血液透析内毒素检测的意义.ppt

1、b,1,内毒素检测的临床意义 -血液透析中内毒素检测的重要性,b,2,热原反应,热原反应是血液透析中常见的并发症，发生率约在10以下。因血液透析涉及环节诸多，往往难辨热原反应的直接发病因素，使防治措施难具针对性。 热原反应特点:患者于透析开始1h左右，出现恶寒、寒颤，或伴恶心、呕吐，体温升至38左右。静脉推注地塞米松2550mg或肌肉注射非拉更250mg，30min后，症状消失，体温逐渐降至正常。,b,3,热原反应的相关因素,透析器因素 复用的透析器和血路管 透析液和透析用水 净化剂和消毒剂:次氯酸钠、双氧水、氢氧化钠等常用净化剂，对透析膜有腐蚀作用，会增大膜孔径甚至引起破膜；过氧乙酸是高效、

2、广谱、速效的消毒剂，但其化学性质不稳定，消毒效果受配制浓度、储藏时间和室温的影响。 透析机的消毒和使用:在需要连续工作十几个小时的状态下，两班之间往往人为忽略消毒程序的运行，有造成医源性交叉感染之嫌。 患者自身因素:有些患者潜在感染，血液透析时血流动力学发生改变，加之肝素抗凝，容易造成局部感染扩散而在透析中出现寒颤、发热等症状。透析患者并发败血症，也表现为透析中高热、寒颤，而48 72的败血症是由血管通路感染引起的。,b,4,内毒素检测的重要性,因此，保证透析液微生物质量是对现代血液透析的基本要求。血液透析中对内毒素检测势在必行。,使患者产生低血压，肌肉痉挛，头痛，发热等症状，严重的可导致休克

3、。而长期内毒素刺激，会造成透析的长期并发症如腕管综合症和慢性炎症反应等。,尤其是内毒素，由于其水解后可以穿过透析膜进入到患者的体内，导致急性热源性反应。,使用被微生物污染的透析用水和透析液科引起患者的多种急、慢性并发症，直接影响患者的透析质量和生存质量，严重的甚至危及生命。,b,5, 2005年8月卫生部颁布了委托中华医学会制定的血液透析器复用操作规范中明确规定： 水质要求：应定期检测复用用水细菌和内毒素的污染程度。内毒素含量不得超过2 EU/ml，干预限度为1 EU/ml。 中华人民共和国医药行业标准 YY 0572-2005 血液透析和相关治疗用水（ISO 13959：2002，MOD）中

4、明确规定： 在水处理装置的输出端的细菌内毒素，应不得超过1EU/ml；在血液透析装置入口的输送点上的细菌内毒素不应得超过5EU/ml。 中华人民共和国医药行业标准 YY 0598-2006 血液透析及相关治疗用浓缩物（ISO 13958：2002，MOD）中明确规定： 浓缩物以细菌内毒素检查用水配成透析液后，透析液细菌内毒素含量应小于0.5EU/ml。,国家相关标准解读,b,6,各国标准,美国医疗仪器协会（American Association of Medical Instrument，AAMI/CDC）的标准： 细菌生长数：透析用水不超过200CFU/ml，透析液中不超过100CFU/m

5、l。 内毒素浓度：透析用水和透析液中不超过0.25EU/ml。 德国肾病协会建议标准： 透析用水：细菌生长数和内毒素浓度分别不超过100CFU/ml、0. 25EU/ml。 透析液：细菌生长数和内毒素浓度分别不超过1000CFU/ml、0.5EU/ml。 欧洲药典用水标准： 细菌生长数不超过100CFU/ml。 内毒素浓度不超过0.25EU/ml。,b,7,内毒素的定义,内毒素（Endotoxin, ET）是革 兰氏阴性细菌细胞壁的主要 成分，其化学成分为脂多糖 （Lipopolysaccharide，LPS）， 由类脂A、核心寡聚糖O及多肽 侧链组成。,b,8,体内内毒素的来源,b,9,内毒

6、素的作用机理,TNF、IL-1 IL-6、IL-8,瀑布样反应，全身炎性反应综合症,急性炎症,PG、TXA、LTC、PAG、C5a、O2-、NO，弹力酶 （二级介质）,脓毒综合征 （发热、低温、心动过速、尿少、酸中毒、低血压）,DIC,内毒素休克,MOSF（多器官功能衰竭）,死 亡,b,11,内毒素的生物学效应,b,12,内毒素检测方法,目前内毒素检测 的方法主要有,鲎试验,自动化动 力学方法,化学发 光法,光纤维生 物传感法,毛细管 电泳法,ELISA,结合免疫 鲎试验法,b,13,MB-80六大特点,快速：1个小时完成检测 动态：动态检测 定量：定量检测 灵敏：内毒素最低检测量1pg/ml

7、 防干扰：检测不受血中抗生素等的影响 应用范围：血液透析液，透析用水, 血液、尿液、脑积液、胸积液、腹水等,细菌内毒素 因子C 活化因子C 因子B 活化因子B 凝固酶原 凝固酶 凝固蛋白原 凝固蛋白（凝胶,鲎试剂与内毒素的反应机理,b,15,仪器检测原理： 动态比浊法： 动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖），系统通过测定生物试剂与检测样品中抗原抗体反应生成浊度，采用动态比浊法，连续检测浊度的变化建立时间（T）与微生物含量（C）关系的标准曲线，通过光电转换原理，经软件系统分析得出具体检测值，得出检测样品中含内毒素含量。,b,16,检测方法,内毒素/葡聚糖定量测定,MB80微生物快速动态诊断

8、分析仪 天津一瑞生物工程技术公司生产,1.血液标本的处理：抽取新鲜肝素抗凝血2ml，0.1ml血浆加0.9ml血液前处理液，放70水浴10min，取出后备用。 2.取鲎试剂一支加处理后的血浆0.2ml放混匀器上振荡30秒. 3.放入检测器，1小时后报告结果。,b,17,内毒素检测的临床意义,正常参考值：正常人血浆内毒素含量80%），而且血清丙氨酸转氨酶水平与内毒素血症发生率及含量无明显关系。,内毒素检测的临床意义,b,21,4.肝硬化：肝脏可摄取血流中内毒素的8090%，由于肝硬变后造成的肝枯否氏细胞清除能力下降及肝内组织结构和血流的改变，肝内毒素摄取减少，造成严重的内毒素血症。 5.胆道疾病

9、：胆石症伴胆囊炎的内毒素血症的发生率为78；化脓性胆管炎为20；梗阻性黄疸的程度与内毒素浓度以及持续时间有一定关系，术后的内毒素血症发病率为5075%，是术后出现并发症和患者死亡的一个重要原因。,内毒素检测的临床意义,b,22,6.急性胰腺炎：急性胰腺炎并发内毒素血症较常见，约占66，值得注意的是致死病例生前均并发内毒素血症且持续存在直至死亡。因此早期测定内毒素水平有助于判断疾病的严重程度，指导治疗，防止恶化。 7.溃疡性结肠炎：此病的内毒素血症发病率高达100，也有个别报道的阳性率仅为25。但多数认为内毒素血症是该病的重要并发症。,内毒素检测的临床意义,b,23,8.细菌性感染的辅助诊断、治疗和预后判断 全身性细菌感染时，内毒素浓度持续升高标志着炎症反应的加重，暗示预后不良并为持续存在感染病灶的一个线索，内毒素浓度下降则表明炎症反应逐步消失，提示潜在感染性病灶治疗有效，感染得到控制。 对尿液进行内毒素测定可检出革兰氏阴性细菌菌尿症和厌氧性阴性杆菌菌尿症(LPS