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文档简介
1、稀有血型血液保存及临床注射,长沙血液中心王赤林,全血保存,保存方法:低温保存温度:42保持液:ACD。ACDA-A/B.CPDA-1等保存时间:ACD21日ACDA-A/B.CPDA-135日,红细胞保存,低温保存温度:42保存时间:MAP等保存时间:35日深低温保存然后应用甘油作为保护剂,成功冻结了红细胞,但冷冻保护剂去除问题并不适用于临床。1956年,通过使用Cohn分离器去除冷冻保护剂甘油,冷冻红细胞成功地用于临床,但这种方法比较复杂,尚未得到广泛应用。1963年,人们发现,冷冻红细胞被用作糖液冲洗法去除甘油,因此,冷冻红细胞逐渐在临床上得到广泛应用。红细胞的低温保存进展,1972年清洗
2、红细胞的氯化钠溶液浓度不同的甘油去除。我国从20世纪70年代中期开始进行红细胞冻结保存研究,1975年临床成功。从手工制造到半自动设备,再到到目前为止的全自动设备,都准备就绪。经过多年的研究和探索,方法得到改善,为保存血液开辟了另一条重要途径,这是现代输血工作中长期保存红细胞的唯一方法。红细胞的深低温保存机制,低温损害盐变学说:水结冰时细胞内外产生的高浓度电解质对细胞膜起作用,增加细胞膜的阳离子通透性,在细胞膜上形成小孔。冰融化时,水进入细胞,引起渗透性休克;冰晶的机械作用:冻结时在细胞内外形成冰晶,冰晶作用于细胞膜,细胞膜上产生了微小的孔,使细胞膜不可逆渗透性,解冻后发生溶血。红细胞的低温保
3、存机制,冷冻保护玻璃化的概念:生物材料在从液体到固体的转化过程中未形成晶体,或小于5-10nm。玻璃化是冷冻保存生物材料的最有效方法。冷冻保护措施:1,添加冷冻保护剂,使细胞的水容易到达玻璃化状态。2、快速冻结和解冻,细胞水和胶体快速玻璃化。冷冻保护剂:细胞内保护剂:甘油、DMSO等细胞外保护剂:羟乙基淀粉、甘露醇等。红细胞的低温保存机制,冷冻保护剂种类很多,但大部分在实验室中研究和应用,实际上成熟,多用于临床,仍然是以甘油为基础的保护剂。甘油无毒、中性、分子量小,能渗入细胞,水结合力强,显着减少水溶液的结晶点,引起结晶过程缓慢或未结晶的凝固。甘油与水结合,降低电解质浓度,防止红细胞冻结损伤,
4、减少或避免膜脂蛋白复合物的变性和磷脂的丢失。红细胞冻结方法,红细胞甘油浓度高的冻结方法,红细胞甘油最终浓度约为40%(w/v);制冷不需要严格控制冷却速度,制冷冷却速度约为1-10/分钟。冷冻和保管可以使用-65以下的机器冰箱。用低浓度甘油处理红细胞的快速冷冻方法,红细胞的甘油最终浓度约为18-20% (w/v)。将甘油红细胞放入液氮里(-196),快速冷冻,冷却约100-1000/分钟;然后将冷冻红细胞保存在-120。冻结红细胞的制备(a)缓慢的冷冻糖液絮凝清洗准备方法:pH5.2-6.1,血浆中的伽马球蛋白和红细胞的脂蛋白形成可逆复合物,非电解质溶液添加糖,葡萄糖溶液,离子强度减少,离子间
5、重力减少,与脂蛋白结合的球蛋白互可逆结合使红细胞凝聚沉淀。甘油配方:甘油(g/v)79.2%,葡萄糖(g/v)8.0%,果糖(g/v)1.0%,EDTA.2Na0.3%制备方法:全血或,冷冻红细胞制备(2)缓慢的冷冻盐液体离心清洗准备方法:使用不同浓度的NaCl溶液(从高渗透到等渗),通过大规模离心机重复离心机,或通过连续离心机分离甘油,洗脱。甘油配方:加入甘油(g/v)57.1%、乳酸钠(M)0.14、氯化钾(mM)5、磷酸二钠(mM)5的制备方法:加入全血或悬浮红细胞离心甘油试剂,室温平衡30分钟,冷冻红细胞制备(3)快速冷冻制备方法,甘油制剂:甘油(w/v)28%,甘露醇(w/v)3%,
6、氯化钠(w/v)0.65%4.3.2,冷冻红细胞具有冷冻红细胞的特点,保存时间长达10年,适合稀有血型红细胞的长期及日常保存。对于自体输血者,可以用这种方法提前冷冻保存自己的红细胞,必要时进行清洗和运输解冻。冷冻冲洗的红细胞基本去除白细胞、血小板和血浆蛋白,比清洗红细胞提高去除率,减少输血副作用,更有利于血液疾病、阵发性睡眠性血红蛋白蛋白尿、肾功能异常及心脏功能不良患者的注射。特别是牙齿不足,有抗牙抗体的患者和有严重过敏输血反应的患者的理想血液。与冷冻红细胞的2,3-DPG含量和冻结前没有太大区别,接近正常,投入人体后,红细胞的释氧能力优于4个保留期长的库皮,可以立即纠正缺氧,有利于胸水术或新
7、生儿输血。冷冻红细胞的制造需要一定的设备,解冻和清洗需要一定的时间。成品冷冻红细胞的质量标准,容量200毫升全血制造的冷冻红细胞的容量为200ml10%。用400毫升全血制造的冷冻红细胞的容量为400ml10%。红细胞回收率为80%。残留白细胞1%。残留血小板1%。残留甘油含量10g/L .玻璃血红蛋白含量1g/L .体外溶血试验50%。HBsAg、Anti-HCV、Anti-HIV为阴性,梅毒螺旋体血清学检测为阴性,ALT正常。细菌不生长。临床输血技术规范稀有血型患者输血相关条款、Rh(D)阴性及其他稀有血型患者应使用自体输血、同种输血或配方输血。第十一条新生儿溶血病需要接受输血治疗,由主治
8、医师申请,经主治医师批准,经小儿家属或监护人签字,血液站和医院输血科提供适当血液,输血由景区、输血科(血库)工作人员共同实施。有关罕见血型患者输血的临床输血技术条款,第15条输血科(血库)审查输血申请表格、被血者和献血者的血液样本、被血者和献血者的ABO血型(正反定型化)、患者Rh(D)血型(紧急救援患者紧急输血时Rh(D)血型)第十六条全血注射、浓缩红细胞、红细胞悬浮液、红细胞冲洗、冷冻红细胞、浓缩白细胞、浓缩血小板手动分离等患者,应接受交叉血液检查。机器单采浓缩血小板应该是ABO血型相同类型的注入。Rh(D)阴性血临床注入,Rh(D)阴性血传递给ABO同型Rh(D)阴性患者。Rh(D)阴性
9、全血、悬浮红细胞、冷冻血浆、浓缩血小板、冷沉淀、血浆中没有抗D抗体的话,会输给ABO同型Rh(D)阳性患者。Rh(D)红细胞的清洗,冻结的红细胞可以输给ABO同型Rh(D)阳性患者。Rh(D)阴性输血,全血输血的常见情况,手动分离红细胞、浓缩血小板的ABO型Rh(D)阴性血。单血小板输注:男性和不具生育能力的女性患者可以考虑采用ABO型Rh(D)阳性血小板输血。有生育可能性的女性必须失去ABO同型Rh(D)阴性血小板。注入冷冻血浆会无视Rh(D)血型,失去ABO同型产品。Rh(D)语音输血,紧急输血根据抢救患者生命的原则,手动分离全血、红细胞、浓缩血小板,并尽可能输入ABO同型Rh(D)阴性血。如果没有Rh(D)阴性血,患者血浆中没有产生抗D抗体,则可以注射ABO同型Rh(D)阳性血,并可能获得患者或其家属的知情同意。Rh(D)阴性红细胞结合ABO。如果没有Rh(D)阴性血,血浆中产生抗D抗体,应降低患者体内抗D抗体效价,注入ABO同型Rh(D)阳性血,挽救患者的生命,并征得患者或其家属的知情同意。Rh(D)阴性红细胞结合ABO。给其他稀有血型患者输血,给患者血浆中
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