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文档简介

负荷尿中维生素B1

的测定

——

荧光分析法维生素B（硫胺素)维生素B1，

又称硫胺素

。它是人体必需的13种维

生素之一

，

是水溶性维生素

。维生素B1为无色结晶体,可溶于水

，

在酸性溶液中很稳定

，

在碱性溶液易被

氧化和受热破坏。

食物中维生素B1来源维生素B1广泛存在于天然食物中

，

含量较丰富

的有：

谷类、豆类及干果类;动物内脏(肝、心及

肾)、瘦肉含量也较多。

10/14/2019■

尿负荷试验■

尿中维生素B1与肌酐含量比值■红细胞转酮醇酶活力系数机体维生素B1

的营养状况评价10/14/2019水溶性维生素的特性■在体内没有非功能性的单纯储存形式

，

当机体

饱和后

，

摄入的维生素从尿中排出;■若组织中的维生素耗竭

，

则给予的维生素将大

量被组织摄取利用

，

从而尿中排出量减少。可利用负荷试验对水溶性维

生素的营养水平进行鉴定。

10/14/2019本实验将通过尿负荷试验评价人体维

生素B

营养状况。实验目的10/14/2019实验原理维生素B

结构式10/14/2019荧光光度计漩涡震荡器VitB标准应用液:0.29μg/ml。

（维持VitB的稳定)（联合作用

，

可以破坏样品中的VitB)10%双氧水正丁醇无水硫酸钠10%双氧水正丁醇无水硫酸钠PH=4的酸性水1N

NaOH溶液

氯化苯磺酰碱性铁氰化钾溶液

◆（氧化剂)仪器与试剂◆◆◆◆◆

◆

◆

◆

◆

◆10/14/2019实验步骤1收集负荷尿受试者在清晨排空小便后,空腹口服维生素B15mg,饮水1000ml,收集服药后4h内所有尿液,并在尿液中加入1g左右草酸,使尿液保持在PH3-5,防止尿液中维生素B1降解。用量筒量取总尿液量并记录,4℃短期保存,-20℃长期保存。

10/14/201910/14/2019A

B

C■

取25ml比色管3支

，

按下表进行操作:2

测定①荧光光度计

，

发射波长365nm（UV)，

激发波长435nm；②正丁醇清洗比色皿

，

调零；③测定各管荧光值：

测定顺序为C→B→A，

每管测两个平行样；④结束后正丁醇清洗比色皿

，

放回原处■

计算公式：3.实验结果判定A

B10/14/2019C判断标准负荷试验中,口服5mg维生素B,4h后,100~200ug为不足尿中VitB排出量<100ug为缺乏>200ug为正常>400ug为充裕10/14/2019注意事项■

加入正丁醇萃取时振荡均匀

，

分层后吸取水分时

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