医学科研设计方案.doc

1、精品实验设计的三个要素和四个原则众所周知，科学家在进行医学科研之前，需要制定完美的统计研究设计方案。 什么设计方案可以说是完美的？完美的设计方案需要六个条件一般来说，人、物、时间必须满足设计要求的实验设计的“三要素”和“四原则”在满足专业和统计学要求的重要实验要素和观测指标上没有遗漏，做了合理安排的重要非实验要素(包括能发生的各种偏差) 考虑到研究过程中可能发生的各种情况，相应的对策和严格的质量控制对操作方法、实验数据的收集、整理、分析等有着规范的规定和正确的方法。 其中正确把握统计研究设计的“三要素和四原则”，无疑是其设计方案科学的严格象征。实验设计的“三要素”实验设计的三个因素主要应该考虑

2、一、被实验者的种类问题。 其中包括以下情况：1.一般医学科学研究-以常用动物、离体标本或人体内获取的样品为受试者2 .新药临床前试验-一般以动物为受试者3 .新药临床试验阶段-一般使用者为受试者。 新药临床试验一般分为四期，一期临床试验阶段以健康志愿者为受试者，其他各期临床试验阶段以患特定疾病的患者为对象。 选择什么样的患者，需要严格的规定。二、实验要素。 实验研究的目的不同，对实验的要求也不同。 在通过实验影响观察结果的因素很多的情况下，必须结合专业知识，全面分析许多因素，根据需要进行一些事前实验，区分重要的实验因素和重要的非实验因素，选择适当的实验设计方法进行适当配置。 实验要素有数量要素

3、和质量要素的区别。 所谓数量要素，要素水平的提取方法是定量的，例如用药量、药物作用的时间等，需要认真考虑在实验中采取哪个水平，如果水平的提取方法过于密集，实验次数增多，很多邻接水平对结果的影响非常接近，只不利于实现研究目的在没有经验的前提下，必须进行必要的事前实验，或者利用别人的经验，选择适当的几个水平。 所谓品质要素，是要素水平的取得方法定性的，例如药物的种类、处理方法的种类等。 应该结合实际情况和具体条件，选择质量要素水平，不能无视客观条件盲目选择。三、实验效果。 实验效果是反映实验因素作用强弱的标志，必须用具体指标来表现。 应该结合专业知识，尽可能多选择客观性高的指标，在仪器和试剂允许的

4、条件下，尽可能多选择特异性强、灵敏度高的客观指标。 对于一些半客观(读取病理切片和x线照片得到的结果)和主观指标(评分和代入特定的定性实验结果等)，应该按照事先规定的读取数值的严格标准，根据需要进行统一的技术训练。实验设计的“四原则”实验设计四项原则的实施主要包括：另一方面，随机化原则的实施：使用“随机数表”实现随机化使用“随机排列表”实现随机化使用“计算机产生伪随机数”实现随机化。二、实施对照原则：空白对照组的设立-该对照一般用于动物实验，在临床上仅适用于慢性病的比较研究，需慎重使用的互相对照组的设立-应考察的要素不能达到零水平，考察某化学实验中反应温度对实验结果的影响， 各组在不同的温度条

5、件下进行实验，各组建立在实验中起相互对照作用的标准对照组为了比较某些新药的疗效，通常被社会公认，治疗效果较好， 以稳定的同类药物为标准对照组的实验对照组的设立-在某个处理本身中存在重要的非处理同素的情况下，必须以只含有该非处理要素的实验组为实验对照组的历史和中外对照组的设立-这种对照形式必须慎重地使用，比较的结果只能作为参考，推论的依据三、重复原则的实施：重复原则是指必须在相同的实验条件下多次独立地重复实验。四、均衡原则的实施：一个实验设计方案的均衡性的好坏关系到实验研究的成败。 充分发挥具有各种知识背景的人的作用，发挥集团力，可以有效地提高实验设计方案的均衡性。对于医药科研工作来说，统计研究

6、设计，特别是实验设计，就像建设高楼的基础，是科学性和严密性的证明，是医学科研工作的灵魂。 一般来说，在医药科学研究的整体过程中(包括实验设计、资料的表现和分析、论文和申报的成果)不使用或误用统计学(包括统计研究设计)，会浪费人力、物资、时间，其结论不能接受，有时结论完全错误。 所有从事医药科学研究的人，不得忽视统计研究设计和统计学的正确运用；从事医药科学研究的业务主管部门的领导，必须把科研工作的科学性和严格性提到议事日程上。 这是我国加入世贸组织后必须认真面对的非常严峻的现实问题。小鼠缺氧实验一、几种类型的缺氧【实验原理和目的】组织缺氧和缺氧会引起缺氧。 供氧不足是吸入气体中氧分压过低或呼吸、

7、血液、循环等多系统脏器功能障碍引起的氧气障碍，是由组织中毒和损伤引起的。本实验的目的是通过复制缺氧性缺氧、血液性缺氧和组织中的毒性缺氧来了解缺氧的分类。 观察不同种类的缺氧，就会观察到呼吸和血液颜色的变化。【被实验者】大鼠。【实验器材和药品】1、器械小鼠缺氧瓶(或100125 ml带塞子的瓶或广口瓶)、一氧化碳(CO )发生装置广口瓶、5 ml、2 ml吸管、1 ml注射器、乙醇灯、剪刀、镊子。2 .药品钠石灰(Na0HCaO )、甲酸(HCOOH )、浓硫酸(H2S04 )、氢氧化钠、5%亚硝酸钠、1%亚甲基蓝、生理盐水。【实验顺序和观察指标】观察动物一般情况、呼吸、生存时间、嘴唇(皮肤)和

8、血液(肝脏)。1 .缺氧性缺氧(1)将少量的钠石灰(约5 g )和一只小鼠放入缺氧瓶中(图3-111-1 )。 观察动物的一般情况，呼吸频率(次/10 s )、深度、皮肤和嘴唇的颜色，然后塞上塞子，记录时间，每隔3 min反复观察一次上述指标(如果有其他变化，随时记录)，直到动物死亡。(2)动物尸体在完成一氧化碳中的毒性缺氧、亚硝酸钠中的毒性缺氧和氰化物中的毒性缺氧实验后，依次打开腹腔比较血液和肝脏的颜色。2 .一氧化碳中毒性缺氧(1)设置一氧化碳发生装置(图3-11-1-2 )。(2)将鼠标放入广口瓶中。 观察其正常表现，连接到一氧化碳发生装置上。(3)将3 ml甲酸放入试管，加入1 ml浓

9、硫酸，填满(用乙醇灯加热，加速CO的产生，但不能过热使液体沸腾。 CO发生过快的动物迅速死亡，血液颜色的变化不明显)。(4)观察指标和方法相同。3 .亚硝酸钠中缺乏毒性(1)取大鼠两只，观察正常表现后，向腹腔内注入亚硝酸钠0.3 ml，一方注入亚硝酸钠，立即向腹腔内注入1%亚甲基蓝溶液0.3 ml，另一方注入生理盐水0.3 ml。(2)观察指标和方法相同。【注意事项】1 .缺氧瓶必须密封，用凡士林涂在瓶外。2 .小鼠腹腔注射时，请不要靠近左下腹部，伤害肝脏。 另外，请不要向肠腔和膀胱注入药液。二、影响缺氧耐性的因素【实验原理和目的】通过生物神经系统功能状态的变化、外界环境温度的变化、C02浓度

10、的上升对不容忍的影响，了解条件因子在缺氧发病中的重要性和临床应用冬眠和低温治疗的实用意义。【被实验者】大鼠。【实验器材和药品】小鼠缺氧瓶，粗天平，镊子，注射器咖啡因1%，氯丙嗪0.25%，生理盐水，钠石灰，冰。【实验顺序和观察指标】观察动物的一般状态、呼吸、生存时间、氧量。1 .环境温度变化对缺氧耐受性的影响(1)取3个小鼠缺氧瓶，一点一点地加入钠石灰(约5 g )。取2只500 ml烧杯，1只放入冰和冷水，杯内的水温为04，另1只放入热水，温度调整到4042。(3)取3只体重接近的老鼠，称量后放入缺氧瓶中，将2只缺氧瓶放入装有冰水或热水的烧杯中，另一只放在室温下，装上瓶子后开始计时。(4)继

11、续观察各小鼠在瓶子里的活动情况，小鼠死亡后，计算生存时间。2 .机体状况的差异对缺氧耐受性的影响(1)取3只体重接近的老鼠，分别如下处理甲鼠：腹腔注射1%咖啡因0.1 ml/lO g； 大鼠：腹腔内给药0.25%氯丙嗪0.1 ml/lOg (注：氯丙嗪给药后，将小鼠放入冰水中游泳20 S )。 普罗小鼠：腹腔注射生理盐水0.1 ml/lOg。(2)1520 min后，将3只小鼠放入有钠石灰的缺氧瓶中，密封后计时。(3)以下的步骤与第一(4)相同。3 .增加C02对缺氧耐受性的影响(1)取2只体重接近的老鼠，称量后，放入没有钠石灰和钠石灰的缺氧瓶中，密封后开始计时。(2)以下的步骤与第(4)相同。【注意事项】你要保证缺氧瓶完全密封了.三、种属、年龄、神经系统和代谢状况对缺氧耐受性的影响【实验原理和目的】理解一些因素对缺氧耐受性的影响。【被实验者】成年老鼠，刚出生的老鼠，蟾蜍。【实验器材和药品】小鼠缺氧瓶、粗天平、镊子、注射器l%咖啡因、0.25%氯丙嗪、0.1%咖啡因、生理盐水、钠石灰、冰。【实验顺序和观察指标】观察一般状态、生存时间。1 .取2只成年大鼠，腹腔注射0.1%咖啡因0.1 ml/lOg2 .采集成年大鼠2只，腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1 ml/lOg，等待动物不