态二氧化碳D.异戊烷24、石蜡切片的厚度通常控制在:A.1至2微米B.3至5微米C.6至8微米D.10至15微米25、脱蜡步骤的目的是:A.去除组织中的水分B.去除石蜡以便染色C.固定组织形态D.增强组织硬度26、HE染色中,分化液的常用试剂是:A.盐酸酒精B.氢氧化钠C.醋酸D.甲醛27、组织脱水时,最常用的脱水剂是:A.甲醇B.乙醇C.丙酮D.丁醇28、透明剂的主要作用是:A.使组织变硬B.置换脱水剂并为浸蜡做准备C.杀死微生物D.防止组织变形29、石蜡包埋时,石蜡的熔点通常选择:A.40至45℃B.52至58℃C.65至70℃D.75至80℃30、免疫组织化学染色中,最常用的一抗孵育时间是:A.10至30分钟B.30至60分钟C.过夜D.4至6小时31、特殊染色中,Masson三色染色的目的是显示:A.淀粉样物质B.胶原纤维C.弹性纤维D.网状纤维32、帕氏淀粉酶的常用浓度是:A.0.5%B.1%C.3%D.10%33、防脱片处理常用的载玻片处理方法不包括:A.多聚赖氨酸处理B.(APES)硅烷处理C.明胶处理D.稀盐酸浸泡34、组织病理学诊断中最常用的切片染色方法是:A.碘化银法B.HE染色C.普鲁士蓝反应D.PAS反应35、石蜡切片中出现裂缝的主要原因不包括:A.组织脱水过度B.切片刀不锋利C.载玻片未清洁D.石蜡温度过高36、冷冻切片诊断中,最常用于标记切面的染料是:A.美蓝B.结晶紫C.龙胆紫D.伊红37、液氮冷冻组织时,组织块大小一般不超过:A.0.5厘米B.1厘米C.2厘米D.3厘米38、组织脱水不彻底的常见表现是:A.切片易碎裂B.染色加深C.石蜡无法浸入D.切片过软39、苏木精染色后,蓝化处理的常用试剂是:A.稀盐酸B.氨水C.稀硫酸D.稀硝酸40、石蜡切片机切片时,切片的理想厚度误差应控制在:A.±0.1微米B.±0.5微米C.±1微米D.±2微米41、石蜡切片制作过程中,固定组织最常用的固定液是A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.丙酮D.甲醇42、石蜡切片进行HE染色时,苏木精染色的主要作用是A.使细胞质染成红色B.使细胞核染成蓝色C.使胶原纤维染成红色D.使红细胞染成蓝色43、冰冻切片制作时,常用的冷冻介质是A.石蜡B.OCT化合物C.甲醛D.二甲苯44、免疫组织化学染色中,一抗的主要作用是A.显色反应B.识别并结合特异性抗原C.封闭非特异性结合位点D.放大信号45、组织脱水常用的试剂是A.二甲苯B.乙醇C.甲醛D.石蜡46、PAS染色主要用于检测A.脂质B.糖原和黏液物质C.铁盐D.钙盐47、石蜡切片脱蜡应使用的试剂是A.乙醇B.二甲苯C.水D.甲醛48、Masson三色染色中,胶原纤维呈现的颜色是A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色49、组织病理学检查中,活检标本的处理流程正确的是A.固定→脱水→包埋→切片→染色B.固定→切片→脱水→染色→包埋C.包埋→固定→切片→脱水→染色D.切片→固定→脱水→包埋→染色50、特殊染色刚果红染色主要用于检测A.淀粉样物质B.铁沉积C.钙盐沉积D.脂质沉积51、石蜡切片厚度一般控制在A.0.5~1μmB.2~4μmC.10~20μmD.50~100μm52、免疫组化染色中的阳性对照是指A.用PBS替代一抗B.已知表达目标抗原的组织C.不进行任何染色D.用二抗替代一抗53、防脱载玻片在病理制片中的作用是A.防止切片染色B.防止切片在操作过程中脱落C.加速切片干燥D.增加切片厚度54、组织固定时间过长可能导致A.组织变软B.抗原掩蔽C.细胞结构更清晰D.染色更易观察55、银染色法主要用于显示A.弹性纤维B.神经纤维和网状纤维C.胶原纤维D.肌纤维56、石蜡切片的脱钙处理适用于A.软组织肿瘤B.骨骼组织和钙化病变C.脂肪组织D.淋巴结57、荧光免疫组化中,激发光源通常是A.白光B.紫外光或可见激光C.红外光D.X线58、组织病理学切片染色前需经水化处理,正确的顺序是A.二甲苯→乙醇→水B.乙醇→二甲苯→水C.水→乙醇→二甲苯D.二甲苯→水→乙醇59、原位杂交技术主要用于检测A.蛋白质B.DNA或RNA序列C.脂质D.糖类60、病理切片出现皱褶的主要原因可能是A.切片过薄B.切片厚度不均或展片温度不当C.染色过深D.固定过于充分61、组织病理学检查中,最常用的固定液是A.95%酒精B.10%中性福尔马林C.丙酮D.醋酸62、石蜡切片制作过程中,脱水的常用试剂是A.二甲苯B.乙醇C.甲醛D.甘油63、HE染色中,苏木精染色的主要对象是A.细胞质B.细胞核C.红细胞D.胶原纤维64、冰冻切片最常用于A.常规病理诊断B.术中快速诊断C.长期存档D.免疫荧光65、免疫组化染色中,常用的显色底物是A.DABB.PBSC.乙醇D.甲醛66、PAS染色主要用于显示A.脂肪B.糖原和黏液物质C.钙盐D.铁盐67、病理切片脱蜡应选用A.乙醇B.二甲苯C.水D.甲醛68、Masson三色染色中,胶原纤维呈A.红色B.蓝色或绿色C.黑色D.黄色69、病理标本离体后应在多长时间内完成固定A.30分钟内B.6至8小时C.24小时D.48小时70、苏丹黑B染色主要用于显示A.糖原B.脂类C.黏蛋白D.核酸71、病理显微镜检查中,油镜的放大倍数通常为A.10倍B.40倍C.100倍D.400倍72、Prussian蓝染色用于检测A.铜离子B.铁离子C.钙离子D.锌离子73、石蜡切片切片机切片厚度过薄可导致A.切片皱褶B.组织结构丢失C.刀痕明显D.切片断裂74、防脱片载玻片常用的处理方法是A.硅化处理B.多聚赖氨酸处理C.酸化处理D.高温烘烤75、病理切片出现气泡可能原因是A.封片过早B.封片过慢C.二甲苯残留D.脱水不足76、HE染色中,伊红染色的主要对象是A.细胞核B.细胞质C.神经纤维D.弹性纤维77、冰冻切片制作中,常用的冷冻介质是A.石蜡B.OCT化合物C.甲醛D.乙醇78、病理组织切片染色后脱水应选用A.二甲苯B.梯度乙醇C.丙酮D.甲醇79、细胞学涂片常用的固定液是A.10%中性福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.甲醛气体80、病理切片出现切片发黄可能原因是A.脱水时间过长B.染色时间过短C.封片剂质量问题D.切片过厚81、苏木精染色后分化液通常选用A.乙醇B.稀盐酸酒精C.二甲苯D.PBS缓冲液82、病理切片返蓝常用试剂是A.稀盐酸B.碳酸锂或氨水C.乙醇D.二甲苯83、特殊染色中,显示网状纤维常用A.PAS染色B.银浸染法C.普鲁士蓝染色D.苏丹黑染色84、病理标本送检单上必须包含的信息是A.病理医生姓名B.患者姓名和样本部位C.病理切片编号D.染色方法85、免疫组化染色中,阳性对照的目的是A.验证染色系统工作正常B.提高染色灵敏度C.减少非特异性染色D.缩短染色时间86、病理切片保存期限一般不少于A.1年B.5年C.10年D.15年87、防霉变处理病理切片蜡块常用方法A.密封保存于干燥处B.每周暴露空气C.放置于潮湿环境D.定期用水冲洗88、病理技术工作中,个人防护最重要的是A.佩戴手套和口罩B.穿拖鞋操作C.不戴口罩操作D.裸露皮肤操作89、组织自动脱水机脱水过程中,乙醇浓度递变顺序为A.从高到低B.从低到高C.随机变化D.保持不变90、病理切片出现刀痕的可能原因不包括A.切片刀钝化B.组织过硬C.切片过薄D.蜡块表面不平91、HE染色中,分化这一步骤的主要作用是A.增强染色深度B.去除多余染料提高对比度C.加速脱水D.防止切片脱落92、石蜡切片机使用中,切片厚度调节旋钮误差一般应控制在A.1微米以上B.0.5微米以内C.5微米以内D.10微米以内93、病理实验室废液处理应遵循的原则是A.直接排入下水道B.经中和处理后达标排放C.倒入垃圾桶D.随意倾倒94、免疫荧光染色中,常用的封片剂是A.中性树胶B.甘油明胶C.二甲苯D.乙醇95、病理切片染色中出现染色不均的可能原因是A.切片厚度均匀B.染色时间充足C.切片厚薄不一或染色液老化D.试剂新鲜96、组织病理学中,最适宜的取材厚度为A.0.1厘米B.0.2至0.3厘米C.1厘米D.2厘米97、病理蜡块切片机刀刃应定期用A.砂轮磨削B.酒精清洗C.剪刀修剪D.砂纸打磨98、HE染色中,染色后脱水应使用A.低浓度乙醇B.高浓度乙醇C.二甲苯D.蒸馏水99、病理切片脱蜡不彻底会导致A.染色过深B.染色模糊或脱片C.切片变脆D.蜡块碎裂100、病理技术操作中,甲醛固定液的适宜浓度为A.1%至3%B.4%至10%C.20%至30%D.50%以上
参考答案及解析1.【参考答案】A【解析】福尔马林为甲醛的水溶液,临床上病理固定常用浓度为5%~10%,一般以10%中性福尔马林最为常用。浓度过高可导致组织过度硬化影响切片质量,浓度过低则固定效果不足。配制时需使用缓冲液调节pH至7.2左右,以防止甲醛氧化生成甲酸导致组织酸化。2.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片的厚度一般为3~5μm,这一厚度既能保证组织结构清晰可见,又有利于染色剂和分化剂的渗透。苏木精-伊红染色时,3~5μm的切片核浆对比明显,细胞形态观察效果最佳。过薄会导致结构细节丢失,过厚则染色不清晰且容易有重影。3.【参考答案】B【解析】苏木精是碱性染料,可与细胞核内的酸性物质如DNA、RNA结合,使细胞核呈蓝紫色。伊红为酸性染料,主要使细胞质和胶原纤维等呈粉红色。台盼蓝用于细胞活性检测,甲基绿可使DNA染成绿色,三者均不用于常规HE染色。4.【参考答案】A【解析】无水乙醇是最常用的组织脱水剂,具有脱水效果好、价格低廉、与透明剂二甲苯互溶性佳等优点。脱水过程一般由低浓度到高浓度乙醇逐步进行,如70%、80%、90%、95%、100%乙醇阶梯脱水,以避免组织过度收缩和变硬。5.【参考答案】B【解析】透明是石蜡切片制备中承上启下的关键步骤。脱水后的组织中含有乙醇,而石蜡不溶于乙醇,需先经透明剂(常用二甲苯)置换出乙醇,使石蜡能够均匀渗入组织内部,从而保证切片质量。透明时间过长会导致组织变脆。6.【参考答案】B【解析】OCT(OptimalCuttingTemperature)包埋剂是冷冻切片最常用的冷冻介质,其主要成分为聚乙二醇和明胶,具有较低的玻璃化转变温度,能在低温下保持组织形态完整。甘油主要用于细胞保存,石蜡用于常规包埋,明胶多用于包埋特殊标本。7.【参考答案】B【解析】甲醛固定通过形成美兰生键使蛋白质交联,可能遮蔽部分抗原表位,导致免疫组化染色敏感性下降。抗原修复通过热处理或酶消化等方法打断部分交联键,使隐藏的抗原表位重新暴露,从而提高抗体与抗原的结合效率。8.【参考答案】B【解析】帕拉平是一种改良石蜡,添加了适量塑料组分,具有熔化温度适宜(约52~58℃)、硬度适中、切片不易产生皱褶和断裂的优点。熔化温度过低会导致组织软化难以切片,过高则可能损伤组织抗原性和细胞形态。9.【参考答案】C【解析】巴氏染色法是细胞学检查中最经典的染色方法,主要用于宫颈脱落细胞、体液脱落细胞等的形态学观察。该染色法色彩丰富,能清晰区分细胞核和细胞质的不同结构,有利于判断细胞的良恶性变化。革兰染色用于细菌,抗酸染色用于结核杆菌。10.【参考答案】B【解析】石蜡不溶于水但可溶于二甲苯,因此切片脱蜡必须先用二甲苯溶解石蜡,然后再经梯度乙醇复水至水,最后进行染色。若脱蜡不彻底,染色剂无法进入组织,会导致染色失败。二甲苯也可用环保型替代试剂如柠檬烯等。11.【参考答案】B【解析】Masson三色染色是一种常用的结缔组织染色法,其中胶原纤维和黏液呈蓝色或绿色(取决于配方),肌纤维和胞质呈红色,细胞核呈黑色或深褐色。该方法广泛用于观察组织纤维化程度、肌纤维排列及肿瘤间质成分。12.【参考答案】D【解析】切片皱褶多因切片刀钝、切片厚薄不均、组织过硬或有杂质、展片水温不当等原因造成。盖玻片大小主要影响封片和镜检效果,不会导致切片皱褶。解决皱褶问题需要更换锋利刀片、调整切片厚度、优化脱水硬化流程。13.【参考答案】B【解析】过碘酸雪夫(PAS)染色利用过碘酸氧化多糖中的乙二醇基,生成醛基,再与雪夫试剂反应生成紫红色化合物,主要用于显示糖原、黏蛋白、基底膜等含多糖的物质。脂肪常用苏丹染色,铁盐用普鲁士蓝,钙盐用vonKossa染色。14.【参考答案】B【解析】苏木精染液放置时间过长或氧化过度会产生沉淀,染色效果下降,出现背景染色加深、核着色不均等问题。成熟的苏木精染液应清澈透亮。定期过滤去除沉淀、控制染液使用时间、加入适量氧化剂如汞盐或碘酸钠有助于延长染液寿命。15.【参考答案】B【解析】直接法是用荧光素直接标记一抗,与抗原特异性结合后直接观察,操作简单但灵敏度较低。间接法是先加未标记的一抗,再加荧光标记的二抗识别一抗,灵敏度高且一抗可通用,但操作步骤较多且可能存在交叉反应。16.【参考答案】B【解析】冰冻切片机的冷室温度一般设置在-15~-20℃,此温度范围能使组织充分冷冻硬化,便于切片且不易碎裂。温度过高组织偏软切片困难,过低则组织过脆易产生裂纹。温度设置还需根据组织类型和含水量适当调整。17.【参考答案】C【解析】固定时间过长会导致组织过度固定,引起细胞形态学改变如核固缩,同时使蛋白质过度交联,严重影响后续免疫组化和特殊染色的结果。肾活检标本一般建议在6~12小时内完成固定,固定液体积应为组织体积的10倍以上。18.【参考答案】B【解析】网织纤维染色常用银染法,如Gomori银染法,可使网织纤维呈黑色或棕黑色,背景为浅黄色或绿色。该方法广泛应用于肝脏纤维评估、肿瘤浸润判断及淋巴结结构观察。普鲁士蓝用于铁染色,苏丹黑B用于脂类,刚果红用于淀粉样物质。19.【参考答案】C【解析】病理标本申请单必须包含患者姓名、性别、年龄、病理编号、标本部位、fixation时间、临床初步诊断等信息,以及送检医师签名。临床诊断是参考信息而非必须项,病理医师最终需依据镜下所见出具病理诊断报告,不能仅凭临床诊断下结论。20.【参考答案】B【解析】电镜制片最常用的固定剂是2.5%戊二醛,它能很好地保存细胞的超微结构,如细胞器膜系统和微结构。有时与1%锇酸联合使用以提高对比度。10%福尔马林用于光镜,乙醇和丙酮主要用于冰冻切片或免疫电镜的后续处理。21.【参考答案】B【解析】10%中性福尔马林是最常用的组织固定液,能良好保存组织形态和细胞结构,适用于大多数常规病理检查。乙醇主要用于快速固定或特殊染色前处理,丙酮和甲醇应用范围较窄。固定时间一般为6至48小时,过长可能导致组织变硬。22.【参考答案】B【解析】苏木精是一种碱性染料,主要与细胞核内的酸性物质(如DNA、RNA)结合,使细胞核呈蓝紫色。伊红为酸性染料,与细胞质中的碱性物质结合呈红色。这是HE染色的基本原理,也是最常用的病理染色方法。23.【参考答案】D【解析】异戊烷是冰冻切片最常用的冷冻剂,其凝固点约为-160℃,能快速冻结组织而不会产生冰晶损伤。液氮温度过低(-196℃),易造成组织脆裂;干冰温度为-78.5℃,冷冻速度较慢。选择合适的冷冻剂对切片质量至关重要。24.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片厚度为3至5微米,此厚度既能保证组织结构完整,又有利于光线透过进行显微镜观察。过薄可能导致组织破裂或结构不完整,过厚则影响观察效果。特殊情况下如神经组织切片可达1至2微米,肿瘤大块切片可达6至8微米。25.【参考答案】B【解析】石蜡切片需经二甲苯等溶剂脱蜡后才能进行水化和染色。石蜡不溶于水,若不除去则无法与水溶性染料接触。脱蜡不彻底会导致染色失败或染色不均。通常使用纯二甲苯脱蜡两次,每次5至10分钟。26.【参考答案】A【解析】盐酸酒精是HE染色中常用的分化液,用于去除多余苏木精,防止核染色过深。分化程度直接影响染色效果,分化不足细胞核呈深蓝色且背景污染,分化过度则细胞核颜色过浅甚至无色。分化后需充分水洗以终止分化作用。27.【参考答案】B【解析】乙醇是最常用的组织脱水剂,按浓度梯度(70%、80%、90%、95%、100%)逐步脱水,可使组织中的水分完全被乙醇取代。浓度梯度不宜跳跃过大,否则会引起组织收缩或变脆。每个浓度梯度通常处理30分钟至2小时。28.【参考答案】B【解析】透明剂(如二甲苯)能与脱水和石蜡双重溶解,其作用是置换组织中的脱水剂并使组织透明,便于石蜡浸入。透明时间不宜过长,否则组织会变脆。常用透明时间为10至30分钟,视组织大小和硬度而定。29.【参考答案】B【解析】常规石蜡熔点选择52至58℃,此温度既能保证石蜡流动性良好便于浸透,又不会因温度过高损伤组织。熔点过高切片时易脆裂,熔点过低切片时易变形。特殊组织如脑组织可选用较低熔点石蜡。30.【参考答案】D【解析】一抗孵育时间通常为4至6小时或过夜,温度可为室温或4℃。孵育时间过短抗体结合不充分,影响检测灵敏度。孵育时间过长可能导致非特异性背景增加。具体孵育条件需根据抗体说明书和实验条件优化确定。31.【参考答案】B【解析】Masson三色染色是显示胶原纤维的经典方法,胶原纤维呈蓝色或绿色,肌纤维和胞质呈红色,细胞核呈黑色或棕色。该染色广泛用于肝纤维化、心肌纤维化等疾病的病理诊断。不同配方颜色表现略有差异。32.【参考答案】B【解析】帕氏淀粉酶常用浓度为1%,用于消化石蜡切片中的粘液和网状纤维,使细胞核更加清晰。消化时间一般为37℃水浴30分钟至2小时,具体时间视组织类型而定。消化过度可导致组织结构破坏,消化不足则效果不佳。33.【参考答案】D【解析】多聚赖氨酸、APES和明胶都是常用的防脱片处理方法,可增加载玻片表面正电荷或形成粘附层,防止切片脱落。稀盐酸浸泡用于去除载玻片上的有机污物,但不具有防脱片作用。载玻片处理质量直接影响切片保存效果。34.【参考答案】B【解析】HE染色是组织病理学诊断中最基本、最常用的染色方法,可显示细胞核、细胞质和间质的基本结构,为病理诊断提供重要依据。其他染色方法多为特殊染色,用于显示特定成分或辅助诊断。掌握HE染色技术是病理技术人员的基本要求。35.【参考答案】C【解析】组织脱水过度、切片刀不锋利、石蜡温度过高等均可导致切片出现裂缝。载玻片清洁程度影响切片粘贴效果,但不是产生裂缝的原因。切片裂缝会影响观察和诊断,需调整脱水时间和石蜡温度,更换锋利刀片以避免此类问题。36.【参考答案】A【解析】美蓝是冷冻切片中标记切面最常用的染料,可将切面染成蓝色便于识别。染色后需用清水冲洗去除多余染料,再进行冰冻切片制作。其他染料应用较少或效果不佳。正确标记切面对快速病理诊断至关重要。37.【参考答案】B【解析】液氮冷冻时组织块大小一般不超过1厘米,过大的组织块冷冻不均匀,中心部分冷冻速度慢,会产生冰晶损伤,影响切片质量。液氮温度为-196℃,冷冻速度极快,适合紧急冰冻切片制作。组织块应尽快放入液氮中完成冷冻。38.【参考答案】C【解析】组织脱水不彻底时,组织内残留水分阻碍石蜡渗入,导致石蜡无法充分浸入组织。这会使切片难以切取或切片质量差。脱水不彻底还可能引起组织膨胀、变软等问题。判断脱水是否彻底可通过组织硬度、重量变化和透明度综合评估。39.【参考答案】B【解析】氨水是苏木精染色后常用的蓝化试剂,可将红色或紫红色的核染色转变为稳定的蓝色。蓝化处理时间一般为30秒至1分钟,时间过长会使染色变浅。自来水也可用于蓝化,但效果不如氨水稳定。蓝化不充分会影响染色对比度。40.【参考答案】B【解析】石蜡切片机切片时,理想厚度误差应控制在±0.5微米以内,以保证切片厚度均匀一致。误差过大会影响切片质量和诊断准确性。切片厚度均匀性是衡量切片机性能和操作人员技术水平的重要指标。定期校准切片机对保证切片质量非常重要。41.【参考答案】B【解析】10%中性缓冲福尔马林是最常用的组织固定液,能良好保存组织形态和抗原性。95%乙醇主要用于细胞学涂片固定;丙酮多用于冷冻切片前的处理;甲醇主要用于血液涂片固定。中性缓冲福尔马林可防止酸沉淀,保持组织pH稳定,有利于后续染色。42.【参考答案】B【解析】苏木精是碱性染料,主要与细胞核内的酸性物质如DNA结合,使细胞核呈蓝紫色。伊红是酸性染料,主要使细胞质和间质染成红色。胶原纤维和红细胞在HE染色中均呈红色,但苏木精的作用对象是细胞核。43.【参考答案】B【解析】OCT化合物(冷冻包埋剂)是冰冻切片最常用的冷冻介质,能在低温下凝固,帮助组织快速冷冻并保持形态。石蜡用于常规石蜡切片;甲醛是固定液;二甲苯是脱蜡透明剂。OCT化合物具有良好的渗透性和低冰点,有利于快速冷冻。44.【参考答案】B【解析】一抗是直接识别并结合组织切片中目标抗原的特异性抗体,是IHC染色的核心。显色反应由酶标二抗或显色系统完成;封闭非特异性结合位点是封闭液的作用;信号放大通常由标记的二抗或聚合物系统实现。45.【参考答案】B【解析】乙醇是组织脱水最常用的试剂,通过浓度梯度逐步去除组织中的水分。二甲苯用于透明,即将乙醇置换出来;甲醛是固定液;石蜡是包埋介质。脱水不彻底会导致石蜡无法充分渗透,影响切片质量。46.【参考答案】B【解析】PAS(过碘酸雪夫)染色主要用于显示组织中的糖原、黏液物质和基底膜等碳水化合物成分。染色原理是过碘酸氧化糖原中的乙二醇基,生成醛基,再与Schiff试剂反应呈现紫红色。脂质用油红O染色;铁盐用普鲁士蓝染色;钙盐用VonKossa染色。47.【参考答案】B【解析】二甲苯是石蜡切片的常用脱蜡透明剂,能够溶解石蜡并使组织透明,便于后续水化和染色。乙醇用于脱水;水是染色介质;甲醛是固定液。脱蜡不彻底会影响染色效果,甚至导致切片脱落。48.【参考答案】B【解析】Masson三色染色是一种常用的结缔组织染色方法,胶原纤维通常被染成蓝色或绿色,肌纤维和细胞质呈红色,细胞核呈黑色或深棕色。该染色可用于区分胶原纤维与肌纤维,广泛应用于纤维化病变的评估。49.【参考答案】A【解析】规范的病理标本处理流程为:固定(保存组织形态)→脱水(去除水分)→透明(置换脱水剂)→浸蜡(石蜡渗透)→包埋(形成蜡块)→切片→染色。顺序错误会导致组织变形、切片困难或染色失败。50.【参考答案】A【解析】刚果红染色是检测淀粉样物质的经典方法,淀粉样物质在刚果红染色下呈橘红色,在偏振光显微镜下可见苹果绿色双折射。这是诊断淀粉样变性的金标准。铁沉积用普鲁士蓝染色;钙盐用VonKossa染色;脂质用油红O染色。51.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片厚度一般为2~4μm,此厚度既能清晰显示细胞和组织结构,又便于光线透过进行显微镜观察。0.5~1μm通常用于电镜样品;10~20μm过厚会影响观察;50~100μm为冰冻切片的常用厚度范围。52.【参考答案】B【解析】阳性对照是使用已知表达目标抗原的正常或病变组织切片,与待检标本同时染色,以验证整个染色体系的有效性。阴性对照通常用PBS替代一抗;不用二抗是排除背景染色的对照;未染色片不能作为对照。53.【参考答案】B【解析】防脱载玻片表面经过特殊处理(如多聚赖氨酸、硅烷等),可使贴附的切片牢固附着,避免在脱蜡、水化、染色等复杂处理过程中脱落。这是保证病理切片完整性和可阅性的关键步骤之一。54.【参考答案】B【解析】固定时间过长可能导致甲醛等固定剂过度交联蛋白质,造成抗原掩蔽效应,影响免疫组化染色的敏感性。适当固定时间通常为6~48小时,具体视组织大小而定。固定不足则会导致组织自溶变形。55.【参考答案】B【解析】银染色法(如GMS、PAP染色)利用银盐还原技术,可将神经纤维、网状纤维染成黑色,常用于显示网状纤维框架和神经病变。弹性纤维用VERHoeff-vanGieson染色;胶原纤维用Masson染色;肌纤维在HE中呈红色。56.【参考答案】B【解析】含有大量钙盐的组织(如骨组织、钙化病变)质地坚硬,直接切片困难,需进行脱钙处理。常用脱钙液包括硝酸、盐酸和EDTA等。软组织、脂肪组织和淋巴结一般无需脱钙即可直接包埋切片。57.【参考答案】B【解析】荧光免疫组化利用荧光素标记的抗体与目标抗原结合,通过特定波长的紫外光或可见激光激发荧光素发光,从而定位抗原。常用的荧光素包括FITC(绿光)、TRITC(红光)等。白光、红外光和X线均不用于荧光激发。58.【参考答案】A【解析】石蜡切片染色前的正确水化顺序是:二甲苯(脱蜡)→梯度乙醇(从无水乙醇到低浓度乙醇)→蒸馏水。此过程将石蜡去除并使组织逐步恢复亲水性,以便水溶性染料发挥作用。顺序颠倒会导致切片脱片或染色失败。59.【参考答案】B【解析】原位杂交(ISH)利用标记的核酸探针与组织切片中的互补DNA或RNA序列杂交,从而定位特定基因序列或转录本。该技术广泛应用于病毒基因组检测、基因重排分析和microRNA检测等。蛋白质用免疫组化检测;脂质和糖类用特殊染色。60.【参考答案】B【解析】切片皱褶多因切片时厚度不均、刀钝、组织过硬或展片水温不适所致。展片水温通常比石蜡熔点低5~10℃,温度过高或过低均可引起皱褶。切片过薄不会产生皱褶;染色过深和固定充分反而有助于切片质量。61.【参考答案】B【解析】10%中性缓冲福尔马林是病理组织固定最常用的固定液,能良好保存组织形态和抗原性,渗透速度适中,对大多数组织在24至48小时内可充分固定,是目前病理科首选的常规固定液。62.【参考答案】B【解析】脱水是石蜡切片制作的关键步骤,常用梯度乙醇(70%至100%)逐步置换组织中的水分,使组织由含水状态转为可被石蜡浸润的状态,为后续透明和包埋创造条件。63.【参考答案】B【解析】苏木精为碱性染料,主要与细胞核内的酸性物质如DNA和RNA结合,使细胞核呈蓝色,是HE染色中对细胞核进行特异性着色的关键步骤。64.【参考答案】B【解析】冰冻切片可在手术过程中短时间内完成制片和诊断,为术中决策提供依据,是外科医生判断病变性质和手术范围的重要手段,尤其适用于恶性肿瘤的术中快速诊断。65.【参考答案】A【解析】DAB(二氨基联苯胺)是免疫组化HRP酶促反应中最常用的显色底物,反应后生成棕黄色沉淀,定位于抗体结合部位,便于显微镜下观察和诊断。66.【参考答案】B【解析】PAS(过碘酸雪夫)染色利用高碘酸氧化糖原等多糖物质中的乙二醇基,生成醛基后再与雪夫试剂反应呈紫红色,常用于显示糖原、黏液物质和基底膜等结构。67.【参考答案】B【解析】石蜡切片在进行染色前需先经二甲苯浸泡脱蜡,二甲苯能有效溶解石蜡包埋剂,使组织恢复水性环境,为后续水化及染色步骤做好准备。68.【参考答案】B【解析】Masson三色染色中,肌纤维和胞质呈红色,胶原纤维和软骨呈蓝色或绿色,核呈黑色,常用于区分胶原纤维与肌纤维,广泛应用于肝脏纤维化和心肌纤维化的诊断。69.【参考答案】B【解析】标本离体后应尽快在6至8小时内完成固定,以免组织自溶或腐败影响病理诊断质量,尤其对肿瘤标本,及时固定有助于保持细胞形态和抗原活性。70.【参考答案】B【解析】苏丹黑B是一种脂溶性染料,可与组织中的脂类物质结合呈现黑色或深蓝色,常用于显示脂肪变性和脂质沉积,是脂肪染色的常用方法之一。71.【参考答案】C【解析】油镜通常具有100倍放大倍数,配合香柏油使用可减少光线折射损失,提高分辨率,是病理显微镜观察细胞形态和细微结构的重要镜头。72.【参考答案】B【解析】普鲁士蓝反应可特异性显示三价铁离子,反应后生成蓝色沉淀,常用于检测组织中铁沉积,对血色病、含铁血黄素沉积等疾病的诊断具有重要价值。73.【参考答案】B【解析】切片过薄时可能切掉部分组织层,导致病变组织缺失或结构不完整,影响病理诊断的准确性,一般石蜡切片厚度控制在3至5微米为宜。74.【参考答案】B【解析】多聚赖氨酸包被载玻片可增加玻片表面正电荷,与带负电荷的组织切片产生静电吸附作用,有效防止切片在染色过程中脱落,提高切片质量。75.【参考答案】A【解析】封片时封固剂未排尽空气或封片过快均易产生气泡,气泡会干扰显微镜下观察,影响病理诊断,操作时应缓慢封片并避免产生气泡。76.【参考答案】B【解析】伊红为酸性染料,主要与细胞质中的碱性蛋白结合,使细胞质和红细胞呈不同深浅的粉红色,与苏木精染色的细胞核形成鲜明对比。77.【参考答案】B【解析】OCT(聚乙烯醇和乙二醇混合物)是冰冻切片常用的冷冻包埋介质,具有适宜的硬度和冷冻特性,能保护组织形态,便于快速冷冻和切片操作。78.【参考答案】B【解析】染色后切片需经梯度乙醇由低浓度到高浓度逐步脱水,去除水分后再经二甲苯透明,最后用封固剂封片,确保切片干燥透明便于观察。79.【参考答案】B【解析】细胞学涂片因细胞分散且薄,常用95%乙醇快速固定,可良好保存细胞形态,避免细胞干燥变形,是痰液、胸腹水等细胞学检查的标准固定方法。80.【参考答案】A【解析】脱水时间过长或乙醇浓度过高会导致组织收缩、变硬、颜色发黄,影响染色效果和显微镜观察,应根据组织类型严格控制脱水和透明时
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