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1、武汉生物工程学院毕业论文(设计)题 目:不同产地老鹳草的比较及其软膏提取工艺优化类 别:科研型毕业论文(设计)系 别:制药工程系专业班级:学 号:学生姓名:朱 鑫指导教师:孙桂芝时 间:2013年9月至2014年5月目 录学位论文作者声明II摘 要III关键字IIIAbstractIIIKey wordsIII1 前言12 不同产地老鹳草药材的比较12.1 实验材料与仪器12.1.1 实验材料12.1.2 实验仪器12.2 实验方法12.2.1 药材的性状鉴别12.2.2 药材中浸出物含量的测定22.2.3 药材中没食子酸含量的测定22.3 结果与分析22.3.1 药材的性状比较22.3.2

2、药材中浸出物含量的比较22.3.3 药材中没食子酸含量的比较32.4 小结33 老鹳草软膏提取工艺优化33.1 实验材料与仪器33.1.1 实验材料33.1.2 实验仪器33.2 实验方法33.2.1 加水倍数的选择33.2.2 提取工艺的正交试验设计33.2.3 水提醇沉浸膏的制备43.2.4 浸膏率的测定43.2.5 没食子酸含量的测定43.3 结果与分析42.3.1 提取工艺正交试验结果与分析42.3.2 提取工艺正交验证试验64 结论与讨论64.1 结论64.2 讨论6参考文献7致 谢8文献综述9学位论文作者声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究

3、成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。本人完全了解有关保障、使用学位论文的规定,同意学校保留并向有关学位论文管理机构送交论文的复印件和电子版,同意本论文被编入有关数据库进行检索和查阅。本学位论文内容不涉及国家机密。论文题目:不同产地老鹳草的比较及其软膏提取工艺优化作者单位:武汉生物工程学院作者签名: 年 月 日不同产地老鹳草的比较及其软膏提取工艺优化摘 要目的:确定最佳产地老鹳草药材,优选老鹳草软膏的提取工艺,并进行提取工艺验证。方法:从性状、浸出物和没食子酸含量三方面,对三个产地老鹳草药材进行比较。采用煎煮法提取老鹳草药材,醇沉法来纯

4、化,以浸膏率和没食子酸含量为指标,选取加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为因素,用正交试验对老鹳草软膏的提取工艺进行优化。结果:产自江苏的老鹳草为优质药材,老鹳草软膏的最佳提取工艺为加14倍水量,每次煎煮60min,煎煮2次。结论:该产地药材可作为老鹳草软膏的原料.;该提取工艺合理可行,为提高老鹳草软膏质量的稳定性提供了科学依据。关键字老鹳草;老鹳草软膏;提取工艺;正交试验Comparison of Geranium herb from different areas and Optimization of extraction process for Geranium ointmentAbstra

5、ctObjective: To determine the high quality Geranium herb from different areas, to optimize the extraction process of Geranium ointment and to verify the optimum extraction process. Methods: The paper compares the Geranium herb from different areas in three aspects, such as the character, the extract

6、ion and the content of gallic acid. decoction as extraction method and Purifying by ethanol precipitation, orthogonal test was conducted to optimize the extraction process taking extraction ratio and the content of gallic acid as indexes with watering quantity, the decoction time and the decoction t

7、imes as factors. Results: from JiangSu is the high quality Geranium herb. the optimum extraction process was decocted twice with 12 times amount of water for 60min each time. Conclusion: the determinate Geranium herb is regarded as the material of Geranium ointment; the extraction process is reasona

8、ble and feasible, providing a scientific basis for improving the quality stability of Geranium ointment.Key wordsGeranium herb; Geranium ointment; extraction process; orthogonal test1 前言老鹳草始载于明代兰茂的滇南本草1,中药大辞典记载老鹳草为牻牛儿苗、韦氏老鹳草、尼泊尔老鹳草、鼠掌老鹳草、野老鹳草、粗根老鹳草、大根老鹳草及高山块根老鹳草带果实的全草2。中国药典2010版一部收载的老鹳草为牻牛儿苗科植物牻牛儿苗E

9、rodium stephanianum Willd.、老鹳草Geranium wilfordii Maxim.或野老鹳草Geranium carolinianum L.的干燥地上部分,前者习称“ 长嘴老鹳草”,后两者习称“短嘴老鹳草”。老鹳草(Herba Erodii、Herba Geranii)具有祛风湿、通经络、止泻痢的功效,用于风湿痹痛,麻木拘挛,筋骨酸痛,泄泻痢疾3。老鹳草的药用品种较多,产地复杂,药典中的牻牛儿苗科植物牻牛儿苗主产北京、东北三省;老鹳草(韦氏老鹳草)主产湖南、江苏;野老鹳草主产安徽、湖南4。老鹳草主要化学成分有鞣质、黄酮类、有机酸和挥发油等;老鹳草中有丰富的鞣质,含量

10、达2.2%,水解产物有没食子酸和鞣花酸5-7。现代药理研究证明,老鹳草还广泛应用于抗病毒、抗氧化、抗菌、降糖8、免疫、镇咳、抗肿瘤、保肝9、止泻、抗炎和镇痛10等领域。在临床上,老鹳草也被广泛应用,除以生药入药外,也有外用制剂老鹳草软膏11。老鹳草软膏系由单味药材老鹳草提取制得,收载于中国药典2010年版一部,为老鹳草药材经提取加工制成的软膏剂,具有除湿解毒、收敛生肌的功效,用于湿毒蕴结所致的湿疹、痈、疔、疮、疖和小面积水、火烫伤12。老鹳草所含成分有黄酮类化合物、有机酸类成分、挥发油等,而没食子酸为老鹳草中主要的有机酸类成分,几乎存在于每一种老鹳草属植物中13,也是老鹳草软膏质量标准的主要含

11、量的检测指标。由于品种来源不同,产地不同,采收季节、采收年限的不同及生产参数等诸多影响,老鹳草药材提取的浸膏出膏率及没食子酸含量波动较大,从而导致了药品老鹳草软膏质量的不稳定性。本实验是从药材性状、浸出物含量和没食子酸含量三个方面,对不同产地药典中老鹳草品种进行比较,为加强老鹳草药材的质量控制提供了依据;并通过对老鹳草提取工艺参数的摸索确定最佳提取工艺,保障老鹳草浸膏的出膏率及没食子酸含量,为确保老鹳草软膏的成品质量提供了依据。2 不同产地老鹳草药材的比较2.1 实验材料与仪器2.1.1 实验材料没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号:)老鹳草药材购自安徽亳州药材市场,产地分别为浙江、江

12、苏、河南,共收集三批样品,取样根据均匀分布、随机的原则,每个产地药材分别均匀选取适量,取其干燥地上部分,粉碎,全部过二号筛,并混合均匀,作为供试品粉末。乙腈、磷酸为色谱纯,水为重蒸水,其余试剂均为分析纯。2.1.2 实验仪器UltiMate 3000型高效液相色谱仪(美国Dionex),Chromeleon7色谱工作站(美国Dionex),BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司),JH10500D型超声波清洗器(荆州市津海化工科技有限公司),DG120型中药材粉碎机(浙江省瑞安市飞达药材器械厂),DK-98-11型电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司),101A1型干燥箱(上

13、海市实验仪器总厂)2.2 实验方法2.2.1 药材的性状鉴别取较完整植物体的药材,先放在热水中浸湿使软化,展平,对其根、茎、叶、果实进行观察。根据观察到的形态特征和药材产地,查阅中国药典,植物分类方面著作中国植物志14、中国经济植物志15和中药材方面著作中药大辞典16,与标本图片进行对照,鉴定药材品种。2.2.2 药材中浸出物含量的测定依据中国药典中老鹳草品种检查项下水分检查的规定方法测定含水量、浸出物项下的规定方法测定浸出物含量。2.2.3 药材中没食子酸含量的测定2.2.3.1 色谱条件色谱柱:SinoChrom ODS-BP(250mm4.6mm,5m);流动相:乙腈0.025mol/L

14、磷酸溶液(2:98);流速:1.0mL/min;检测波长:274nm;柱温:2517。2.2.3.2 对照品溶液的制备取没食子酸对照品7.80mg,精密称定,置100mL容量瓶中,加50%甲醇适量溶解定容至刻度,制成每1mL含78g的溶液,摇匀,即得。2.2.3.3 供试品溶液的制备取老鹳草药材粉末约1.00g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25mL,称定重量,超声提取30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。2.3 结果与分析2.3.1 药材的性状比较通过观察软化后的药材,可看到各产地药材都有带形似鹳喙的宿存花柱的蒴果,花柱长11.5c

15、m;根直立,圆柱状,皮淡红色;茎具节,表面有纵沟纹和稀疏茸毛;质脆,断面中空。通过核对文献和标本图片,可以确定各产地药材都为短嘴老鹳草。经过武汉健民随州药业高级工程师聂一鑫鉴定为浙江、河南产地的样品为牻牛儿苗科老鹳草属植物老鹳草Geranium wilfordii Maxim.,产自江苏的样品为牻牛儿苗科老鹳草属植物野老鹳草Geranium carolinianum L.。对各产地药材进一步观察比较,从整体来看,浙江产地的药材植株粗壮,长,已截为两段,叶少;江苏产地的药材植株矮小,完整,叶多;河南产地的药材植株纤细,也截为两段,果多。从各植物器官来看,比较结果见表1。表1 不同产地老鹳草药材的

16、性状比较产地根茎叶浙江粗长4050cm,粗,直径25mm,节明显膨大,分枝少5深裂,裂片较宽江苏较细长2025cm,细短,多分枝掌状57深裂,裂片条形,每裂又35深裂河南细略短,长3040cm,纤细,无分枝3深裂,裂片较窄,中央裂片大2.3.2 药材中浸出物含量的比较取各产地老鹳草药材粉末,依照上述2.2.2方法测定,每种平行操作3次,含水量以平均值计,浸出物含量以干燥品计算式(2-1)其中,w1为含水量,m0为测水分时的取样量,m1为干燥恒重的称量瓶的质量,m2为干燥恒重后称量瓶和样品的总质量式(2-2)其中,w2为浸出物含量,m01为测浸出物时的取样量,m3为干燥恒重的蒸发皿的质量,m4为

17、干燥后蒸发皿和样品的总质量,V1为加水的体积,V2为量取滤液的体积计算结果见表2。表2 不同产地老鹳草药材中浸出物含量产地含水量w1/%浸出物含量w2/%平均值/%RSD/%123浙江10.36 20.98 20.87 21.11 20.99 0.6 江苏11.20 23.09 23.35 23.95 23.46 1.9 河南10.80 25.81 25.23 24.90 25.31 1.8 2.3.3 药材中没食子酸含量的比较取不同产地老鹳草药材粉末,按照上述2.2.3的条件和方法,自动进样10L,进行高效液相色谱法测定,每种平行操作3次,以峰面积外标法计算含量,计算结果见表3。表3 不同产

18、地老鹳草药材中没食子酸含量产地没食子酸含量w/(mg/g)平均值/(mg/g)RSD/%123浙江0.2850.2770.2820.2811.4江苏0.8480.8390.8200.8361.7河南0.6140.5910.5990.6011.92.4 小结不同产地老鹳草药材在性状比较中,整体性状明显不同,茎的性状差异明显;据文献报道18,鼠掌老鹳草中没食子酸含量在各采收期均为叶茎,而产自江苏的药材有较多的叶,可考虑作为选定药材。在浸出物含量的比较中,各产地药材含量相当,含量顺序为河南江苏浙江。各产地药材中没食子酸含量存在显著差异,其中江苏的药材含量最高。结合三方面的综合考虑,选择江苏产地老鹳草

19、药材作为老鹳草软膏的原料。3 老鹳草软膏提取工艺优化3.1 实验材料与仪器3.1.1 实验材料老鹳草药材为前面选出的江苏产地药材,按照中国药典2010年版一部中老鹳草饮片的炮制方法,除去残根及杂质,略洗,切段,干燥。均匀称取若干份50g炮制后的药材,作为投料。甲醇为分析纯,其余试剂同上。3.1.2 实验仪器Waters e2695-2489型高效液相色谱仪(美国Waters),Empower色谱工作站(美国Waters),DL-1型电子万用炉(北京市永光明医疗仪器厂),DW-2型调温电热器(南通市长江光学仪器有限公司),3000mL烧杯等。3.2 实验方法3.2.1 加水倍数的选择取炮制后的药

20、材50g,放入3000mL烧杯中,逐倍加水,至刚好浸住并浸润全部药材,以此时的加水量为最低倍数,然后选择其余倍数。3.2.2 提取工艺的正交试验设计根据预试验和文献报道19,以加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为因素,每个因素选3个水平,以浸膏率和没食子酸含量为指标,按表5设计正交试验,优选最佳提取工艺。表5 正交试验因素水平表水平因素A加水倍数/倍B煎煮时间/minC煎煮次数/次11660123214803121003.2.3 水提醇沉浸膏的制备取50g炮制后的药材,按照表6安排的正交实验条件,加入一定倍量水,煎煮一定时间,提取一定次数,煎液滤过,滤液合并,统一浓缩至200mL,加等量的95%乙醇

21、使沉淀,静置,滤取上清液,即得。3.2.4 浸膏率的测定精密量取醇沉后的上清液25ml,置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105干燥30min,置干燥器中冷却至室温,称重,重复以上步骤直至恒重,计算浸膏率式(3-1)其中,为浸膏率,m5为得到的干膏质量,V3为取样体积,V4为上清液体积,m6为投料量3.2.5 没食子酸含量的测定3.2.5.1 色谱条件色谱柱:Hypersil ODS2(250mm4.6mm,5m);流动相:以甲醇为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表4中的规定进行梯度洗脱;流速:1.0mL/min;检测波长:273nm;柱温:2512。表4 梯度洗脱时间/

22、min流动相A/%流动相B/%015011100891516111008903.2.5.2 对照品溶液的制备取没食子酸对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含40g的溶液,即得。3.2.5.3 供试品溶液的制备取干膏粉末约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇100mL,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。3.2.5.4 测定法 取对照品溶液和各号供试品溶液,自动进样10L,进行高效液相色谱法测定,以峰面积外标法计算含量,结果以投料量计算式(3-2)其中,w4为没食子酸含量,w3为干膏中没食子酸含量,为浸

23、膏率3.3 结果与分析2.3.1 提取工艺正交试验结果与分析按照3.2.3水提醇沉浸膏的制备方法及表5的因素水平表进行正交试验,结果见表6。表6 正交试验方案和结果分析试验号ABC浸膏率/%没食子酸w4/(mg/g)11118.802.67321227.353.08931337.053.16842129.073.75452236.693.19662317.022.81073135.841.92783219.212.99893326.232.849干膏率K123.2023.7125.03K222.7823.2522.65K321.2820.3019.58k17.737.908.34k27.597

24、.757.55k37.096.776.53R0.641.131.81没食子酸K18.9308.3548.481K29.7609.2839.692K37.7748.8278.291k12.9772.7852.827k23.2533.0943.231k32.5912.9422.764R0.6620.3100.404正交实验结果极差分析表明,三个因素对浸膏率指标的主次关系为CBA,各因素都在A1、B1、C1时浸膏率的k值最高,但在A1B1C1提取条件下的实验结果不是最好的;以没食子酸含量指标的主次关系为ACB,在没食子酸的k值最高时,最佳提取工艺为A2B2C2,在9个试验中与其相近提取条件A2B1C

25、2下,没食子酸含量最高,同时浸膏率也较高。故在确定最佳提取工艺时,以没食子酸含量指标为主,优选的最佳工艺为A2B2C2,即加14倍水量,每次煎煮80min,煎煮2次。表7 方差分析方差来源偏差平方和自由度均方F值P值干膏率A(误差)0.67920.3401.000.1B2.28221.1413.360.1C4.97722.4897.330.1没食子酸A0.66320.3324.600.1B(误差)0.14420.0721.000.1C0.38520.1932.670.1注:F0.1(2,2)=9.00,F0.05(2,2)=19.00,F0.01(2,2)=99.00正交试验结果表7方差分析表

26、明,以浸膏率来看,三个因素都无显著影响,相对来说各因素的影响大小为CBA;从没食子酸来看,各因素也无显著影响,相对的A因素影响较大,其次是C因素。此结果与极差分析结果一致,由于B因素对没食子酸含量的影响相对不大,结合节约能源和提高效率的生产实际,选B1适宜,最终确定最佳提取工艺为A2B1C2,即加14倍水量,每次煎煮60min,煎煮2次。2.3.2 提取工艺正交验证试验为保证重现性,对根据正交试验优选的最佳提取工艺A2B1C2,进行3次验证试验,结果见表8。结果表明优选的工艺条件合理,重现性好,稳定可行。表8 正交验证试验结果组别序号浸膏率/%平均值/%RSD/%没食子酸/(mg/g)平均值/

27、%RSD/%A2B1C219.149.051.23.8213.7651.328.933.75039.083.7244 结论与讨论4.1 结论通过对不同产地老鹳草药材的比较,可知药材的产地不同,其性状和有效成分有明显差异。药材性状上的差异,可为药材检验员对老鹳草药材进行鉴别提供依据,加强老鹳草药材真伪的定性控制。对老鹳草药材的有效成分进行含量测定,从定量上加强了老鹳草药材真伪优劣的控制,而中国药典2010年版中未收录老鹳草药材的含量测定方法,有大量的文献报道了可靠的测定方法,生产企业可选其有效可行的方法作为内控标准,保障老鹳草产品的质量。中国药典2010年版对老鹳草软膏中没食子酸含量有指标要求,

28、而对老鹳草药材没有控制要求。因此调查不同产地老鹳草药材的没食子酸含量,为老鹳草软膏生产企业掌握药材资源和质量状况提供了科学数据;从药材源头控制产品质量,为加强老鹳草的质量控制以及对老鹳草科学地开发和可持续利用提供了科学依据。选出的最佳产地老鹳草药材可作为生产老鹳草软膏的优质原料。采用水煎煮法提取老鹳草药材,醇沉法来纯化,以浸膏率和没食子酸含量为指标,选取加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为因素,用正交试验对老鹳草软膏的提取工艺进行优选,确定了最佳提取工艺为加14倍水量,每次煎煮60min,煎煮2次,为老鹳草软膏的制备工艺提供了科学依据。本文对老鹳草软膏从药材源头到浸膏的整个过程的研究,为提高老鹳草软

29、膏质量的稳定性提供了科学依据。4.2 讨论江苏产地的老鹳草药材因含叶较多,含水量大,在贮藏过程中要注意防霉,防虫,保持干燥。老鹳草药材的粉碎过程中,相对湿度应控制在60%以内,时间不宜过长, 否则因粉末细,吸湿快,使过滤时间延长。加水倍数的选择中,发现与相关文献报道20相比,各水平倍数较大,原因是所用药材的产地和品种不同,其形态也有较大差异。本文提取用的原料为产自江苏的野老鹳草的地上干燥部分,形态疏松,故浸润所需水量较大。如果各方面条件允许,在接下来的时间里,查看更多的书籍,文献,根据优选的最佳提取工艺条件制备浸膏,确定浓缩的最佳相对浓度,然后加入基质,进行成品配置的小试,观察膏体的性状,并检

30、测含量。小试合格后,再进行投产试验,完成对老鹳草从药材源头到成品的整个过程的研究,提高老鹳草软膏质量的稳定性,使试验更加的完整。参考文献1 秦哲.野老鹳草有效成分含量测定及其乙醇提取物的毒性试验研究D.北京:中国农业科学院,2008.2 徐放.老鹳草有效成分的提取及其药效的研究D.黑龙江:东北林业大学,2011.3 国家药典委员会.中华人民共和国药典M.一部北京:中国医药科技出版社,2010:113.4 张丰华,黄秀深,贾波.药用老鹳草原植物分布概述J.时珍国医国药,2005,16(6):540-542.5 魏玉明,罗宏,赵晓雨等.鼠掌老鹳草高效液相指纹图谱及模式识别研究J.时珍国医国药,20

31、12,23(5):1167-1169.6 Ping Li,Luosha Zhao,Youyou Du,et al.Hydrolysable Tannins and Related Compound having Cytotoxic Activity of Geranium Wilfordii Maxim.Advance Journal of Food Science and Technology, 2013,5(3): 255-257.7 Qiuyue Wu,Yang zhou,Xin Jin,et al.Chromatographic Fingerprint and the Simultan

32、eous Determination of Five Bioactive Components of Geranium carolinianum L.Water Extract by High Performance Liquid Chromatography. International Journal of Molecular Sciences,2011,12: 8740-8749.8 王志刚,李青,王斌等.中药老鹳草的成分和药理学研究进展J.中兽医学杂志,2008(4):44-48.9 闫润红,杨文珍老鹳草孕激素样作用的实验观察J中药药理与临床,1998,14(4):29.10 金晴昊.

33、复方老鹳草浸膏对大鼠溃疡性结肠炎的防治作用D.吉林:延边大学药学院,2006.11 王宝庆,李学彬,田志发等.老鹳草现代研究概况J.中国林副特产,2010(6):91-93.12 国家药典委员会.中华人民共和国药典M.一部北京:中国医药科技出版社,2010:671.13 何文涛,金哲雄,王宝庆.老鹳草的研究进展J.航空航天医学杂志,2011,22(10):1200-1202.14 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志M.北京:科学出版社,1998,43(1):22,29,32.15 中国科学院植物研究所.中国经济植物志M.北京:科学出版社,1961:800,1161,1780.16 江苏

34、新医学院.中药大辞典(第一版上册)M.上海:上海人民出版社,1977:845-847.17 尹海波,何静,王冰等.东北八种老鹳草没食子酸含量比较J.中药材,2007,30(6):637-638.18 何静,史国兵等鼠掌老鹳草中没食子酸的积累动态分析J山西医药杂志,2010,39(3):269-270.19 曹稳根,王晓梅,翟科峰等.正交试验优选老鹳草中没食子酸的提取工艺J.光谱试验室,2011,28(6):2905-2908.20 宫莉萍,赵怀清.老鹳草凝胶剂制备工艺J.中国实验方剂学杂志,2011,17(24):19-22.致 谢本论文是在厂内指导老师李丽娟部长和校内指导老师孙桂芝教授的细心

35、指导、大力支持下完成的。在论文的选题、资料搜集、实验方向的选择、实验时间的安排以及论文的最后撰写等过程中,他们给予了我许多意见和帮助。论文完成的背后不仅有自己辛苦的不懈努力,还有实习期间同事们热心的帮助和亲切的关心,我衷心的感谢她们。同时也要感谢学校给我这样的机会和平台。文献综述中药老鹳草的现代研究概况摘 要:中药老鹳草含有多种活性化学成分,具有优越的药理作用,临床应用比较广泛。本文对目前中药老鹳草本草考证、资源分布、化学成分、提取方法、药理作用、制剂及临床应用的研究概况进行综述,为中药老鹳草的进一步开发研究提供依据。关键词:老鹳草;本草考证;资源分布;化学成分1 前言老鹳草为中医临床常用药,

36、是牻牛儿苗科植物牻牛儿苗及多种老鹳草的全草,其性苦、辛、平,归肝、肾、脾经,具有祛风湿、通经络、清热毒、止泻痢等功效。牻牛儿苗科植物在我国有牻牛儿苗属、老鹳草属、天竺葵属、熏倒牛属4属,约80种,已知可供药用的有37种,广布于全国各地1。我国老鹳草品种繁多、资源丰富、疗效肯定、毒副作用低。中国药典2010版第一部记载,老鹳草为牻牛儿苗科植物牻牛儿苗Erodium stephania-num Willd.、老鹳草Geranium wilfordii Maxim.或野老鹳草Geranium carolinianum L.的干燥地上部分,前者习称“长嘴老鹳草”,后两者习称“短嘴老鹳草”。用于风湿痹痛

37、,麻木拘挛,筋骨酸痛,泄泻痢疾2。随着老鹳草多种药理作用的发现,其研究受到人们越来越多的关注。近年来,国内外学者对中药老鹳草的本草考证、资源分布、化学成分、提取方法、药理作用、制剂及临床应用等7个方面进行了大量深入的研究。2 主体2.1 老鹳草的本草考证牻牛儿苗最早见于明代朱棣的救荒本草,该书载“牻儿苗又名斗牛儿苗,生田野中。就地拖秧而生,茎蔓细弱,其茎红紫色。叶似芫荽,叶细瘦而稀疏。开五瓣小紫花,结青蓇葖儿,上有一嘴甚尖锐,如细锥子状,小儿取以斗戏”。以后清代吴其浚又将其收入植物名实图考。根据形态描述及所附图,当为今之牻牛儿苗。根据历代本草,清代以前均未有记载做药用,因此牻牛儿苗作为老鹳草药

38、用应当在民国以后3。老鹳草一名始见于明代兰茂的滇南本草,该书记载“正名为五叶草,别名为老观草、六阳草、五瓣草、猫角迹、老官草。”古代所用的老鹳草实际上是老鹳草属的多种植物。据文献记载及研究表明:目前商品“短嘴老鹳草”亦来源于老鹳草属多种植物,与古代使用情况基本一致4。2.2 老鹳草的资源分布中药老鹳草来源于牻牛儿苗科牻牛儿苗属和老鹳草属的不同种植物。目前我国老鹳草的药用品种较多且较复杂,除了牻牛儿苗和老鹳草两种外,还有常用的野老鹳草(G.carolinianum L.),尼泊尔老鹳草(G.nepalense Sweet),鼠掌老鹳草(G.sibiricum L.),粗根老鹳草(G.dahuri

39、cum DC.),毛蕊老鹳草(G.eriostemon Fisch.et DC.),绒背老鹳草(G.vlassorianum Fisch.et LindL.)和童氏老鹳草(G.thunbergrii Sieb.et Zucc.)等,张丰华等总结了老鹳草的常用品种及同属各原植物分布情况,其中中国药典收载的3种正品中牻牛儿苗主产于北京、东北三省;老鹳草(韦氏老鹳草)主产于湖南、江苏;野老鹳草主产于安徽、湖南5。2.3 老鹳草的化学成分中药老鹳草的主要化学成分包括鞣质类、黄酮类、有机酸类和挥发油类等6。2.3.1 鞣质类老鹳草中有丰富的鞣质,含量达2.2%,是存在于植物体内的结构比较复杂的多元酚类化

40、合物。国内外学者已经从不同种老鹳草植物中分离出多种鞣质化合物。鞣质类成分主要有:没食子酸、六羟联苯二酸、鞣花酸、柯里拉京、云实酸、云酸素7、短叶苏木酚、短叶苏木酚酸乙酯、脱氢老鹳草素、芙芦草宁、芙芦素、云实素、elaeocarpusin、1,3-双-O-酚-2-O-酰-4,6-(六羟基二苯)-D-葡萄糖、儿茶素。2.3.2 黄酮类黄酮类化合物在老鹳草类植物中大多以游离态或与糖结合成苷的形式存在。目前在不同中分离到的黄酮类成分主要有:槲皮素、山奈酚、杨梅素、木犀草素、山奈酚-3,7-L-鼠李糖苷、锦葵色素-3-O(6-O-乙酰基-吡喃葡萄糖苷)-5-O-D-吡喃葡萄糖苷、锦葵色素-3,5-二葡萄

41、糖苷、金丝桃苷8。2.3.3 有机酸类老鹳草属植物中的有机酸类成分与其鞣质有密切关系,老鹳草素水解产物就有没食子酸和鞣花酸,而没食子酸和鞣花酸几乎存在于每一种老鹳草属植物中9。从鼠掌老鹳草中分得原儿茶酸、没食子酸和鞣花酸。从青岛老鹤草中分得没食子酸和鞣花酸10。尼泊尔老鹳草中亦含没食子酸、鞣花酸、原儿茶酸和琥珀酸。从太白山地区老鹳草全草中分离得到没食子酸乙酯、水杨酸11。2.3.4 挥发油类老鹳草全草含挥发油。挥发油以饱和脂肪烷烃为主12。研究报道的挥发油类成分有:香茅酸、香茅醛、玫瑰醇、香茅醇、香叶醇、里那醇、异薄荷酮、香茅醇甲酸酯和牻牛儿醇13。2.3.5 其他成分比利时学者Nina从大根

42、老鹳草的石油醚提取部位中分得两种倍半萜酮(isogermacrone和germazone)和两种新的立体异构的三环倍半萜酮14。2.4 老鹳草的提取方法2.4.1 鞣质的提取分离目前普遍釆用的提取方法有水回流法、水温浸法、丙酮回流法、冷浸搅拌法和乙醇同流法5种,水温浸法、丙酮回流法和乙醇同流法鞣质得率和质量分数均较高,考虑经济因素则水温浸法为好。采用水温浸法提取老鹳草鞣质,得出老鹳草鞣质成分的最佳提取工艺条件是:料水比为1:30、浸提温度为80、浸提时间为30min15。2.4.2 黄酮类的提取分离常用的提取方法有:(1)热水提取法;(2)乙醇或甲醇提取法中高浓度的醇(如9095)适用于提取苷

43、元,60左右的醇适用于提取苷类;(3)系统溶剂提取法,用极性由小至大的溶剂依次提取;(4)碱性水或碱性烯醇提取法16 。2.5 老鹳草的药理作用近年来,随着人们对老鹳草药理活性深入研究,其应用己远不止于祛风通络,收敛固涩,而有了更多的药用价值,广泛应用于抗病毒、抗氧化、抗菌、降糖、免疫、镇咳、抗肿瘤、保肝、止泻、抗炎和镇痛等领域17。家兔灌胃老鹳草水提物可以增强血液凝固,表现止血作用。牻牛儿苗具有抑制排卵作用与黄体酮的作用类似,推测牻牛儿苗可能具有黄体酮作用或升高体内黄体酮的作用,可能有治疗不孕症功能18。2.6 老鹳草的制剂及临床应用复方老鹳草浸膏方中以老鹳草为君药,提取成分主要包括鞣质和黄酮类化合物,

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