植物组培中玻璃化现象及其预防措施

1、.植物组织培养中的玻璃化现象及其预防措施在植物组织培养过程中，叶和软尖呈透明或半透明水浸状的培养物被称为玻璃化苗，它是组织培养苗的生理失调症状之一。 玻璃化大大降低了试管苗的有效增殖系数，大大影响了试管苗的质量，导致人、财、物的浪费，控制玻璃化。1 .玻璃化苗的特点和产生原因(1)玻璃化苗的特征从形态解剖和生理上来说，玻璃化苗具有以下特点玻璃化苗的株子肿得很小，失去了绿色，叶子纵向收缩，脆弱易碎叶片表面无角质层蜡质，无功能性气孔，只有海绵组织，没有栅栏组织体内水分含量高，但干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和木质素的含量低营养吸收和光合作用不充分，分化能力大幅度下降，幼苗生长缓慢，繁殖系数大幅度下

2、降，导致死亡难以扎根，移植成活率低(2)发生原因玻璃化苗在芽分化开始后的生长过程中，碳、氮代谢和水分发生了生理异常。 其本质是植物细胞的分裂和体积增大的速度超过了干物质的生产和蓄积的速度，植物必须用水分使体积膨胀而玻璃化。 根据作物的种类和品种，玻璃化的发生频率各不相同，在情人草中不常见，在香石竹中比较普遍。2 .影响玻璃化苗发生的因素(1)生长调节剂细胞分裂素和生长素的浓度及其比例影响玻璃化苗的发生。 高浓度的细胞分裂素能促进芽的分化，提高玻璃化苗的发生比例。 不同植物玻璃化的生长调节剂水平不同。 例如，香石竹品种的一部分以BA 0.5mg/L进行玻璃化。 同一植物在不同阶段对细胞分裂素的要

3、求也不同，虽然在某个特定阶段能承受高浓度，但在其他阶段的培养中只能需要低浓度，例如，非洲菊只能在BA 2-10mg/L下诱导幼花托的脱分化形成愈伤组织，并能在愈伤组织中诱导不定芽细胞分裂素与生长素的比例不均衡，细胞分裂素的含量显着高于两者之间的合适比例，使试管苗正常生长所需的生长调节剂水平不均衡，导致发生玻璃化。(2)温度随着培养温度的提高，苗的生长速度显着加快，但高温达到一定限度时，会影响正常的生长和代谢，促进玻璃化。 变温培养时，温度变化幅度大，突然变高或变低的温度变化容易在瓶内壁形成小水滴，增加容器内的湿度，提高玻璃化的发生率。(3)湿度瓶内的湿度与通气条件密切相关，如果使用有通气孔的薄

4、膜或通气良好的滤纸、牛皮纸封口薄膜，由于气体交换，瓶内的湿度降低，玻璃化的发生率减少。 相反，用没有通气性的盖子、封口膜、箔封口的话，不利于气体的交换，在没有通气性的高湿条件下，苗的生长很快，但玻璃化的频率也比较高。 一般来说，单位容积内培养的材料越多，苗的生长越快，玻璃化的频率也越高。(4)消毒方法接种容易玻璃化的品种时，尽可能减少浸泡在水里的时间，配合洗涤消除，漂洗后马上接种。 特别是草本花卉，幼年组织经长时间消毒和清洗后容易浸泡在水里玻璃化。(5)照明时间光影响光合作用和碳水化合物的合成，光不足，变得高温，容易引起试管苗的过度生长，玻璃化加速。(6)培养基培养基中的成分对促进培养物的生长

5、和发育起着积极作用，可以提高培养基中的碳氮比，减少玻璃化的比例。 增加琼脂的使用量可以降低容器内的湿度，随着琼脂浓度的增加，玻璃化的比例明显减少。 但是，培养基硬的话，会影响养分的吸收，苗的生长速度会变慢。(7)继代次数随着传代次数的增加，愈伤组织和试管苗的体内蓄积了过剩的细胞分裂素，玻璃化度上升。 继代培养的第一代玻璃化苗很少，随着继代次数的增加，玻璃化苗的比例越来越高。 这在香石竹、非洲菊等植物上有报道。3 .控制和克服玻璃化苗的措施对于以上玻璃化苗的产生原因，可以采取以下措施来减轻玻璃化现象的产生(1)降低培养基中的细胞因子和赤霉素的浓度，添加低浓度多唑、矮壮素等生长抑制物质。(2)控制适当的培养温度，避免温度过高，注意温度变化培养时温差不要太大。(3)使用透气性好的封口材料，改善培养容器的痛风通风条件，降低容器内的湿度。(4)适当增加培养基琼脂浓度