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文档简介
1、选择1:生物技术实践主题4酶的研究和应用,课题3酵母细胞的固定化、和常用的酶制剂有4种。 影响酶活性的因素是:酶活性。 3、影响洗涤剂洗涤效果的因素是。 在食品、化工、轻纺、医药等领域大量使用酶制剂,说明了酶制剂的使用有很多优点,能举出几个例子吗?催化效率高,功耗低,污染低等。 酶制剂的使用有没有缺点?能列举几个例子吗?酶制剂中存在的缺陷: 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件敏感,容易失活2、溶液中的酶难以回收,不能再利用,提高了生产成本3、反应后混入产物中,影响产品的质量如果你是工程技术人员,怎么解决这个问题? 读、p 49-50,1、如何解决酶的应用问题? 2、这个方法的优点是什么
2、?3、高果糖浆是什么?有什么优点? 4、生产高果糖浆需要什么酶?它的作用是什么?这个酶的特征是什么?5 .知道高果糖浆的生产过程。 一、固定化酶的应用实例,一、固定化酶技术。 把酶固定在一定空间的技术(例如固定在不溶于水的载体上)。 2、固定酶技术的优点: (1)使酶与反应物接触,与产物分离;(2)固定在载体上的酶可以再利用。 3、高果糖浆果糖含量在42%左右。 作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖一样诱发肥胖、糖尿病、蛀牙和心血管疾病,有利于人的健康。 可以写果糖分子式吗糖是什么?4,生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶,这种酶具有把葡萄糖转化成果糖的作用,稳定性好,可持续作用。5、用固定化酶技术生
3、产高果糖浆的图示:注意反应柱的各部分名称。 能说反应柱的优点吗?生产工艺、反应柱可以连续使用半年,大幅度降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。 优点:练习:1,以下说法不正确的是() a,葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖b,从固定化酶反应柱下端流出的是果糖c,高果糖浆如蔗糖一样肥胖,糖尿病、蛀牙和心血管疾病d,酶如葡萄糖如果将从大肠杆菌中得到的磷酸酯酶固定在尼龙薄膜上进行制剂化的话,为了分解土壤中残留的有机磷农药,比起用微生物分解,更适合其作用的() a、温度b、PH C、水分d、营养、3,现在日用化学工厂大量生产的酶制剂如果不足怎么办?是的,有。 虽然一种酶只能催化一种化学反应,
4、但生产实际上很多产物的形成因为一系列酶可以促进反应,所以操作很麻烦。 可以采用固定化细胞技术。二,固定化细胞技术,一,概念:利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。 细胞中含有一系列酶,在细胞正常的生命活动过程中,代谢会产生必要的代谢产物。阅读P50 :考虑第二阶段的问题,2 .固定酶和细胞的方法,将酶(或细胞)包埋在微细的网格中,将酶(或细胞)相互连接,使酶(或细胞)吸附在载体表面,包埋法、化学结合法、吸附法、酶和细胞固定法的选择,酶适合用化学结合或物理吸附法固定细胞适合用包埋法固定,1 ),方法(2),原因,细胞大,酶分子小,个体大的细胞难以吸附或结合,容易从包埋有小酶的材料中漏出,
5、3,固定化细胞中常用的载体,常用的不溶于水的多孔性载体是什么如果明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等反应基质是高分子物质,为什么能利用固定化细胞技术?那应该采用什么样的技术? 练习:1.使用固定化细胞的优点是() a .能催化高分子物质水解的b .能催化一系列化学反应的c .容易接近反应物的d .酶容易在细胞外工作,2 .不包含酶的固定方法。 a .酶吸附在固体表面上,b .酶相互结合,将c .酶埋入微细网格中,d .酶制成固体酶制剂,例如酶粉洗涤剂中含有的酶,3 .反应物为高分子物质时,用该方法限制催化剂。 a .直接使用酶b .使用化学结合的酶c .使用固定化细胞d .用物理吸
6、附法固定化的酶为4,以下的酶和细胞的固定描述不正确. a .酶分子小,容易采用包埋法的b .酶分子小,容易用化学结合和物理吸附法固定的酶c .细胞大,d .细胞难以吸附和结合的包埋法容易固定,5 .关于固定化酶的记述错误。 b .固定在载体上的酶能够与反应物接触和分离,c .能够催化一系列反应的d .酶的活性和稳定性受到限制,6 .固定化细胞对酶活性的影响最小,根本原因是() a .避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程b .固定化细胞在多种酶促进反应中连续作用的c .促进反应结束后,吸收d .细胞结构并被再利用,保证了各种酶在细胞内化学反应中有效地发挥作用,三、实验操作,(一)调制固定化酵母细胞,
7、阅读P5051, 考虑以下问题: (1)制造过程中包含哪个步骤(2)你认为哪个步骤的操作最重要? (3)每一步应该注意哪些问题? 1、酵母细胞的活性化、思考:对酵母菌有什么知识和活性化? 怎么激活呢? 应该注意什么?活化:使处于休眠状态的微生物恢复正常生活状态的本质:加快新陈代谢的方法:加入适量的水。 能说出理由吗?取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入10ml蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞均匀混合,制成糊状,放置1h左右使其活性化。 你认为酵母的活化操作有什么注意事项?1 .使用的容器要大2 .要保证酵母菌的活性3 .种子要单一4 .注意水的使用量。 2、调制物质的量浓度为0.05mo
8、l/L的CaCl2溶液被称为无水Cacl2 0.83g。 放入200mL烧杯中,加入150mL蒸馏水充分溶解,等待。 制备、3、海藻酸钠溶液,操作:称量0.7g海藻酸钠,放入50mL烧杯中,加入10mL水,边用酒精灯加热边搅拌,使海藻酸钠变成糊状,用蒸馏水定容至10mL 注意:加热要用火或者断续加热,反复多次直到海藻酸钠溶解,加热溶解海藻酸钠是操作中最重要的一环,关系到实验的成功与否,必须按照教材的提示操作。 海藻酸钠的浓度关系到固定化细胞的质量。 海藻酸钠的浓度过高时,凝胶珠难以形成的浓度过低时,所形成的凝胶珠中包埋的酵母细胞的数量少,会影响实验效果。应该注意什么问题?4、将海藻酸钠溶液与酵
9、母细胞混合,将溶解的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入活化的麻醉母细胞,充分搅拌均匀混合,转移到注射器中。 为什么要冷却海藻酸钠溶液? 固定化酵母细胞以一定速度向调制的Cacl2溶液中缓慢滴下注射器中的溶液,观察了在Cacl2溶液中形成凝胶珠的情况。 将这些凝胶珠在Cacl2溶液中浸渍30 min左右。 你知道氯化钙在哪里可以使用吗?必须把刚制成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡一会儿,形成稳定的结构。 要检查凝胶珠的质量是否合格,可以使用用镊子夹住凝胶珠用手按在实验机上,凝胶珠不易破裂,如果液体不流出,就表示凝胶珠的制作成功的方法。 二是通过在试验机上用力打凝胶珠,如果凝胶珠容易弹性,表示制造的凝胶珠
10、成功了。 在这个阶段能否成功? 如何评价呢? 观察凝胶珠的颜色和形状:制作的凝胶珠的颜色太淡变成白色时,海藻酸钠的浓度低,固定的酵母细胞的数量少。形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形的情况下,海藻酸钠的浓度高,在制作上(二)用固定化细胞发酵,1、用蒸馏水清洗固定化的酵母细胞(凝胶珠)23次。 2 .将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的玉米瓶中,加入固定的酵母细胞,在25下发酵24小时。在这个阶段能否成功? 你怎么评价? 观察发酵的葡萄糖溶液使固定的酵母细胞发酵产生酒精的话,会产生很多气泡,有酒味。 还有别的方法吗? 放学后P52, 练习1,1,制作固定化酵母细胞的过程错误的是() a,取出干燥酵母,加入蒸馏水使b活性化,调制海藻酸钠时,加
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