细胞工程的基本技术

1、细胞工程复习,返回总目录,1.植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部_的任何一个细胞，都具有发育成 _的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的_。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的_和其他适宜外界条件。,遗传信息,完整生物体,全部遗传信息,营养、激素,知识梳理,答案,2.植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有_。 (2)过程,全能性,脱分化,再分化,人工种子,2.植物组织培养的条件：,3.植物体细胞杂交技术 (1)概念：将_的植物体细胞，在一定条件下融合成_，并把杂种细胞培育成_的技术。 (2)过程,不同种,杂种细胞,新的植物体,纤维素酶和果胶酶,

2、原生质体AB,细胞壁,.植物细胞工程的应用 (1)微型繁殖：优点是能够_。 (2)作物脱毒：利用_等无毒组织进行微型繁殖。 (3)培育_：可以解决某些植物结实率低、繁殖困难的问题。 (4)作物新品种的培育：单倍体育种和_的利用。 (5)细胞产物的工厂化生产：即利用_技术生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。,人工种子,茎尖、根尖,保持亲本的优良性状,突变体,植物组织培养,1.判断下列说法的正误 (1)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞的全能性() (2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性() (3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化() (

3、4)愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的(),诊断与思考,(5)利用物理法或化学法，可以直接将两个植物细胞进行诱导融合() (6)用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性() (7)再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志(),2.如图表示的是植物体细胞杂交流程示意图。请据图思考下列问题： (1)a表示什么过程？该过程为什么使用纤维素酶和果胶酶？ (2)b表示什么过程？该过程的原理是什么？,a表示去除细胞壁获得具有活力的原生质体，由于细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。,b表示原生质体的融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性。,物理法和化学法。物理

4、法包括离心、振动、电激等；化学法一般用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。,可以克服远缘杂交不亲和的障碍。,2.如图表示的是植物体细胞杂交流程示意图。请据图思考下列问题： (3)诱导b融合的方法有哪些？ (4)植物体细胞杂交技术用于作物育种有何优点？,返回,答案,1.植物组织培养和植物体细胞杂交的比较,归纳整合,2.植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法 (1)诱导产物(假设用于杂交的两种植物细胞分别为A、B)： 未融合的细胞：A和B。 两两融合的细胞：AA、BB和AB。 多细胞融合体。 (2)检测方法：对诱导产物中的细胞进行植物组织培养，然后根据得到的植物性状进行判断。 若得到的是具有两种亲本

5、性状的植物，说明是杂种植株。,返回,题组一植物组织培养过程分析 1.下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列叙述不正确 的是() A.该途径依据的原理是植物细胞具有全能性 B.过程需控制好培养基中植物激素的比例 C.经过程细胞的形态和结构发生了变化 D.过程需使用液体培养基，有利于细胞增殖,A,2.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示： (1)培育胚状体利用了_这一项生物技术，胚状体再继续培养， 则可培育出完整的植株，这体现了_。培养基中除了含有一定的营养外，还必须含有_等植物激素，还需要对培养基进行严格的_。,植物组织培养,植物细胞的全能性,细胞分裂素、

6、生长素,灭菌,2.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示： (2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的，若为了获得三七的细胞产物，则只需要培养到_；若为了获得三七的人工种子，则需要培养到_。如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的，通过基因工程要获取抗虫棉，目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是_法。,愈伤组织,胚状体,农杆菌转化,2.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示： (3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，必须要经过_。 无丝分裂有丝分裂减数分裂原代培养传代培养植物体细胞杂交细胞融合脱分化再分化,题组二植物体细胞杂交过程分析

7、3.“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是() A.除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶 B.通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导 C.杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁 D.愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程,C,4.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下

8、列问题： (1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有_。 (2)过程常用的酶是_，细胞融合完成的标志是_ _。,细胞膜的流动性、植物细胞的全能性,纤维素酶和果胶酶,再生出新的,细胞壁,5.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题： (3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂_诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到_种不同的原生质体(只考虑细胞两两融合的情况)，当观察到_时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融

9、合而成的。,3,融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光,聚乙二醇(或PEG),5.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题： (4)过程和过程依次为_，过程中的培养基常添加的植物激素是_。 (5)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄马铃薯”细胞在有丝分裂后期含_条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_植株。,生长素和细胞分裂素,2(mn),脱分化和再分化,

10、单倍体,1.动物细胞培养 (1)动物细胞的培养过程,知识梳理,胰蛋白酶,原代培养,胰蛋白酶,(2)培养条件 无菌、无毒的环境：对_和所有培养用具进行无菌处理，添加_，定期更换培养液以清除_。 营养：除正常的有机和无机营养外，需加入_等一些天然成分。 适宜的温度和pH：温度为 _(哺乳动物)，pH为_。 气体环境：含95%空气加_的混合气体，其中后者的作用是_。 (3)应用：生物制品的生产、检测_、医学研究。,36.50.5,培养液,抗生素,代谢产物,血清、血浆,7.27.4,维持培养液的pH,5%CO2,有毒物质,2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 (1)动物体细胞核移植技术的过程 (2)原理

11、：_。 (3)结果：_。 (4)应用：加速家畜_进程，促进优良畜群繁育；保护_；生产医用蛋白；作为异种移植的_；用于组织器官的_。,动物体细胞核具有全能性,产生新个体,遗传改良,濒危物种,供体,移植,细胞培养,去核,重组细胞,供体,1.判断下列说法的正误 (1)连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型() (2)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理() (3)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸() (4)与“多利”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和核移植(),已发生癌变，不具备正常二倍体核型,诊断与思考,(5)植物原生质体融合和动物细胞融合原理是

12、相同的(),动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较,归纳总结,题组一动物细胞培养与动物体细胞核移植的过程分析,1.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的 肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙述正确的是() A.制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块 B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 C.为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素 D.本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小,D,抗生素是用来杀菌的，不是杀病毒的,对照为：用添加药物的培养液分别培养甲、乙细胞，统计变异细胞占培养细胞的比例,2.如图所

13、示为哺乳动物生殖的过程。其中b为卵细胞，c为体细胞。下列叙述 不正确的是() A.形成动物的过程分别属于有性生殖和无性生殖 B.产生动物的过程中可发生基因突变、基因重组等 C.动物的产生表明动物细胞的细胞核具有全能性 D.a、b、c细胞的形成过程，仅c细胞为有丝分裂,通过受精作用形成，属有性生殖，动物通过细胞核 移植技术形成，属无性生殖,a、b细胞分别由精原细胞和卵原细胞通过减数分裂形成， c细胞是体细胞，通过有丝分裂形成,无基因重组,B,1.动物细胞融合 (1)原理：_。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、_、电激等。 (3)意义：突破了_的局限，使_成为可能，也为制造_开辟了新途径。 2

14、.单克隆抗体 (1)制备过程 (2)优点：特异性强、_，可大量制备。 (3)用途：作为_；用于治疗疾病和_。,单克隆抗体,细胞膜的流动性,灭活的病毒,有性杂交方法,远缘杂交,灵敏度高,诊断试剂,运载药物,知识梳理,杂交瘤细胞,产生特定抗体,1.判断下列说法的正误 (1)可以用灭活的病毒促进动物细胞融合，而不能促进植物细胞融合() (2)小鼠骨髓瘤细胞的染色体数为40，B淋巴细胞的染色体数为46，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86() (3)杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎() (4)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体() (5)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细

15、胞融合后有三种细胞类型(若仅考虑两两融合的情况)(),诊断与思考,杂交瘤细胞染色体数为86,制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的,归纳总结,返回,题组单克隆抗体的制备过程分析 1.关于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是() A.表示已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的 B.促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导 C.中的筛选是通过抗原抗体反应进行的 D.可以无限增殖,A,融合细胞具有双亲的特点，既能无限增殖又能产生单一抗体,也可从血浆中提取,还可以用物理方法离心、振动、电激，生物方法灭活的病毒等,如果有反应说明产生了抗体,从小鼠骨髓中提取的,2.单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示： (1)过程常用的方法是_。 (2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生_免疫。从小鼠体内分离的细胞是_，细胞应具有的特点是_。,显微注射技术,体液,B淋巴细胞(浆细胞