(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

1、1,主讲： 窦 辉 班别：高二（22）班,2,番茄-马铃薯 （理想图）,3,有梦想，才会有创造！,4,人鼠 （想像图）,如何实现人、动物之间 细胞的融合呢？,5,人工诱导,1.1动物细胞融合的概念,动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。,6,物理法：,化学法：,生物法：,灭活的病毒（特有的方法）,原理：,（与植物细胞融合的基本原理相同）,离心、电激、振动,聚乙二醇(PEG),细胞膜的流动性,7,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性）,8,1.2动物细胞融合过程,保留融合活性,为什么

2、灭活的病毒能作诱导剂？,灭活丧失感染性,9,1.3动物细胞融合技术的意义和应用,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,意义：,应用：,制备单克隆抗体（最主要的应用）,10,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点：,如何解决这个问题呢？,抗体的传统生产方法,抗原,反复注射动物,产量低,纯度低,特异性差,灵敏度低,11,1975年的实验室,一个美丽的发现 每个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,怎样大量获得单一抗体,进行无性繁殖（克隆）,体外培养的细胞不能无限增殖,？,癌细胞,但是,既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞,1

3、2,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体,你的设想,既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞,13,BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）,（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活,（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,获得产生相应抗体的B细胞,14,2.2单克隆抗体的应用,诊断试剂最广泛应用 准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要的优点：,特异性强,灵敏度高,并能大量制备,15,“生物导弹” 单克隆抗体药物 单抗导向，药物为弹头,治疗疾病和运载药物,主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体

4、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。,16,17,两个过程,动物细胞融合过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,本节小结,重点,18,【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ) A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁,B,A,你掌握了吗？,19,【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产

5、生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞,A,初试牛刀,20,【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体,B,初试牛刀,21,15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答： （1）该方案能达到预期效果吗？ 。原因是 _。 （2）图中为 过程，常用 作为诱导剂。该细胞继承了_ ，因此不仅能分泌 _，还有 本领。,不能,没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞的遗传物质,特异性抗体,大量增殖