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文档简介
1、,“将知识装进大脑,将垃圾打包带走”,组织学 与胚胎学,基础医学院形态学教研室 程艳华,Histology and Embryology,第1章 绪 论,重点:组织学的定义 人体的基本组织 石蜡切片术 HE染色,考试模式,实验考试:20分 期中考试:20分 100分 期末考试:60分,第1章 绪 论,一、组织学研究内容 组织学(histology): -研究机体微细结构及其相关功能的科学,机体细胞、组织、器官、系统 方法利用显微镜观察组织切片,构成人体的基本组织有四大类,上皮组织,神经组织,肌组织,结缔组织,器官是由不同的组织发育分化而成,上皮组织,肌组织,结缔组织,神经组织,研究内容,细 胞
2、,细胞膜,细胞质,细胞核,线粒体 内质网 核糖体 高尔基复合体 溶酶体 微体 中心体 细胞骨架,糖元 脂滴 色素,常染色质 异染色质,核膜-核孔 核仁 核基质 染色质,细胞器 细胞基质 包涵物,核被膜 染色质 核 仁 核基质,细 胞 核,核外膜 核周隙 核内膜 核孔 核质侧核纤层(支架),核液 核骨架,细丝 颗粒 相随染色质,常染色质功能活跃 异染色质功能静止,遗传物质DNA和组蛋白在细胞间期的形态,胚胎学( Embryology)是研究生物个体发生、发育、发展及其机理的科学。,二、组织学常用研究技术,(一)一般光学显微镜技术 (简称光镜 light microscopy, LM ) 分辨率为
3、0.2 m 可将组织放大1500倍左右。,显微镜的构造,目镜,物镜,载物台,粗细调节螺旋,光源,聚光器,镜臂,镜座,显微镜镜下观察组织,必须制作成组织标本,石蜡切片: 取材固定脱水透明浸蜡包埋切片 染色 封片,最常用的染色方法是: 苏木精-伊红染色( HE染色),苏木精(hematoxylin): 碱性染料,能将细胞核染成蓝紫色。 伊红(eosin): 酸性染料,能将细胞质染成红色。,组织结构的嗜色性,嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。 可被苏木精染成蓝紫色。 嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。 可被伊红染成红色。 中 性:对于两种燃料亲和力 都不强的性质。 HE染色着色淡。,HE染色,其
4、他染色:,硝酸银染色:组织经硝酸银处理,呈棕黑色,主要用于神经组织和内分泌细胞研究 重铬酸盐染色法,异染性 : 肥大细胞中的颗粒经甲苯胺蓝等蓝色染料染色 后,呈紫红色,称为异染性。,其他常用的制片方法 冰冻切片 涂片、铺片 磨片 其它光学显微镜技术: 荧光显微镜 相差显微镜 暗视野显微镜 激光扫描共聚焦显微镜,(二)电镜技术 (electron microscope EM,简称电镜 ) 以电子束代替光源,以磁场代替透镜,进行聚集和放大,最后将物体的影象投射到荧光屏或照相底片上。 分辨率为0.2nm 可将物体放大几千到几十万倍。,透射电镜术 (transmission electron micr
5、oscopy, TEM) 观察组织细胞的内部结构 扫描电镜术 (scanning electron microscopy, SEM) 观察组织细胞表面的立体结构 冰冻蚀刻 (freeze etching method) 观察细胞断裂表面的形态结构 分析电镜 X-射线显微分析术(analytical electron micro-scope) 研究细胞、组织内元素种类分布和含量,TEM,浆细胞,SEM ,纤毛,SEM ,微绒毛,1.电子密度高(electron dense) 电子束投射到密度大的样品,电子散射多,投射到荧光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片上则呈黑色,称电子密度高。 2.电子密度低(
6、electron lucent) 反之,称电子密度低。,透射电子显微镜,(三)、组织化学和细胞化学技术,糖类显示法PAS反应:过碘酸Schiff反应,简称PAS反应(periodic acid Schiff reaction) 检测组织活细胞中有无多糖存在。 原理: 酶类显示法 脂类显示法 核酸显示法,PAS反应,小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒,(四)、免疫组织化学和细胞化学技术 利用抗原(antigen, Ag),抗体(antibody)特异 结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。,辣根过氧化物酶标记,荧光素标记,(五)、原位杂交技术(in situ hybridization),特异性
7、核酸组织化学术检测基因(DNA片段)的有无、及在转录水平检测基因的活性(mRNA)。 原理:用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合(杂交),并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量 常用标记物有放射性核素和地高辛,(六)、细胞培养,实验中的组织工程耳,(七)、共焦激光扫描显微镜 (八) 、放射自显影术(autoradiography) (九) 、图像分析术(image analysis): 又称体视学 (十) 、组织工程术(tissue engineering),三、组织胚胎学在基础医学中的地位,组织学=显微解剖学 大体 to 微细 不同组织的功能 生理学(physiology) 正常与异常 病理学(pathology) 临床课的基础 For a good doctor needed in future,四、组织学的学习方法,1.尽可能多地观察切片、插图、图谱、网上图库等。注意观察角度、倍率、染色方法 2.深入思考,
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