2016年生物一模汇编：生物工程（学生版）

1、专题七 生物工程一、细胞工程和酶工程：【2016年浦东一模】1图12中符合固定化酶特征的是（ ）AB C D【2016年浦东一模】2用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列步骤中错误的是（ ）A将抗原注入小鼠体内，以便获得特定的B淋巴细胞B用聚乙二醇作诱导剂，促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合CB淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后，无需筛选杂交细胞D将能产生特定抗体的杂交瘤细胞，培养后提取单克隆抗体二、微生物专题：【2016年奉贤一模】3登革热是由蚊虫叮咬传播的微生物传染病，该病的传播途径属于（ ）A病媒传播 B空气传播 C接触传播 D媒介物传播【2016年金山一模】4外科手术器械和罐头食品的灭菌处理，

2、标准是要能够杀死( )A球菌 B杆菌 C螺旋菌 D芽孢【2016年崇明一模】5下列不可能是微生物生殖方式的是 （ ）A孢子生殖 B出芽生殖 C分裂生殖 D营养生殖【2016年普陀一模】6分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（ ）A制备浸出液的土壤取自土壤的表层B涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒【2016年奉贤一模】7用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌 A B C D【2016年

3、普陀一模】8MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为了研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如右表，下列说法不正确的是（ ）A细菌的死亡不能通过光学显微镜观察其细胞的有无来确定B第2、3组对比表明，使用低浓度的青霉素可杀死MRSA菌C实验还需设计有2g / mL青霉素做处理的对照组D此实验设计不能揭示蛋白质H的作用机理【2016年一虹口模】9现有两种培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离得到( )成分KH2PO4MgSO47H2ONaClC

4、aSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5% A甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌 B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌 C甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真细菌 D甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌【2016年闵行一模】10下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（ ）A此培养基属通用培养基，可以鉴别出大肠杆菌B能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有青霉素的基因C此培养基可以用

5、于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中D此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准【2016年奉贤一模】11做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是 （ ）A高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上【2016年黄浦一模】12下列关于微生物的叙述完全正确的是( )古细菌的细胞壁与大肠杆菌的细胞壁成分不同 青霉素不能杀灭肝炎病毒酵母菌与蓝藻都没有核膜结构 固氮菌为自养微生物A B C D【2016年闵

6、行一模】13分析有关微生物的资料，回答问题。烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染。比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用时，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按下列一定的实验步骤操作，以确定病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。l 获取绿脓杆菌单菌落1配制培养基。主要步骤是计算称量溶化 分装倒平板。可用牛肉膏蛋白胨培养基培养绿脓杆菌，其培养基中的是否还需加入生长因子？理由是 。固体培养基中常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是 。（多选）A含有某些特殊的营养物质 B消毒灭菌不会改变其特性C能被微生物分解和利用 D

7、微生物生长温度范围内保持固体状态E配制方便且有良好的透明性2图2所示接种方法为 法，这种方法的主要目的是使接种物 。在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行在恒温箱培养3天后，培养基上有绿脓杆菌滋生浸有无菌水的圆纸片浸有头孢菌素的圆纸片浸有碳青霉烯类的圆纸片浸有比阿培南的圆纸片浸有美罗培南的圆纸片培养了一段时间，这样做的目的是 。 图1 图2l 检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感度3分析图3中的实验结果，说明绿脓杆菌对 类抗生素敏感，判断的的理由是 。如果你是医生，建议患者最好选用 抗生素。【2016年虹口一模】14回答有关微生物的问题图为某细菌结构的示意图，请据图回答：1该菌对青霉素高度敏感，说明

8、其属 （真/古）细菌。与噬菌体比较，其最显著的特点是 。图中“6”含有的化合物是_。2该菌含有的细胞器是 。通常作为基因工程中目的基因运载体的是结构 _。下表是该菌培养基的配方，其中蛋白胨用35S标记。3从同化作用类型看，该细菌属于_。在酵母膏中可能含有的生长因子有_（多选）。A某些维生素 B某些氨基酸 C酶 D微量元素4将经上述培养基培养的该细菌与噬菌体（亲代）充分混合。子一代噬菌体体内能检测到放射性，解释其原因_。下图示经紫外线照射后，诱导产生对T2噬菌体有抗性菌种的过程。5若要将抗T2噬菌体的细菌菌落从混合菌落中筛选出来，操作方法是：_ _。【2016年奉贤一模】15回答下列有关微生物的

9、问题。 I培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节。1图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，一般称为 。配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行 ，培养基在接种前要进行_灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是_。II从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样富集培养纯种分离。2不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从 环境采集。3富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 的培养

10、基，并在 条件下培养。4图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是 ，获得图3效果的接种方法是 。图2图3【2016年黄浦一模】16回答下列有关微生物的问题硝化细菌包括亚硝酸菌和硝酸菌，广泛存在于通气性较好的土壤中，在自然界氮循环中具有重要作用。土壤或水体中的有机物（如动物的排泄物或动植物的尸体）在分解过程会产生对动物毒性很强的氨，硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐。具体过程如下：1根据上述材料可知，硝化细菌在生态系统中的营养类型是 。A自养需氧型 B自养厌氧型 C异养需氧型 D异养厌氧型2硝化细菌通常以 方式增殖，当水体过于纯净时，

11、硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为 。3对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择培养基进行微生物筛选。在筛选硝化细菌时，其培养基成份包括 。（以下材料供选择：H2O、葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH4)2SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红-美蓝染料），接种后并培养。制备培养基时，灭菌与调pH值的先后顺序是 。如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成份是 ，菌落特征为 。4将采集自养殖池中的水样1ml稀释100倍，然选取稀释后的水样1ml，接种于上述硝化细菌选择培养基上培养。该实验接种所使用的工具是 。一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如下图，则该养殖池每毫升

12、水含有硝化细菌 个。【2016年长宁一模】17回答下列有关微生物的问题。炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。对炭疽病疑似患者，可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊。下表是培养炭疽杆菌的某培养基成分，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。甲图甲图1据表分析“某培养基”属于_。（多选）固体培养基 液体培养基乙通用培养基 选择培养基2若要从炭疽病疑似患者体内分离炭疽杆菌，可将患者皮肤的脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用无菌玻璃刮铲涂匀，该接种方法称为 。乙图所示的四种菌落分布图，由该接种方法得到的是 。（多选）3制备甲图中的液体培养基时需采取 方法灭菌，目的是 。接种可疑菌后，经35培养24小时，

13、液体培养基变浑浊，原因是 。4甲图中，对照组试管中应加入 后与实验组同时培养。6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 （高/低），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此实验依据的原理是 。5对排除的疑似患者及易感人群，可采取的最有效的预防措施是 。【2016年金山一模】18微生物已知某细菌的两种突变类型细菌和细菌的营养条件和菌落特征都相同，但细菌能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如下图。1步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、 等营养物质（至少写

14、出3种）；该培养基是 （多选）。A固体培养基 B液体培养基 C通用培养基 D选择培养基2步骤一采用 接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的 ，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是 。3无论是培养基（液），接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行 ；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是 。4为了筛选土壤中能够降解某除草剂的细菌（目的菌）。有人做了如下图实验：99mL99mLA、B、C培养基中 是唯一氮源，若三次试验结果记录到的菌落数分别为55、56、57，则1ml土壤浸出液样中含目的菌数为 个。【2016年宝

15、山一模】19有关微生物的问题植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈 。为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了如下培养基（成分见下表）：注：“+”表示有，“”表示无。酵母膏无机盐纤维素粉琼脂CR溶液水培养基+-+1据表判断，培养基 （“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；配制培养基时，在各种成分都熔化后灭菌前，要进行的是 。实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样

16、做的目的是 。2在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 (多选)。 A酒精灯 B培养皿 C显微镜 D无菌水 E无菌滴管 F接种环 G玻璃刮铲图16纤维素酶活性（单位）5 15 25 35 45 55 65 75 温度（）J4J13有同学在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落如图15。 图中降解纤维素能力最强的菌株是 。图15降解圈菌落1菌落2菌落34教师用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度条件进行纤维素分解发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图16，推测菌株 更适合夏季分解植物桔杆，理由是： 。三、基因工程：【2016年宝山一模】一、关于基因工程问题CAATTGGT

17、TAACCAATTGGTTAACGDNF基因含GDNF基因的DNA片段A重组载体重组载体载体注：bp表示碱基对，载体和基因片段上的小箭号示相关限制酶的酶切点XhoIGDNF基因700bp600bpBamHI1XhoIHpaIXhoI载体（6000bp）100bp载体自连正向连接反向连接GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图21所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： 1完成图中A过程必需的工具是 ；该基因治疗的受体细胞为 。2若要构建含GDNF基因的表达载体，则需选择图21中的 限制酶进行酶切。

18、3限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是CAATTG和GAATTC。如下图表示四种质粒，其中，箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。HpaIXhoIXhoIXhoIABCD4下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述，错误的是_（多选）。A限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列 B限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同 C使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解 D质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的5经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF

19、基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图21所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，若是正向连接的重组载体，其产生的酶切片段数为 个，反向连接的重组载体产生片段有 （多选）。 100bp 200bp 600bp 700bp 6000bp 6500bp 【2016年黄浦一模】二、回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。如下图所示，质粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四环素抗性基因（YR）。其中，XR内部含有限制酶KasI识别序列，YR内部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列，且这些识别序列在整个质粒上均仅有一

20、处，目的基因内部不存在这些识别序列。1质粒PBR322的本质是 。FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV中限制酶的作用特点是 。2NaeI酶切目的基因和质粒，加入DNA连接酶连接后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后，受体细胞的类型包含 （多选）A抗青霉素、抗四环素 B抗青霉素、不抗四环素C不抗青霉素、抗四环素 D不抗青霉素、不抗四环素3若用KasI和FseI联合酶切上述重组质粒，则可能产生的酶切片段数 。A2 B3 C4 D54动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是_。A受精卵能使目的基因高效表达 B受精卵可发育成动物个体C受精卵基因组更易接受DNA的插入 D受精卵尺寸较大，

21、便于DNA导入操作5若目的基因模板链中的TGA序列对应1个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是 。通过筛选出的受体细胞内，目的基因能成功表达的原因是： 。【2016年浦东一模】三、回答下列有关基因工程的问题。苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图22是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（为抗氨苄青霉素基因），表示过程。 图221由Hind酶切后，得到DNA片段的末端是（ ）A B C D2将图22中的DNA用Hind、BamH完全酶切后，产生 种DNA片段，过程可获得 种重组质粒。如果只用BamH酶切，目的基因与质粒连接后可获得 种重组质粒。3该过程中Bt毒素

22、蛋白基因插入质粒后，不应影响质粒的（ ）A复制 B转录 C碱基对的数量 D抗性基因的表达4 此基因工程中大肠杆菌质粒的作用是 。【2016年金山一模】四、基因工程与遗传表达苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图（一）是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；下图（二）是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的二种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。图（二）图（一） 1将图（一）的DNA用Hind、BamH完全酶切后，反应管中有 种DNA片段。过程需要用到 酶。 2假设图（一）中质粒原来的BamH识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶Bcl的碱基序列，现用Bcl和Hind切割质

23、粒，则该图（一）中的DNA右侧还能选择BamH 进行切割，并能获得所需重组质粒吗？ ，请说明理由 。3若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒 A既能被BamH也能被Hind切开 B能被BamH但不能被Hind切开C既不能被BamH也不能被Hind切开 D能被Hind但不能被BamH切开4图（二）中a链是 。不同组织细胞的相同DNA进行过程时启用的起始点 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是 。【2016年虹口一模】五、回答下列有关遗传信息的传递与表达的问题。普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮

24、藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞，培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。图24为操作流程图，据图回答问题。图24多聚半乳糖醛酸酶基因多聚半乳糖醛酸酶基因 图81实验中的目的基因是_。2构建基因表达载体时必需的工具酶有_。3图24中步骤使用的生物技术是_。这种技术可保留番茄植株抗软化、保鲜时间长的优良性状，其原因是_。4根据图24中，转基因番茄细胞中的信息传递过程，分析转基因番茄抗软化的原因。_5若将得到的二倍体转基因番茄植株自交，F1中抗软化与不抗软化的植株数量比为3：1，则可推测目的基因整合到了_。A一对同源染色体的一条上 B一对同源染色体的两条上C两条非同源染色体上 D一对

25、同源染色体的非姐妹染色体上【2016年普陀一模】六、回答下列有关基因表达和基因工程问题。1图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp、BamH、Mbo、Sma4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列分析中正确的是（ ）（多选）A若用限制酶Sma完全切割图1中DNA片段，能产生2个平滑末端B若用限制酶Msp酶切含目的基因的DNA片段，则获得的最长的DNA片段长度为788bpC若需将目的基因D导入图2中的质粒，应选择限制酶是BamHD为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A2假设某基因的右侧序列是 ，应选择下表中的（ ）酶（填数字序号）作内切酶。3请在方框内画出上题酶切后产生的两个末端的碱基序列。右下