第章肿瘤免疫和其免疫检测

第二十七章肿瘤免疫与免疫学检验第章肿瘤免疫和其免疫检测第1页思索题小结第一节肿瘤抗原一、依据肿瘤抗原特异性分类二、依据肿瘤抗原产生机制分类第二节机体抗肿瘤免疫学效应机制一、抗肿瘤细胞免疫机制二、抗肿瘤体液免疫机制第三节肿瘤免疫学检验一、肿瘤标志物二、肿瘤患者免疫功效状态检测及临床意义第章肿瘤免疫和其免疫检测第2页肿瘤免疫学(tumorimmunology)是研究肿瘤抗原性质、机体对肿瘤免疫应答、机体免疫功效与肿瘤发生、发展相互关系以及肿瘤免疫学诊疗和免疫学防治科学。第章肿瘤免疫和其免疫检测第3页第一节肿瘤抗原

肿瘤抗原（tumorantigen)是指在肿瘤发生、发展过程中新出现或过分表示抗原物质。

第章肿瘤免疫和其免疫检测第4页机体产生肿瘤抗原可能机制为：①

基因突变；②

细胞癌变过程使原本不表示一些基因被激活；③

抗原合成过程一些步骤发生异常，如糖基化异常；④

胚胎时期抗原或分化抗原异常、异位表示；⑤

一些基因产物尤其是信号转导分子过分表示；⑥

外源性基因（如病毒基因)表示。第章肿瘤免疫和其免疫检测第5页1．肿瘤特异性抗原（tumorspecificantigen,TSA)是肿瘤细胞所特有新抗原，它只表示于肿瘤细胞，而不存在于正常组织细胞。

2.肿瘤相关性抗原(tumorassociatedantigen,TAA)是指非肿瘤细胞所特有，正常组织或细胞也可表示抗原物质，但这类抗原在癌变细胞表示水平远远超出正常细胞。一、依据肿瘤抗原特异性分类第章肿瘤免疫和其免疫检测第6页1．理化原因诱发肿瘤抗原2．病毒诱生肿瘤抗原3．自发性肿瘤抗原4．正常细胞成份异常表示⑴分化抗原:⑵过分表示抗原:⑶胚胎抗原:⑷细胞突变产生独特型抗原:二、依据肿瘤抗原产生机制分类第章肿瘤免疫和其免疫检测第7页病毒诱生肿瘤抗原第章肿瘤免疫和其免疫检测第8页

第二节机体抗肿瘤免疫学效应机制

机体抗肿瘤免疫学效应十分复杂,包括特异性和非特异性抗肿瘤机制相互交织,体液免疫与细胞免疫机制相互协调和补充,从而共同执行免疫监视功效。第章肿瘤免疫和其免疫检测第9页㈠T细胞

1.CD4+T细胞2.CD8+T细胞(在抗肿瘤效应中起关键作用)

3.γδ+T细胞㈡NK细胞㈢巨噬细胞一、抗肿瘤细胞免疫机制第章肿瘤免疫和其免疫检测第10页1.补体溶细胞效应2.抗体依赖细胞介导细胞毒效应3.抗体免疫调理作用4.抗体封闭肿瘤细胞表面一些受体5.抗体干扰肿瘤细胞粘附作用6.其它机制二、抗肿瘤体液免疫机制第章肿瘤免疫和其免疫检测第11页

第二节肿瘤免疫学检验

肿瘤免疫学检验是指用免疫学方法检测肿瘤抗原、抗体等肿瘤标志物和肿瘤患者免疫功效状态,为肿瘤诊疗、观察病情、评价疗效及预后含有主要价值。第章肿瘤免疫和其免疫检测第12页

近年来伴随当代科技不停发展,免疫学,分子生物学,细胞生物学,生物化学深入研究,发觉了许多特异性较强,有一定临床价值肿瘤标志物100各种,受到国内外学者高度重视。一、肿瘤标志物第章肿瘤免疫和其免疫检测第13页

肿瘤标志物（tumormarker，TM)是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生，反应肿瘤存在和生长一类物质，包含蛋白质、激素、酶（同工酶)、多胺及癌基因产物等。患者血液或体液中肿瘤标志物检测，对肿瘤辅助诊疗、判别诊疗、疗效观察、病情监测以及预后评价含有一定价值。（一)肿瘤标志物慨述1.肿瘤标志物定义第章肿瘤免疫和其免疫检测第14页特异性好与肿瘤类型(大小/分期)相关灵敏度高,能肿瘤能早期发觉。含有器官特异性监测肿瘤治疗效果监测肿瘤复发

理想肿瘤标志物预测肿瘤预后第章肿瘤免疫和其免疫检测第15页体液肿瘤标志物分类和命名还未完全统一，普通分为:⑴

胚胎抗原类:如AFP，CEA等，⑵

糖链抗原类:如CA125，CA15-3，CA19-9等。⑶

激素类:如患甲状腺髓样癌时降钙素升高，患绒毛膜细胞癌时hCG显著升高。⑷

酶和同工酶类:γGT，PAP等。⑸

蛋白质类:β2微球蛋白，铁蛋白，本周蛋白等⑹

癌基因产物类如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。2.肿瘤标志物分类第章肿瘤免疫和其免疫检测第16页⑴肿瘤大小和肿瘤细胞数目⑵肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物速度⑶肿瘤组织血液供给好坏⑷肿瘤细胞是否有坏死和坏死程度⑸肿瘤细胞分化程度和肿瘤分期⑹肿瘤细胞是否表示和合成肿瘤标志物⑺肿瘤标志物在体内降解和排泄速度3.影响血液和体液中肿瘤标志物浓度原因第章肿瘤免疫和其免疫检测第17页

4.肿瘤标志物临床应用⑴高危人群筛查⑵肿瘤辅助诊疗⑶肿瘤治疗效果评价⑷肿瘤复发监测和预后判断第章肿瘤免疫和其免疫检测第18页1.胚胎抗原类肿瘤标志物（二)常见肿瘤标志物⑴

甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP)AFP是胎儿发育早期合成一个糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎儿出生后很快即逐步消失。参考值:血清AFP<20μg/L第章肿瘤免疫和其免疫检测第19页①

原发性肝癌，77%患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP一直不升高；②

病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中AFP可有不一样程度增高，但普通在300μg/L以下；③

生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤等升高；④

妊娠三个月后，血清AFP含量开始升高，分娩后三周恢复正常。若孕妇血清中AFP异常升高，应考虑有胎儿神经管缺损畸形可能性。第章肿瘤免疫和其免疫检测第20页第章肿瘤免疫和其免疫检测第21页⑵

癌胚抗原（carcino-embryonicantigen，CEA)①

结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，转移性恶性肿瘤也有不一样程度阳性率；在恶性肿瘤随访，病情监测，疗效评价等方面有主要价值。②

肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不一样程度升高；③

吸烟者中约有33%人CEA＞5μg/L。1965年CEA发觉于成人结肠癌组织中，分子量约为200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌组织以及胎儿胃肠管组织中，故名癌胚抗原，是一个广谱肿瘤标志物。参考值:血清CEA<5.0μg/L第章肿瘤免疫和其免疫检测第22页第章肿瘤免疫和其免疫检测第23页

2.糖链抗原类肿瘤标志物第章肿瘤免疫和其免疫检测第24页（1)糖链抗原15-3(CA15-3)①乳腺癌，但在乳腺癌早期阳性率较低约为30%，转移性乳腺癌阳性率可达80%；②

其它恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢癌，子宫颈癌，原发性肝癌等，也有不一样程度阳性率；③

肝脏，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤疾病，阳性率普通低于10%。CA15-3是一个乳腺癌相关抗原，属糖蛋白，分子量超出400kD，可用一对单克隆抗体（MAb115D8和MAbDF3)进行双抗体夹心法来识别。与CA15-3同类多态性上皮粘蛋白抗原还有MCA，CA27-29，CA549等。参考值：血清CA15-3<28kU/L第章肿瘤免疫和其免疫检测第25页

（2)糖链抗原125(CA125)CA125是很主要卵巢癌相关抗原，1981年Bast发觉。CA125是一个大分子多聚糖蛋白。参考值:血清CA125<35kU/L①卵巢癌，阳性率约为61.4%。手术和化疗有效者CA125水平很快下降，若有复发，CA125升高可先于临床症状出现之前。②

其它恶性肿瘤，如乳腺癌40%，胰腺癌50%，胃癌47%，肺癌41.4%，结肠直肠癌34.2%，其它妇科肿瘤43%。③

非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，卵巢囊肿，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也有不一样程度升高。④

妊娠早期，CA125有升高。第章肿瘤免疫和其免疫检测第26页（3)糖链抗原19-9(CA19-9)CA19-9是一个与胰腺癌，胆囊癌，结肠癌和胃癌相关肿瘤标志物，又称胃肠癌相关抗原。参考值:血清CA199<37kU/L①

胰腺癌，胆囊癌，胆管壶腹癌时，血清CA19-9水平显著升高，阳性率约为74.9%，尤其是胰腺癌晚期病人，血清CA19-9浓度可达40万kU/L，是主要辅助诊疗指标；②

胃癌，阳性率约为50%，结肠癌，阳性率约为60%；③

急性胰腺炎，胆囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等疾病，CA19-9也有不一样程度升高，注意与恶性肿瘤鉴别。第章肿瘤免疫和其免疫检测第27页

3.酶类肿瘤标志物第章肿瘤免疫和其免疫检测第28页⑴前列腺特异性抗原(PSA)

参考值:血清t-PSA<4.0μg/L，f-PSA<0.8μg/L，

f-PSA/t-PSA>25％PSA是一个由前列腺上皮细胞分泌蛋白酶。在血清中PSA以两种生化形式存在：

一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)游离PSA（f-PSA)形式存在；大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、α2-巨球蛋白等结合形式存在，称复合PSA(c-PSA)。总PSA（t-PSA),包含血清中f-PSA和c-PSA。第章肿瘤免疫和其免疫检测第29页

【注意事项】在采集病人血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩,导尿等,将会造成血清PSA升高,应注意防止。血清PSA升高①

前列腺癌患者升高，但大约25%患者，其PSA水平正常；而大约有50%良性前列腺疾病患者PSA水平增高。为增加PSA对前列腺癌检测敏感性和特异性，可使用PSA年纪特异性参考范围，PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等；②

前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统疾病，也可见血清PSA水平升高，故当PSA在4.0μg/L～10.0μg/L灰区时，须进行f-PSA和f-PSA/t-PSA比值测定。第章肿瘤免疫和其免疫检测第30页第章肿瘤免疫和其免疫检测第31页NSE是烯醇化酶一个同功酶,烯醇化酶同功酶依据α,β,γ三个亚基不一样,可分为αα、ββ、γγ、αβ和αγ五种二聚体同功酶。γγ亚基组成同功酶属神经元和神经内分泌细胞特有,故命名为神经元特异性烯醇化酶,NSE是一个酸性蛋白酶,参加糖酵解。肿癌组织糖酵解作用加强,细胞增殖周期加紧,细胞内NSE释放进入血液增多,造成此酶在血清内含量增高。参考值:血清NSE<15μg/L⑵

神经元特异性烯醇化酶（NSE)第章肿瘤免疫和其免疫检测第32页【注意事项】NSE也存在于正常红细胞中,标本溶血会影响测定结果,所以采血时要尤其注意防止溶血。血清NSE升高见于①

小细胞肺癌（SCLC)。可用于判别诊疗，监测小细胞肺癌放疗、化疗后治疗效果。②

神经母细胞瘤，患者NSE水平异常增高，而Wilms瘤则升高不显著，所以测定NSE水平可用于上述疾病诊疗和判别诊疗。③神经内分泌细胞肿瘤，如嗜铬细胞瘤，胰岛细胞瘤，甲状腺髓样癌，黑色素瘤，视网膜母细胞瘤等血清NSE也可增高。第章肿瘤免疫和其免疫检测第33页AFU是一个溶酶体酸性水解酶，以往主要用于遗传性AFU缺乏引发岩藻糖贮积病诊疗。Deugnier等（1984)首先发觉原发性肝癌患者血清中AFU活性升高。参考值

：血清<420μmol/L⑶α-L-岩藻糖苷酶测定（AFU)

①原发性肝癌,患者血清中AFU活性显著升高,AFP阴性肝癌患者中AFU也可见升高,所以,二者联合检测有很好互补作用。②

其它恶性肿瘤,如肺癌、结肠癌、乳腺癌、子宫癌等也可有部分病例升高。③

慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高,随病情好转AFU下降,动态监测有利于与肝癌判别。④

妊娠期间,AFU升高,分娩后快速下降。第章肿瘤免疫和其免疫检测第34页

4.激素类肿瘤标志物第章肿瘤免疫和其免疫检测第35页hCG是胎盘滋养层细胞分泌一个糖蛋白类激素,是监测早孕主要指标。在异常情况下,恶性肿瘤也可产生hCG。参考值上限为:5IU/L⑴人绒毛膜促性腺激素(hCG)

①滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤hCG升高,如绒毛膜细胞癌、葡萄胎、精原细胞睾丸癌等②其它肿瘤如乳腺癌、胃肠道癌、肺癌等也可见升高。③良性疾病如卵巢囊肿、子宫内膜异位症、肝硬化等hCG也可见增高。第章肿瘤免疫和其免疫检测第36页CT是由甲状腺滤泡旁细胞即C细胞分泌多肽激素,主要生理作用是降低血钙。参考值＜100ng/L⑵

降钙素（calcitonin,CT)

①甲状腺髓样癌血清降钙素升高,其它肿瘤如肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也见增高。②肾功效衰竭患者降钙素常升高。【注意事项】因为降钙素在血液中半寿期短约为10min,样本搜集后应及时处理,冷冻保留。第章肿瘤免疫和其免疫检测第37页

5.蛋白质类肿瘤标志物第章肿瘤免疫和其免疫检测第38页β2M是一个低分子蛋白，人体除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞以外，全部有核细胞都有β2M。因为β2M分子量小，易于由肾小球滤过，但几乎全部由近曲小管重吸收，所以正常人血和尿中β2M含量很低。参考值：血清<2.4mg/L;尿<320μg/L⑴β2-微球蛋白(β2M)β2M升高见于:①

恶性肿瘤，慢性淋巴细胞白血病等。②

肾脏疾病:急慢性肾盂肾炎，肾小管药品性损害等③

肾移植排斥反应时。④

免疫性疾病:系统性红斑性狼疮，艾滋病等。【注意事项】尿标本采集后,为防止β2M分解,应加适当NaOH缓冲液调PH至7.0左右,然后置4℃保留,2天内测定。第章肿瘤免疫和其免疫检测第39页铁蛋白是判断体内是否缺铁敏感指标。Fer升高还与肿瘤相关，癌细胞含有较强合成铁蛋白能力，所以也是一个肿瘤标志物。血清参考值:男性15~200μg/L女性12~150μg/L⑵

铁蛋白(ferritin,Fer)①

各种恶性肿瘤和白血病可见血清铁蛋白升高。②

各种炎症感染、急性心肌梗死、重复输血等,见铁蛋白升高。③

铁蛋白<12μg/L时即可诊疗为缺铁。是诊疗隐性缺铁性贫血可靠指标。

第章肿瘤免疫和其免疫检测第40页肿瘤标志物

参考值

相关肿瘤CA50<24kU/L胰腺癌、结肠癌、胃癌等

CA72-4<6kU/L胃癌、粘液性卵巢癌等

CA242<20kU/L胰腺癌、结肠癌、胃癌等

前列腺酸性磷酸酶（PAP）<2.0μg/L前列腺癌鳞状上皮细胞癌抗原（SCC）

<1.5μg/L宫颈癌、肺和头颈部鳞癌等

组织多肽抗原（TPA）

<80U/L膀胱癌、前列腺癌、消化道

恶性肿瘤细胞角蛋白19片段

<3.3μg/L非小细胞肺癌（NSCLC）（CYFRA21-1）唾液酸

<1.8mmol/L肺癌、胃癌、黑色素瘤等

6.其它惯用肿瘤标志物第章肿瘤免疫和其免疫检测第41页（三)肿瘤标志物检测注意事项1.标本采集:

各种物理检验对TM检测影响药品对TM检测影响标本保留对TM检测影响溶血标本对TM检测影响酶类和激素类肿瘤标志物特点第章肿瘤免疫和其免疫检测第42页2.检测方法和试剂:方法学差异试剂盒差异测定标准化问题所以，在工作中要尽可能使用同一个方法，同一个仪器和同一厂家试剂盒进行测定。

第章肿瘤免疫和其免疫检测第43页

3.TM检测干扰原因⑴携带污染(carry-over)⑵“钩状效应”（hookeffect)⑶嗜异性抗体：可造成在无抗原情况下，出现肿瘤标志物浓度增高假象。嗜异性抗体可出现在曾被鼠或宠物咬过人，以及使用过动物免疫剂（如单克隆抗体)治疗过人。第章肿瘤免疫和其免疫检测第44页

一个肿瘤可分泌各种肿瘤标志物,而不一样肿瘤或同种肿瘤不一样组织类型可有相同肿瘤标志物。所以,单独检测一种肿瘤标志物,可能会因为测定方法敏感性不够而出现假阴性,联合检测各种肿瘤标志物有利于提升检出阳性率。为此,选择一些特异性较高,能够互补肿瘤标志物联合测定,对提升肿瘤检出率是有价值。惯用肿瘤标志物联合使用。（四)肿瘤标志物联合应用第章肿瘤免疫和其免疫检测第45页惯用肿瘤标志物联合检测临床应用

肿瘤

首选标志物

补充标志物肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC.ACTH、降钙素肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降钙素、铁蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP结肠直肠癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睾丸肿瘤AFP、hCG宫颈癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌

无