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文档简介
1、、血液检查、1、红细胞计数2、血红蛋白测定3、红细胞形态检查4、白细胞计数5、白细胞分类计数6、白细胞形态检查7、血小板计数8、血小板形态检查。红细胞计数,1,血红蛋白测定,2,红细胞形态检验,3,2节血液检验(a),了解教育目标、红细胞数、血红蛋白方法,了解红细胞的形态特征,了解红细胞数、血红蛋白测定的临床意义。红细胞的发育过程,造血干细胞早期红细胞中间红细胞后期红细胞脱核网状红细胞成熟红细胞,红细胞的祖先细胞原始红细胞,(有丝分裂),48h,成熟红细胞,铁铁代谢proporphyrin 胆色素代谢glovin蛋白质代谢,衰老红细胞,红细胞发育过程,120日。6,检查方法1。手动显微镜2。血
2、液分析仪方法,一,红细胞数,7,1。手动显微镜(1)血液分析器校准(2)在主要医疗单位和分散患者(3)中应用时间、重复性差异、准确度为操作员技术水平2。血液分析仪方法简单,重复性好,适用的大批量集中检测精度为仪器性能和工作状态,定期校准,质量控制,方法评价。手工显微镜,8,定义:用等时稀释法对血液进行一定倍数稀释后,倒入改良的Neubauer计数板,在显微镜下计算并转换一定范围的红细胞数,可以求出每升血液中的红细胞数。9,改进的牛宝计数板,计数板,压线细胞计算原则:左,右,数不清,12、血细胞计数室每个计数区的计算对象、范围和单位转换、计数区细胞种转换方法、4个大方格白细胞N/410稀释倍数1
3、06方形和中央5个中方格红细胞、血小板N510稀释倍数106两侧计数室方形和中央嗜酸性粒细胞、体N稀释,13,红细胞稀释液成分和作用,稀释液成分作用笔记,Hayem液体NaCl,Na2SO4,HgCl2控制渗透,红细胞悬浮液和防腐效果增加,高球蛋白血症,蛋白质沉淀引起的红细胞聚集,柠檬酸钠稀释剂NaCl,准备计数器板2。稀释液:2ml3。加血:10l混合4。池5。数量6。计算:红细胞计数=N/5*25*10*200*106/L报告结果的方法:X.X1012/L,红细胞计数工作,15,成人:男性(4 5.5) 1012/l女性(3.5 5.0) 1012/l新生儿:(6.0 7.0) 1012/
4、l,基准值,16,1。分析前质量管理患者的准备,标本收集,储存温度和时间2。分析中质量控制系数错误(技术错误和固有错误)、白细胞影响3。分析后结合质量控制临床数据,质量控制,血红蛋白(血红蛋白,Hb或HGB)组成,2,血红蛋白测定,glovin:4,hem:4,bin:4 ,32,血红素结构,O2,Hba:alpha 22成人95%以上,Hba 2:alpha 22成人约2 3%,hbf(胎儿HB):alpha 2成人1%以下,每个HB分子都有alpha肽,21,氰基高铁血红蛋白(HiCN)测定方法-十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法-叠代高铁血红蛋白(HiN3)法-碱羟基血红蛋白叠代血
5、红蛋白测定-溴氰基三甲胺血红蛋白测定,I .原则,HB,cn-,氧化,HiCN为黄褐色,最大吸收峰540nm。根据标本的吸光度可以知道Hb浓度。,HiCN,Hi,注:硫化血红蛋白(SHb)不能转换。氰化钾0.05g高铁氰化钾0.2g磷酸二氢钾0.14g非离子表面活性剂1.0ml蒸馏水1000ml,2。调节试剂、HiCN转换液(问题液)、ph 7.0 7.4,密封在棕色玻璃瓶中保管。氧化,pH调整,促进溶解,防止浊度,CN-,3 .方法,4 .在实际工作中,可以使用HiCN基准液体,也可以通过生化方法绘制标准曲线或获取k值来计算。k=(g)/a,1.5.0 mlhb转换液血液20ul,混合5mi
6、n不动。2 .用分光光度计比色、波长540nm、空白转换液调整0,测定吸光度“a”。3 .使用符合WHO标准的光度计时,可以根据“a”直接计算Hb浓度。氰化高铁血红蛋白测定方法,25,血红蛋白浓度计算公式:Hb(g/l)=a 540 hicn/4464458/1000251=a 367.7 a 540 hicn:测量管吸光度44:毫摩尔吸光系数64458/11,3 .方法,4 .在实际工作中,可以使用hicn参考液体,根据生化方法绘制标准曲线或获取k值进行计算。k=(g)/a,1.5.0 mlhb转换液血液20ul,混合5min不动。2 .用分光光度计比色、波长540nm、空白转换液调整0,测
7、定吸光度“a”。3 .使用符合WHO标准的光度计时,可以根据“a”直接计算Hb浓度。氰化高铁血红蛋白测定方法,HB(g/l)a 500 . 129810 . 26550 . 3852 . 523,k=HB/;a=500/1.301=384.32,HB=ka,氰化高铁血红蛋白测定方法,1 .KCN是剧毒药物,防止污染。2.HiCN改性剂不能保存在塑料瓶中。否则CN-下降,结果低。分光光度计应定期修改和使用辅助比色杯。4.标准曲线或k值需要定期校准。iv .注意事项,氰化高铁血红蛋白测定方法,29,血红蛋白,SDS-Hb,SDS-Hb,SDS,540纳米,血红蛋白浓度,吸光度,十二烷基硫酸钠血红蛋
8、白(SDS-Hb)方法,方法评估,HiCN方法,SDS-HB方法,优点:操作简单;颜色快,结果稳定。缺点:氰化钾毒性强。高白细胞或高球蛋白血症等会引起混浊。HbCO切换缓慢。参考方法,优点:简单操作;结果稳定。无公害。缺点:摩尔消光系数不确定。破坏白细胞。质量差异很大。子选取方法,SDS-Hb法测定血红蛋白吗?1 .HiCN方法绘制标准曲线,2 .SDS-Hb方法绘制标准工作曲线,1)使用4种不同浓度的抗凝剂或溶解血液测量吸光度,寻找Hb浓度。2)用SDS-Hb法测定4个标本的吸光度。3)以4个样本Hb浓度为横坐标,以SDS-Hb方法测量的吸光度为纵坐标绘制标准工作曲线。32,预分析质量控制:
9、在同一红细胞系数分析中的质量控制技术错误:稀释倍数、分光光度计波长、光狭缝、比色杯光路径校正HiCN转换溶液:棕色玻璃瓶HiCN标准:主要质量控制水:在室内质量控制分析后的质量控制:相同红细胞数、质量控制。33,成人:男性:120 160g/l;女性:llo 150g/l. 新生儿:170 200g/l. 老年人(70岁以上):男性:94 122g/l;女性87-112g/l .参考值,34,轻度贫血,成年男性HB 120g/l,成年女性110g/l;中度贫血90g/l;严重贫血60g/l;严重贫血30g/l .临床意义,35,3,红细胞形态检查,红细胞大小,形态,染色及内涵是否异常,1 .显
10、微镜分析是利用人工显微镜法进行血液涂片染色观察,仪器校准标准方法和检查审查方法。2.计算机图像分析建立了以正常红细胞形态为标准进行分析的统计模型,可以用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。3.血液分析仪法提供红细胞数量和其他相关因素,对异常结果发出警报,但没有提供准确的信息,必须用血液检测板进行验证。、检测原理和方法学评价,1 .有血细胞形态检查资格的人2。选择细胞分布均匀区进行显微镜检查3。整体规格检查顺序低比例镜细胞分布及染色油镜细胞形态,其他异常细胞是否存在4。减少人类影响因素浏览整个页面,质量保证,38、39,正常红细胞,双凹盘大小平均7.2m(6.7-7.7m);浅粉色,Hb填充好,中
11、间染色区域合理,直径约三分之一;细胞质没有异常结。40,外周红细胞的形态变化,红细胞大小异常小,大,大,大小不均的红细胞的形态异常的球,椭圆,靶,嘴,镰刀,刺,钝齿,泪滴,裂片,形态不均匀的血红蛋白充填度和着色异常的低色素,高色素,高色素,1 .红细胞大小以上(1)红细胞直径,提示血红蛋白合成障碍见于缺铁性贫血、球蛋白生成障碍贫血。(2)大红细胞:指直径大于l0m的红细胞,常见于巨红细胞成分贫血,也见于溶血性贫血、恶性贫血等。(。(3)巨红细胞:直径大于15m的红细胞。巨红细胞成分贫血最常见。(4)红细胞大小不均匀:同一患者红细胞之间的直径差异是原来的两倍以上。(。大红细胞的直径达12m,小尺
12、的直径仅为2.5m。严重增生性贫血中常见,巨赤红细胞成分贫血的情况尤为明显。2 .红细胞的异常形态(1)球形细胞:红细胞在血液中呈球形,涂膜剂的红细胞中心着色深,体积小,显示出球体的立体感。(2)椭圆形细胞:红细胞呈椭圆形,条状,两端钝圆,长轴变大,短轴变短。(。遗传性椭圆形细胞症,大细胞贫血中发现。缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨红细胞贫血、镰状细胞贫血也有。正常人的血液约占l%,但不超过15%。(3)靶细胞:红细胞的中心和细胞的周长染色更深,其间有苍白部位的环,不会像射击的靶一样染色。各种低色素贫血,尤其是球蛋白生成不良性贫血,HbC病,阻塞性黄疸病,胰切除术后常见。(4)粒状细胞:红细胞中央有
13、裂缝,中央苍白的区域扁平,看起来有点张开的口型或鱼嘴。(。口腔红细胞增多症中常见,儿童消化系统疾病引起的贫血也见于乙醇中毒、部分溶血性贫血和肝病患者。正常人偶然(4%)。(5)镰状细胞:红细胞的形态为镰刀形,线型为腺。镰状细胞贫血(HbS-S,HbS-C)和镰状细胞特性(HbA-S)的血液样本,在缺氧的条件下有很多镰状细胞。(6)可见细胞:红细胞表面有针状突起,如果间隔不均匀,突起的长度和宽度可能会不同。(。主要见于遗传性或后天性-脂肪白色缺乏症,最多可发现70% 80%。胰切除术后,酒精中毒性肝病,尿毒症也可见。(7)新月形红细胞:红细胞不完整,体积大,新月形,直径约20m。发作性睡眠血红蛋
14、白尿中发现。(8)泪滴细胞:成熟的红细胞,例如眼泪和肚子。贫血或骨髓纤维化多的时候,正常人也能发现。(9)代码形式的形成:红细胞的表面电荷发生变化,使彼此像钱一样连接。(10)红细胞:红细胞碎片或不完美的红细胞。播种血管内凝血、微血管疾病溶血性贫血、重量球蛋白生成障碍贫血、巨红细胞成分贫血、严重烧伤。正常人血多马罗夫细胞低于2%。(11)红细胞的形态不统一,意味着红细胞的形态发生了很大的变化,产生了豆、梨、蝌蚪、麦粒、棍棒等不规则的奇怪形状。(。这种细胞在某些感染或严重贫血的时候,主要是在巨大的红亚红细胞成分贫血中发现的。,3 .染色异常(1)正常色素:除正常人外,还发现急性出血、再生障碍性贫血、白血病等。(2)低色素:红细胞生理中心浅染色区扩大,显示血红蛋白水平明显下降。缺铁性贫血、球蛋白形成障碍性贫血、缺铁性贫血,以及某些血红蛋白疾病中很常见。(3)高色素:中心酸橙区域消失,颜色深,细胞形状变为红色,细胞大小大。巨红细胞成分贫血最常见。(4)多色:刚摘除核,红细胞尚未完全成熟,因此细胞体积更大。多色红细胞的增加暗示骨髓红细胞功能的活性。特别是在溶血性或急性出血性贫血中发现。4 .红细胞出现异常结构(1)碱性红细胞。在Rui染色条件下,成熟红细胞或红细胞的细胞质中形状不同的蓝点,即核糖核酸(RNA),属于不完全
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