流式的原理及应用概要

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2、颗粒，一般为单细胞悬液 分析速度：快速，Calibur 2,000事件/秒 检测参数：多个（两个散射光，多个荧光参数）,流式细胞术的特点,分析对象：任何直径50 m的颗粒，一般为单细胞悬液 分析速度：快速，Calibur 2,000事件/秒 检测参数：多个（两个散射光，多个荧光参数） 检测结果：精度高，准确性好，具有统计学意义,BD公司的分析型流式细胞仪,BD公司的分选型流式细胞仪,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,液流系统 收集细胞并使之与激光正交,流式细胞仪的结构,液流系统 收集细胞并使之与激光正交 光学系统 激发和收集光信号,流式细胞仪的结构,液流系统 收集细胞并使之与激光正交 光学系

3、统 激发和收集光信号 电子系统 把光信号按比例转化成电子信号,流式细胞仪的结构,液流系统,废液桶,鞘液桶,上样针,流动室,激光正交,流式细胞仪的结构,液流,样本,样本,鞘液,鞘液,鞘液,鞘液,红激光,蓝激光,紫激光,低流速,高流速,流式细胞仪的结构,流速： 低速 12 l/min 中速 35 l/min 高速 60 l/min,流式细胞仪的结构,光学系统,流式细胞仪的结构,长通,接收器,带通,长通+带通,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,Laser Wavelength Min. Power Commonly Used Fluorochromes (nm) (mW) or Dyes Blue

4、 488 nm 13 FITC, PerCP, PerCP-Cy5.5 Red 633 nm 11 APC, APC-Cy7, APC-H7 Violet 405 nm 30 Pacific Blue, DAPI, BD Horizon V450 and V500 Near UV 375 nm 7 Hoechst Red, Hoechst Blue, PI, DAPI Yellow-Green 561 nm 30 PE, PE-Cy5.5, PE-Cy5, PE-Texas Red, mCherry, PE-Cy7, PI Blue-Violet 445 nm 20 CFP, AmCyan f

5、luorescent protein,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,电子系统,光子,接收器,光信号转化为电信号,电信号处理,电脑,流式细胞仪的结构,电子系统,流式细胞仪的结构,高（H）= 最大荧光强度 宽（W）= 时间 面积（A）= 总荧光强度,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,流式细胞仪的结构,流式细胞仪操作的基本流程,流式细胞仪操作的基本流程,开机和液流启动,质控,样本收集,数据分析,样本收集,数据分析,清洗和关机,流式分析样本的制备,流式分析样本的制备,流式分析样本的制备,单细胞悬液的制备 目的分子的标记 样本过滤等待上机,流式分析样本的制备,

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