动物细胞工程ppt21

1、特辑2.2动物细胞工程、动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的生产、核移植、动物细胞工程技术、动物细胞工程的基础、2.2.1动物细胞培养和核移植技术、动物细胞培养、(1)、概念是从动物体内提取相关组织，将其分散在单一细胞中，放入适当的培养基，使这些细胞生长(二)、原理、细胞分裂增殖、(三)、过程、剪切幼龄动物、组织，原代细胞培养、细胞悬浊液、细胞壁：培养密合性细胞时，细胞可以贴在基质上增殖，细胞接触抑制，在细胞贴在壁上生长的过程中，随着细胞分裂，数量增加，最终变成单层关于概念，原代培养：刚从生物中取出后培养的细胞是原代细胞。 一般培养的第一代细胞和10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养

2、：从培养瓶中取出传代细胞，调制细胞悬浊液，分成2个以上的培养瓶继续培养，称为传代培养。 总结过程，提取的组织、器官、细胞悬浊液、酶、瓶壁上贴着的细胞、单一细胞、加入液、动物胚胎和幼龄动物、胰脏蛋白、培养、接触抑制、初代培养(分注前)、1-10代细胞、培养、加液、4050代细胞(细胞株)、未、无限继承代(细胞系)，已继承细胞株：初代细胞一般在10多岁左右细胞生长停滞，大部分细胞老化死亡，少数细胞生存到4050多岁的细胞系：细胞株继承50多岁后出现细胞生长停滞的状态，只有一部分细胞因遗传物质的变化而在培养条件下可以无限制地继承，这种继承细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的差异：细胞系的遗传物质发生变化

3、，有癌细胞的特征，失去接触抑制，易继代培养。 思考问题：1、为什么要把动物胚胎和幼龄个体的器官和组织选为动物细胞培养材料？ 2、为什么培养前需要将组织细胞分散到单一细胞中？ 因为这些组织和器官分裂能力旺盛，容易生长。 成块的组织将细胞粘在一起，限制细胞的生长和增殖，细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。 胰蛋白酶的作用是什么？细胞间的物质是什么样的成分，可以说明催化蛋白质的水解。 细胞间的物质主要是蛋白质(骨胶原等)。 细胞膜的主要成分是什么？蛋白质和磷脂，5，胰蛋白酶能消化细胞吗？ 是的，6、胰蛋白酶能消化细胞，所以把动物组织分散到一个细胞中有什么问题呢？7、可以用胰蛋白酶代替胰蛋白酶吗？

4、为什么？注意时间的控制，做不到。 由于两者的最佳PH不同，正常组织细胞的生存环境和胰蛋白酶的最佳PH相近，1、无菌、无毒的环境，保证细胞的顺利生长增殖，添加一定量的抗生素，定期交换培养液，添加糖(葡萄糖)、氨基酸、促进生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 (四)，动物细胞培养条件，2，营养，3，温度和PH，培养室控制在36.5 0.5，7.27.4，培养罐控制O2和CO2(95%空气和5% CO2 )，4，气体环境：(五)，动物细胞培养技术的应用，(三)细胞的生理、药理、病理研究将健康细胞培养于烧伤患者皮肤移植；(2)基因工程受体细胞、植物组织培养和动物细胞培养比较，全能性、增殖、蔗糖、动

5、物血清、细胞株、细胞系、细胞、某些蛋白质、前景展望，资料一：培养的动物细胞可用于有毒物质的检测。 许多畸形、致癌物质进入培养液后，培养细胞会引起染色体结构和数量的变异。 从变异细胞在全培养细胞中所占的比例可以判断某种物质的毒性。目前，动物细胞培养已成为迅速灵敏地检测有毒物质的有效手段。 资料2 :人工关节软骨再生，1 .从第一次手术：患者关节软骨中未受力部分，取出葡萄干大小的健康软骨组织。 2 .分离软骨细胞，通过3周的体外培养将细胞数增加到约1020倍。 3 .第二次手术：清除软骨损伤的部分，从下面的骨部分取出与伤口同大小的骨膜，缝在伤口上，将软骨细胞注射到骨膜下。 资料3 :结果：在康复一

6、年后能恢复正常生活。 动物体细胞核移植技术和克隆动物，(一)，动物细胞核移植的概念：动物细胞核移植是将动物的细胞核移植到去除了细胞核的卵母细胞中，制成新的胚胎，该新胚胎最终成为动物个体，克隆动物：通过核移植的方法得到的动物。 动物核移植是将动物细胞的核移植到去除了细胞核的卵母细胞中，转化成新胚胎，这个新胚胎最终发育成动物个体。分类：细胞分化的程度低，容易恢复全能性，细胞分化的程度高，难以恢复全能性，克隆动物：是用核移植法得到的动物。 克隆在希腊语中是“小树的枝叶”的意思，是指无性繁殖物。脱核卵泡、供体细胞、重组细胞，代孕母牛c，无性生殖，(三)，体细胞的核移植过程，(四)，体核移植技术的应用前

7、景，1，在畜牧业能加速家畜遗传改良的过程，2，保护濒危物种，3，生产医用蛋白质和组织器官的移植供体，(五)，体核移植技术2、克隆技术效率低、畸形率高、死亡率高、容易发生早衰等问题。 3 .生产克隆动物的费用很高。 2、动物细胞培养过程中遗传物质变化的细胞有() a .不灭性细胞B.10代以内的细胞c .获得第一代细胞d .传代细胞，1、动物细胞工程技术的基础有() a .动物细胞融合b .单克隆抗体c .胚胎移植d .动物细胞培养，a，d，教室反馈练习3； 关于动物细胞培养的记述正确的是： () a，动物细胞培养的目的只是为了得到大量的细胞分泌蛋白b，在动物细胞培养前用胰蛋白酶使细胞分散c，细

8、胞的癌变在从原代培养到传代培养的过程中d、50代培养的传代细胞遗传物质没有变化，b、4， 一般来说，动物细胞的体外培养需要满足以下条件()无毒的环境无菌环境培养基中添加血清温度需要与动物体温相似o2，不需要CO2CO2可以调节培养液的PH，a， 卡卡西虾仁5 .动物细胞培养的特征细胞壁有丝分裂细胞分化接触抑制减数分裂初代培养一般是1-10代a、 B、c、d、a、6，下图是动物细胞培养的基本过程形象。 据此，(1)容器a中放置了动物器官和组织。 一般来说，容器a中的动物器官和组织首先用于用酶处理以分散细胞。 使动物的胚胎和幼龄动物、剪切、胰脏蛋白、细胞和培养液充分接触，使培养变得容易，(3)培养

9、首先用b瓶进行，瓶的培养基成分在该瓶中培养了一段时间后，很多细胞老化死亡，这是培养到初代的，到现在为止的培养为_。(4)为了将b瓶的细胞分注到c瓶中，处理后配置，分注。 动物血清，10，原代培养，胰蛋白酶，细胞悬浊液，动物细胞融合和单克隆抗体，一，动物细胞融合，受精作用，动物细胞融合，细胞a，细胞b，杂种细胞，灭活病毒，物理法化学法，用灭活病毒诱导动物细胞融合的过程，细胞融合和融合诱导细胞融合物质，诱导剂：病毒，聚乙烯思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？ 什么是抗体，是生物被抗原刺激而产生的，具有与该抗原特异性结合的免疫功能的球蛋白。 b淋巴细胞产生抗体。 单克隆抗体是从单一的b

10、淋巴细胞经过无性繁殖(克隆)，形成基因型相同的细胞群，该细胞群产生的化学性质单一且特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特征：如何大量生产特异性强、灵敏度高、单克隆抗体的制备过程、细胞融合、筛选、能产生特定抗体的细胞群、单克隆抗体、单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能，利用肿瘤细胞的无限增殖特性，利用细胞融合技术，融合两细胞获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞，利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞，1、考虑本过程利用什么原理，免疫原理，细胞融合原理如此融合的杂交瘤细胞继承了父母细胞的遗传物质，不仅具有b细胞分泌抗体的能力，还具有无限增殖的能力，因此可以得到大量的单克隆抗体，单克隆抗体的应

11、用与通常抗体相比，单克隆抗体的产量高，特异性高应用主要有：1，临床诊断，2，作为载体携带抗癌剂，形成“生物导弹”治疗肿瘤，资料：目前世界各国已开发出数百人的单克隆抗体。 缺乏良好的诊断手段的感染症、免疫性疾病、血液疾病、内分泌疾病和遗传病大多以单克隆抗体作为诊断手段是必然的趋势。 另外，使用单克隆抗体的体内诊断，通过体内“病灶”的鉴别和定位也备受关注，现在主要用于肿瘤的追踪和心肌梗塞的诊断。、植物细胞杂交和动物细胞融合的比较、下图是某同学根据杂交肿瘤技术的方法设计的生产破伤风杆菌的实验方案，单克隆抗体、b细胞、抗体、细胞融合、灭活病毒、父母细胞、分泌抗体、无限增殖、初代、继承、50 1 .动物

12、细胞工程技术的基础是：() a .动物细胞融合b .胚胎移植c .动物细胞培养d .核移植，c，2 .动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较，正确的是() a .结果相同b .杂种细胞的形成过程几乎相同c .操作过程中酶的作用诱导d .融合的手段相同，b，3 .单克隆抗体的制造过程中骨髓瘤细胞和b淋巴无法在该培养基中增殖的细胞，在()淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自融合细胞小鼠骨髓瘤细胞杂交瘤细胞b .c .d .c (2006年北京卷1题)以下不能说明细胞全能性的实验， a .胡萝卜，麻烦你，麻烦你，麻烦你，麻烦你，麻烦你，麻烦你，麻烦你。 a .培养中的人效应t细胞是单克隆抗体b .培养中的人b细胞可以无限增殖c .人的成熟红血球通过培养可以用细胞株d .胰蛋白酶处理肝组织得到单一肝细胞，动物细胞工程技术的基础是() a .动物细胞融合b .单克隆抗体c .胚胎移植d .动物细胞培养根据图，(1)这是细胞，是分化的。 (2)抗体开始合成到细胞分泌为止，通过的细胞结构的顺序是(加标签)。 抗体的分泌表明细胞的各种生物膜具有结