梅毒血清学检测策略及影响因素

1、、梅毒血清学检测策略及影响因素，重庆市涪陵中心医院涂伟2020/7/4，梅毒概况，梅毒是苍白螺旋体引起的慢性、系统性传播疾病。 人体感染后，多侵犯全身各组织和器官，临床表现多种多样，有时隐藏，病程长。 中华人民共和国传染病防治法规定了应管理的主要性病之一。 早期主要侵犯皮肤和粘膜，晚期除了侵犯皮肤和粘膜外，还可以侵犯心血管系统和中枢神经系统，而梅毒则多年无症状地潜伏着。 梅毒主要通过性接触传播，也可以通过血液和母子垂直传播。梅毒螺旋体、梅毒是一种性传染病，病原体是梅毒螺旋体，密螺旋体属、苍白密螺旋体苍白亚种(treponemapalidumsubspeciiespallidum )、极细亚种雅

2、司病、地方亚种地方性梅毒、苍白亚种梅毒、苍白螺旋体、品他密螺旋体属中国的基本消灭(1950年至1964年)是中国政府控制梅毒的政策中国预防和梅毒计划(2013年至2013年)性病管理方法(2013年)艾滋病、梅毒和乙肝母子感染预防的实施方案、梅毒分期、 梅毒二期梅毒三期梅毒隐形梅毒胎传梅毒在临床上可治愈传染病例的诊断依据(ws273-2007 )病历症状实验室的检测结果对梅毒的诊断和判定有决定性意义，梅毒实验室的检测方法、病原学检测梅毒血清学检测组织病理学检测白细胞检测蛋白检测、病原学检测、暗视镜检测镀银染色法核酸检测(什么)，梅毒血清学检测方法，(1)梅毒非特异性抗体检测(非梅毒线圈抗原血清

3、学试验) (2)梅毒特异性抗体检测(梅毒线圈抗原血清学试验)，梅毒非特异性抗体检测原理，当梅毒线圈体感染人体时，宿主对线圈体表面的脂质进行免疫应答，产生抗脂质抗原抗体(即非特异性抗体)。 没有接受治疗的患者，血清内的非特异性抗体可以长期存在。 接受正规治疗后，非特异性抗体会逐渐减少滴度，或变成阴性。 反应原理抗原抗体结合形成复合物，凝聚的网状沉淀粒子是肉眼可见抗原的基本成分心磷脂、卵磷脂和胆固醇的方法，是快速血浆反应素环状卡试验(RPR )非加热血清反应素(USR )甲苯胺红非加热血清试验(TRUST )性病研究实验室试验(VDRL )的中华人民共和国卫生行业标准WS/T491-2016梅毒非

4、特异抗体检测操作指南，常见测定影响因素，水平旋转仪(100 2r/min )反应时间专用抗原点滴针样品量要求，抗原量每滴17ul左右的反应板要求：没有污染，试剂打开后不能冷藏保存假阴性反应感染梅毒螺旋体后，机体免疫应答需要一定的过程，抗脂质抗体浓度还在实验方法的测定界限以下，称之为窗边期，发生假阴性反应。 少数早期梅毒和神经梅毒和部分晚期梅毒会发生定性试验假阴性反应。前带现象的部分早期梅毒(1%-2%的二期梅毒，0.5%-1%的一期梅毒)的样品前带现象样品类型的血浆中抗体浓度明显高于血清，同一患者的血清和血浆检测结果无法直接比较。 虽然、VDRL、RPR、TRUST的检测原理基本相同，但根据采

5、用的抗原原料和生产技术的不同，各种方法和试剂之间可能有一定范围的敏感性和特异性的系统差异。 两种方法的定性和半定量结果不能相互直接比较。 采用梅毒非特异性抗体作为梅毒筛选用途时，必须选择敏感性高的方法或试剂。假阳性问题、假阳性：非梅毒患者血清反应阳性的技术假阳性是由于标本保存不良(细胞污染、溶血等)、试剂质量差或过期或实验室操作错误。生物学假阳性是因为患者其他疾病和生理状态发生变化，梅毒血清试验为阳性。 急性生物学假阳性反应的疾病，风疹水痘传染性单核细胞病传染性肝炎上呼吸道感染肺炎球菌性肺炎水痘疹，慢性生物学假阳性反应的疾病， 系统性红斑狼疮自身免疫性溶血性贫血性红斑狼疮结节性多动脉炎桥本氏甲

6、状腺炎风湿性心脏病、药物依存症、慢性肾炎、肝硬化、老年麻风(唯一产生慢性生物学假阳性的感染性疾病)，梅毒特异抗体检测，抗原为梅毒螺旋体特异蛋白(包括螺旋体重组特异抗原)，梅毒患者感染梅毒螺旋体后，梅毒螺旋体抗体试验阳性时，该患者几乎终生阳性。梅毒螺旋体抗原结果，外膜脂蛋白抗原47、44.5、43、36、34、17、15KDa成分，其中47含量高，免疫原性强，是主要抗原，但与其他两种病原性螺旋体有交叉反应)轴线抗原轴线为运动器官，37、35.5、 梅毒特异性抗体检测技术、梅毒螺旋体明胶粒子凝聚试验(TPPA )梅毒螺旋体血细胞粒子凝聚试验(TPHA )酶免疫试验(ELISA )化学发光免疫分析法

7、(CLIA )免疫色谱梅毒快速检测(RT )荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS )蛋白印迹试验(WB ) .TPPA/TPHA原理TPPA试验原理与TPHA试验基本相同TPPA试验用梅毒线圈体感作用明胶颗粒TPHA试验中梅毒线圈体感作用羊红血球的特征梅毒线圈体(Nichols株)全抗原、SerodiaTPPA的操作步骤、6、结果判断、5、混合、盖2小时烧烤粒子平滑地复盖整个孔底，有时边缘折断粒子平滑地复盖的孔底的大部分，粒子平滑地复盖的孔底，周围有细胞环，粒子平滑地复盖的孔底，周围有明显的细胞环，粒子在孔底、中央稍微形成，粒子与孔底的中央密接原理是用重组梅毒线圈抗原包复固相板，加入梅毒血清

8、和单克隆抗体酶标记物，与抗原抗体复合体形成酶标记物，用酶标记器判定阳性反应。 特征本法可用于大规模血清检测。 化学发光法的临床应用意义与ELISA基本相同。 化学发光的敏感性是什么？ 免疫色谱、梅毒IgM抗体、IgM抗体的产生是感染后早期体液免疫应答反应。 由于IgM抗体不能通过胎盘屏障和血脑屏障，母体的IgG抗体通过胎盘屏障传递到胎儿，血液中的IgG抗体也通过血脑屏障进入脑脊髓液，因此如果在新生儿血中检测到IgG抗体，就不能成为先天性梅毒的诊断依据，IgM抗体也可以作为先天性梅毒的诊断依据。 同时，梅毒IgM抗体检测也可用于神经梅毒、早期梅毒的诊断依据。梅毒各种抗体的出现时间、先天性梅毒的诊断、先天性梅毒的诊断标准应具备以下条件之一： 1、暗视野显微镜检查梅毒线圈阳性； 2 .梅毒螺旋体IgM抗体阳性； 3.RPR/TRUST检测出阳性，滴度比母亲产前最近的滴度高4倍以上4.RPR/TRUST检查随访，一次滴度都没有下降，或反之，达到上升的5.18月龄后，TPPA检查仍为阳性。梅毒的血清固定、梅毒血清学实验室检测策略、梅毒血清学检测目的与策略的关系、传统策略、反向策略、双重检测策略、总结，非特异性和特异性两种抗体检测可以作为梅毒初筛试验。 哪种抗体的初筛阳性为了成为梅毒诊断的依据，需要用另一种方法进行再检查验证。 两种抗体检查虽然存在窗边期