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文档简介
1、第四章是培养基的生产,第一节是母培养基的生产,第二节是原始培养基和栽培培养基的生产,第三节是液体菌种的生产技术。教学目的:掌握各级培养基的生产方法。教学重点:培养基的制作方法。第一节母种培养基的生产。菌株培养基的分类1。天然培养基中常用的生物材料有马铃薯、胡萝卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。适合各种微生物的生长。2.合成培养基是指用已知成分和数量的化合物制备的培养基。应用研究3。半合成培养基是以天然物质为碳源、氮源和维生素,并添加一些无机盐制成的。(2)根据培养基的物理状态进行分类。1.液体培养基不添加琼脂,主要用于生理生化研究、液体菌种培养等。2.固体培养基中混凝剂的用量冬季为
2、1.5%-2.0%,夏季为2.2%-2.3%。3.半固体培养基含有少量琼脂(0.2%-0.5%),这使得培养基不是固体而是粘性的。(2)母种培养基配方:1。马铃薯200克,糖20克,琼脂18克,水1000毫升;2.去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18-20克,水1000毫升,自然酸碱度;此外,添加麸皮20g、玉米粉5g、大豆粉5g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁2g和VB11片剂。该配方适用于大多数菌种,尤其是金针菇、木耳和灵芝。可作为黑木耳的复壮培养基。3.马铃薯去皮200克,葡萄糖20克,琼脂18-20克,水1000毫升,酸碱度自然,并加入麸皮20克,玉米粉5克,大豆粉5克,磷酸二氢钾2克,
3、硫酸镁2克,VB11片(10毫升)和平菇子实体100克。这个公式适用于大多数菌株的生长。平菇复壮培养基效果显著。4.去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18-20克,水1000毫升,自然酸碱度。此外,添加20克麸皮、5克玉米粉、5克大豆粉、2克磷酸二氢钾、2克硫酸镁、1片VB11毫克)和100克蘑菇子实体。该配方适合大多数菌株的生长,可作为香菇的复壮培养基,效果显著。(1)营养液的配制(1)配制工作(3)配制方法(2)称量和物料预处理(2)按配方准确称量各种营养物质。将马铃薯去皮,切去芽眼,重200克,切成1厘米见方的小块。将琼脂切割并浸泡在水中。3.煮开加入适量的水后,将切好的马铃薯片放入
4、电饭锅中,煮至脆而不烂。4。过滤,加入可溶性药物,用双层砂布过滤,取滤液,放入电饭锅中加糖。将琼脂煮沸,在煮沸状态下加入琼脂,直至琼脂完全溶解,定容至1000毫升。(2)营养液1的分装。用注射器2分装。分装标准:分装量为试管长度的1/4-1/5。注意培养基不能污染试管口。3。棉塞棉塞适度紧密,1/3在管外,2/3在管内。4.将7-10个试管捆在一起,将防水纸包在棉塞上,然后将它们直立放入高压釜中。(4)通过摆动斜面灭菌后,用1/5的狭缝打开盖子,用废热干燥报纸和棉塞,然后摆动斜面。斜面的长度是试管总长度的1/2。(3)在1.0-1.5公斤/平方厘米的压力下保持灭菌处理20-30分钟。(4)通过
5、摆动斜面灭菌后,用1/5的狭缝打开盖子,用废热干燥报纸和棉塞,然后摆动斜面。斜面的长度是试管总长度的1/2。第二部分制作原种和栽培种培养基。一是普通原种配方,木屑培养基配方为80%细木屑、12%麸皮、1%玉米粉、2%大豆粉、1.5%过磷酸钙、0.5%红糖、0.4%尿素、0.1%硫酸镁、1%石灰和2%石膏。本配方适用于香菇、黑木耳和平菇原种的生长该配方适用于栽培平菇。健康生长,还可以培养金针菇和巨大口蘑。软木屑的配方为75%椴木下脚料(木线厂下脚料,大颗粒),15%麸皮,5%玉米粉,1.5%石膏,1%石灰,0.5%糖,1.5%过磷酸钙,0.5%尿素,料水比为1: 1.2左右。适用于金针菇、巨大口
6、蘑等分解基质能力弱的品种。麦粒和锯末培养基配方新鲜,优质小麦为80%,硬木锯末为20%,锯末:水为1: 1左右,用麦水混合锯末,或在此基础上加入0.5%过磷酸钙、0.5%蔗糖和1%石灰,麦粒煮熟后与锯末混合。玉米粒培养基配方为100%优质鲜玉米,或后期添加0.5%过磷酸钙、0.5%糖和1%石灰。玉米种子培养基生产的原种具有小麦种子的优点,耐力更强,接种繁殖量更大。(2)原种培养基的生产方法(1)粮食培养基的生产(1)按配方(1)称取所有营养成分:优质鲜小麦65%,锯末15%,棉籽壳15%,麸皮5%,石膏1%,过磷酸钙0.5%,糖0.5%,尿素0.5%) (2)冬季浸泡吸水24-48小时,夏季加
7、水1%。3.煮沸,沥干水分,取出浸泡,冲洗干净(去除杂质),煮沸至完全无白心,避免煮沸和开花,沥干水分,取出。4.将锯末、棉籽壳和麸皮与煮沸的小麦水混合,然后与小麦颗粒充分混合。5。瓶(1)装量应为1/3或1/2罐瓶,便于在培养过程中摇动基料以促进丝的均匀生长。(2)擦拭并密封瓶口,密封塑料袋,规格为13厘米、13厘米、0.004厘米,高压聚丙烯袋,第二层,内层中间切一个3厘米宽的菱形口。至少两个枪套。6.锅内灭菌,126左右高压灭菌2小时;常压灭菌在100下保持10-12小时,夏季时间可适当延长。7.将其从锅中取出,冷却至30以下进行接种。2.锯末和玉米芯培养基的生产方法1。根据配方称材料。
8、2.配料:干混(将石膏和水不溶性主料及辅料混合均匀);湿拌(将石灰和辅料溶于水中制成母液,加入所需的水稀释后混合)。(2)装瓶:闷1-2小时(夏季时间不宜过长)。待物料吸收足够的水分后,装瓶,装至瓶肩,拧紧、松开并压平物料表面,擦拭瓶口,并打1.5厘米厚的接种孔密封瓶底。(3)灭菌:制作相同的谷物培养基(4)出锅冷却:制作相同的谷物培养基;和(3)以与原始种子相同的方式制作栽培种子。需要注意的是,栽培种的培养基一般由丰富的培养材料制成,含水量比原种大,更有利于菌种的快速投喂。容器可以是500毫升的罐装瓶或(17-18)X(30-35)X(0.04-0.05)厘米的低压聚乙烯袋。第三节液体菌种生
9、产技术1。液体菌种生产原理食用菌液体菌种的生产是将无菌空气引入发酵罐中的液体培养基中,并对其进行搅拌,以增加培养基中的溶解氧含量,为食用菌的呼吸和代谢提供所需的氧气,并控制适当的外部条件以获得大量的菌丝体或代谢物。2.液体菌种生产的特点。原材料来源广泛。菌丝快速生长。生产周期短食用菌深层发酵通常只需2-7天即可获得大量菌丝体,而固体培养则需要30-60天。4.食用菌的工业化生产和无季节性深层发酵在发酵罐中在最佳条件下进行,不受季节性限制。3.液体菌种的使用1。液体菌种的生产食用菌深层发酵2-7天后的幼菌丝体可作为食用菌栽培的原种和栽培种。2.用于制备药物或提取生化产品的食用菌种类很多,3。制作
10、食品或畜禽饲料。制造液体菌种1的主要设备。带振动台的往复式播种床:摆动方式为往复式;旋转方式是旋转,4。制作液体菌种的主要设备。种子罐和发酵罐中有多种食用菌,深层发酵培养的菌丝体可用作提取药物成分或生化产品的原料。4.生产液体菌种的主要设备。空气净化设备。培养基连续灭菌设备包括配料罐、连续消除塔、维护塔、喷淋冷却器等。5.供气设备主要是蒸汽锅炉及辅助设备;5.液体菌种1的主要生产工艺。种子制备种子制备的目的是繁殖足够多、健壮和高纯度的种子;斜面菌种的制备。摇瓶种子的制备一级和二级种子的制备第一个种子罐通常为50-100升,第二个种子罐为500-1000升。6.液体菌种制作的主要参数1。细菌的年龄与种子的活力密切相关。摇瓶种子的菌龄一般控制在4-10天,一级种子和二级种子的菌龄为48-96小时。2.接种量一般来说,食用菌深层发酵的接种量为10-20%。3.温度通常为22-30,生长最快,产量最高。4.食用菌深层发酵的通气量为0.2-1.5通气量/培养液体积/分钟。5.搅拌速度食用菌深层发酵的搅拌速度一般为180-500转/分钟。6.不同种类的食用菌都有一个最适的酸碱度,如黑木
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