CN119510779A 一种定量多肽的筛选方法 （中国肉类食品综合研究中心）_第1页
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文档简介

进行进一步的Blast物种特异性分析和PRM数据2将所述蛋白提取液制备成不同浓度的蛋白提取液，并将所述不同浓基于所述复筛特异性定量多肽和不同浓度的蛋白提取液进行PRM数据采集，得到复筛基于所述复筛特异性定量多肽的PRM数据筛选所述复筛特异性定量多肽的响应值与所5.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述高分辨质谱检测的色谱条件包所述高分辨质谱检测的质谱条件包括：喷雾电压3400V；毛细管温度320℃；鞘气40响应值与所述蛋白提取液浓度呈现正相关的多肽使3[0002]随着居民生活水平的提高和消费习惯的改变，肉制品行业呈现出稳定增长的趋基于所述复筛特异性定量多肽和不同浓度的蛋白提取液进行PRM数据采集，得到基于所述复筛特异性定量多肽的PRM数据筛选所述复筛特异性定量多肽的响应值4[0011]优选的，所述净化的方式包括固相萃取，所述固相萃取的萃取柱为C18固相萃取0.1%的三氟乙酸溶液活化C18固相萃取柱；所述固相萃取的洗脱条件包括依次使用体积浓乙腈溶液和体积浓度为0.5%的乙酸溶液进分析后的数据进行多元统计分析，对多元统计分析中的层聚类分析结果进行进一步的5基于所述复筛特异性定量多肽和不同浓度的蛋白提取液进行PRM数据采集，得到基于所述复筛特异性定量多肽的PRM数据筛选所述复筛特异性定量多肽的响应值[0019]得到所述蛋白提取液后，本发明将所述蛋白提取液制备成不同浓度的蛋白提取的方式可以为固相萃取；作为一种实施方式，所述固相萃取的萃取柱可以为C18固相萃取为0.1%的三氟乙酸溶液活化C18固相萃取柱；所述固相萃取的洗脱条件可以为依次使用体6[0022]得到所述采集后的数据后，本发明将所述采集后的数据分析检测到445个蛋白以及3874条多[0024]得到所述复筛定量多肽后，本发明将所述复筛定量多肽进行Blast物种特异性分的数据库可以为UniProt数据库（https://的具体过程没有特殊限定，将所述复筛定量多肽输入对应的数据库中进行常规Blast物种[0026]得到所述复筛特异性定量多肽的PRM数据后，本发明基于所述复筛特异性定量多肽的PRM数据筛选所述复筛特异性定量多肽的响应值与所述蛋白提取液浓度呈现正相关的响应值与所述蛋白提取液浓度呈现正相关的多肽使用的软件可以为Skyline软件。在具体7[0029]按照每200μL提取液2O扫描分辨率120000，质量扫描范围m/z350~2000，自动增益值为3×106，注入时间为100对前处理后不同浓度的蛋白提取液酶解净化得到的多肽进行高分辨质谱采集的准曲线工作溶液采用高分辨质谱中的PRM扫描方式进行数据采集，能够获得89条靶向多肽8[0038]在这17条多肽中，本发明同时也找到了之前已授权专定量多肽（即表1中加粗部分的三条多肽再次证明通过本发明筛选方法可以有效地提高9[0042]尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅

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