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文档简介

1、.,1,Illumina 测序的原理和应用,.,2,Illumina测序流程,.,3,Adapter and Library 接头和文库,.,4,Illumina测序流程,.,5,什么是 flow cell？,Flow cell 即流动槽，如载玻片大小，有8个通道 即8条lane。,.,6,1. Single DNA libraries are hybridized to primer lawn and extended by polymerase,.,7,2. Double-stranded molecule is denatured and original template is was

2、hed away,.,8,3. New synthesized strand is covalently attached to flow cell surface to form a bridge and extended by polymerase 4. Double-strand bridge is formed,.,9,5. Double-strand bridge is denatured and form two copies of covalently bound single-stranded templates 6. Bridge amplification cycle re

3、peat,.,10,Multiple bridges are formed dsDNA bridges are denatured and reverse strands are cleaved,.,11,9. Cleaved reverse strands are washed away and leaving a cluster with forward strands only,.,12,Illumina测序流程,.,13,.,14,10. Sequencing primer is hybridized to adapter sequence,.,15,11. Only one nucl

4、eotide is added every cycle as the 3 end is blocked,.,16,12. Cleave the fluor and free the 3 end then repeat above steps for next cycle,.,17,13. Sequenced strand is stripped off and the index primer is added for to seq index,3端,5端,Index primer,.,18,14. Repeat bridge amplification to form reverse strand after index sequencing 15. Sequencing

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