CN119506189A 呼吸道样本单细胞悬液的制备方法及其应用 （中国医学科学院病原生物学研究所）_第1页
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文档简介

呼吸道样本单细胞悬液的制备方法及其应用本发明涉及一种呼吸道样本单细胞悬液的新鲜呼吸道样本置于无菌收集瓶中；加入Dulbecco改良Eagle培养基补至5_30ml，然后加入液化剂液化，于30_40℃水浴中液化10_30分29.根据权利要求1_4任一项所述的方法，3悬液进行研究，大都集中在仅痰液液化(EfthimiadisA,SpanevelloA,HamidQ,etal.Methodsofsputumprocessingforcellcounts,immunocytochemistryandinsituhybridisation.EurRespirJSupFanX,etal.COVID_19immunefeaturesrevealedbyalarge_scalesingle_celltranscriptomeatlas[publishedcorrectionappearsinCell.2021Nov11；184(23):[0006]S2加入Dulbecco改良Eagle培养基(dulbecco'smodifiedeaglemedium，简称4[0015]1.使用本发明的方法可获得现有技术难以获得的高细胞活率的呼吸道样本单细5[0046]在本发明的一个优选实施方案中，S4中温和的细胞消化酶为Accutase细胞消化[0048]在本发明的一个优选实施方案中，S5中过滤入DMEM+9_11％FBS或其他合适的培养基重悬细胞以使单细胞悬液的细胞数量适于进行后6度≥98Accutase细胞消化酶购自ThermoFisher(活性为500_720U/ml)，细胞计数使用丙啶(Propidiumiodide))染色液染色，将其转移至细胞计数板中，将细胞计数板插入Countstar智能细胞分析仪中进行全自动的细胞

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