动物细胞融合与单克隆抗体第二课时

会计学1动物细胞融合与单克隆抗体第二(dìèr)课时第一页,共21页。

3.融合(rónghé)过程:诱导融合的方法(fāngfǎ)?灭活病毒第1页/共21页第二页,共21页。

植物细胞(xìbāo)杂交与动物细胞(xìbāo)融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理使用的酶诱导方法主要用途细胞(xìbāo)膜的流动性细胞(xìbāo)的全能性细胞膜的流动性纤维素酶、果胶酶

物理方法（离心(líxīn)、振荡、电激)

化学方法（PEG)物理、化学方法灭活的病毒获得杂种植株制备单克隆抗体去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合第2页/共21页应用(yìngyòng):最重要的用途是制备单克隆抗体第3页/共21页意义(yìyì)：突破了有性杂交(zájiāo)方法的局限，使远缘杂交(zájiāo)（种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。

思考？1.抗体由何种细胞产生?如何产生?2.抗体的化学本质是什么?

与抗原作用(zuòyòng)的特点?

主要分布在哪里?3.用传统的方法如何获得抗体?二、单克隆抗体(kàngtǐ)的制备第4页/共21页第五页,共21页。

第5页/共21页抗体(kàngtǐ)的传统生产方法从血清(xuèqīng)中分离抗体该法制备抗体的特点:

产量(chǎnliàng)低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。

多种效应B细胞动物体内多种抗体抗原第6页/共21页单克隆抗体(kàngtǐ)的制备单克隆抗体:单个细胞克隆产生(chǎnshēng)的化学性质单一,特异性强的抗体利用效应B细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得(huòdé)杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞设计方案:第7页/共21页单克隆抗体的制备(zhìbèi)过程第九页,共21页。

第8页/共21页杂交细胞灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫的小鼠提取杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择性培养基第二次筛选能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体第9页/共21页第10页/共21页02整个制备过程为何要经过(jīngguò)两次筛选?01植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体的制备)过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体的融合(物、化法)动物细胞的融合(物、化、生法)第三步杂种细胞的筛选与培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯意义和用途(1)克服远源杂交不亲和的障碍，大大扩展了杂交的亲本组合范围(2)克服有性杂交的母系遗传现象，获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传(1)制备单克隆抗体等

(2)诊断、治疗、预防疾病第11页/共21页三、单克隆抗体(kàngtǐ)的应用第十三页,共21页。

（1)作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易(jiǎnyì)、快速（如同位素标记单克隆抗体，可诊断(zhěnduàn)肿瘤、心血管畸形等)第12页/共21页运载(yùnzài)药物生物导弹=单克隆抗体(kàngtǐ)+药物，治疗肿瘤)第13页/共21页("生物导弹”—单抗导向(dǎoxiànɡ)，药物为弹头)B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

下图为某同学(tóngxué)根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案2.该方案能达到预期效果吗？为什么？4.图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。

1.该实验方案的目的是__________3.A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______5.C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。

制备(zhìbèi)单克隆抗体B细胞(xìbāo)抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50例1:第14页/共21页1.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交(zájiāo)细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（

）

A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞

C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A巩固(gǒnggù)练习2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确(zhèngquè)的是（)诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同

C.操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞

D第15页/共21页3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（)A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合

B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导(yòudǎo)融合而成

C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导(yòudǎo)融合而成

D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导(yòudǎo)融合而成

D4.只能使动物(dòngwù)细胞融合的常用诱导方法是（

)

A．PEG

B．灭活的病毒

C．电刺激D．离心B第16页/共21页5.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定(tèdìng)培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是

（)①淋巴细胞

②小鼠骨髓瘤细胞

③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞

⑤杂交瘤细胞A.②④B.①③⑤C.①②③④

D.②③

C6.“生物导弹”是指

（)A.单克隆抗体

B.杂交瘤细胞C.产生(chǎnshēng)特定抗体的B淋巴细胞

D.在单克隆抗体上连接抗癌药物

D第17页/共21页A、B细胞(xìbāo)为动物细胞(xìbāo),请据图回答问题:A细胞(xìbāo)B细胞(xìbāo)C细胞D细胞(1)若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为

细胞,D细胞具有两个亲本细胞的特征,一方面因具有骨髓瘤细胞的

性质,通过

方式产生大量细胞,我们称之为

过程;另一方面能分泌大量的抗体,我们把该过程分泌的抗体称

.杂交瘤连续分裂有丝分裂单克隆单克隆抗体练一练第18页/共21页(2)D细胞中产生的抗体其化学本质是,合成该物质的场所是,它是由控制合成的,合成过程(guòchéng)包括和两个重要步骤.球蛋白核糖体基因(jīyīn)转录(zhuǎnlù)翻译(3)D细胞中产生的抗体具有

作用,与血清抗体相比其优越之处在于

强

高.免疫特异性灵敏度