药物分析 第二章鉴别

1、1,第二章 药物的鉴别试验,一. 概述 二. 鉴别试验的项目 三. 鉴别方法 四. 鉴别试验的条件,第二章 药物的鉴别试验,1.定义：药物的鉴别试验: 依据药物的分子结构和理化性质,采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物及其制剂的真伪.,一. 概述,2.鉴别试验对象：化学结构已知的药物，即证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物。,一. 概述,3.鉴别试验的意义：是药品质量检验工作中的首项任务，只有在药物鉴别无误的前提下，进行杂质检查和含量测定.,一. 概述,性状 一般鉴别试验 专属鉴别试验,二. 鉴别试验的项目,1.外观 2.溶解度 3.物理常数 （1）熔点 （2）比旋度 （3）吸

2、收系数,二. 鉴别试验的项目-性状,熔点、馏程、相对密度、凝点、比旋度、折光率、黏度和吸收系数等。,用黑体字列出小标题，构成法定标准，测定方法均收载于药典“附录”中。,(一) 性状-物理常数,由固体熔化成液体的温度; 熔融同时分解的温度; 熔化时自初熔至全熔一段温度。,1）熔点,第一法：测定易粉碎的固体药品 第二法：测定不易粉碎的固体药品 第三法：测定凡士林或其他类似物质,测定方法：,初熔,全熔,比旋度 反映手性药物特性及其纯度的重要指标，可用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。,比旋度在一定波长与温度下，偏振光透过1dm， 物质1g/1ml的溶液时测得的旋光度，成为比旋度。,（2）比旋度,

3、固体样品,液体样品,为测定的旋光度 l 为旋光管的长度，dm c为100ml中所含供试品的重量 d为相对密度,注意：溶剂、浓度等 对比旋度的影响,葡萄糖的旋光度 取本品约10g，精密称定，置100ml量瓶中，加水适量与氨试0.2ml，溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min ,在25依法测定，比旋度应为+52.5 +53.0,已知称取药物10.0073g，旋光管长2dm，测定的旋光度为9.730，该药物的比旋度是否合格？,【性状】本品为白色针状结晶或结晶 性粉末；无臭，味微苦。 本品在沸水中略溶，在水和乙醇中极微溶解，在氯仿和乙醚中几乎不溶；在氨溶液中易溶。 熔点 本品的熔点（附录VI C

4、）为256 261，熔融时同时分解。,1.一般鉴别试验: 依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。 区别不同类别的药物，而不能证实是哪一种药物。,二. 鉴别试验的项目 （二）一般鉴别试验,2.中国药典附录一般鉴别试验的项目： 有机氟化物 无机酸盐 有机酸盐 无机金属盐类 芳香第一胺类,二. 鉴别试验的项目 （二）一般鉴别试验,专属鉴别试验:是证实某一种药物的依据，根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选择某些特有的灵敏的定性反映，来鉴别药物。 是在一般鉴别试验的基础上,区别同类药物的各个单体.,二. 鉴别试验的项目 （三）专属鉴别试验,苯巴比

5、妥,巴比妥,司可巴比妥,专属性强 重现性好 灵敏度高 简便快速,鉴别方法要求,三. 鉴别方法,化学鉴别法,色谱鉴别法,光谱鉴别法,生物学鉴别法,三. 鉴别方法,X射线粉末衍射法,将供试品直接加热或加适当试剂在规定的温度下进行实验,观测此时所发生的特异现象.,1.干 法,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,铂丝用盐酸湿润后,蘸取供试品,在无色火焰中燃烧,使火焰显出特殊的颜色。,例1 钠的焰色实验,例2 含碘有机药物 直火加热可生成紫色碘蒸气,将供试品和试剂在适当的溶剂中,于一定条件下进行反应,发生易于观测的化学变化.,2. 湿法,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,(1)呈色反应鉴别法,(2)沉淀生

6、成反应鉴别法,(3)荧光反应鉴别法,(5)使试剂褪色鉴别法,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,(6)测定生成物的熔点,(4)气体生成鉴别法,三氯化铁呈色反应,对乙酰氨基酚,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,(1)呈色反应鉴别法,(2)沉淀生成反应鉴别法, 与金属离子的沉淀反应, 与碘化铋钾的沉淀反应, 其它沉淀反应,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,(3)气体生成反应鉴别法,大多数伯胺（铵）类药物、酰脲类以及某些酰胺类药物,可经强碱处理后加热产生氨气.,巴比妥类药物,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,三. 鉴别方法-（一）化学鉴别法,(4)荧光反应鉴别法,紫外光谱鉴别法 专属性不强 ultra

7、violet spectrophotometry max,min -A -吸收系数 A 1/ A 2 化学处理后测定产物的光谱特征,三. 鉴别方法-（二）光谱鉴别法,三. 鉴别方法-（二）光谱鉴别法,2 红外光谱法 Infrared spectrophotometry,Ch.P采用标准图谱对照法 BP 采用标准图谱对照法、对照品法 USP 采用对照品法 JP 规定条件下测定一定波长处特征吸收峰.,(1)试验制备方法 压片法 最常用 糊法 膜法 溶液法,(2)注意事项,固体样品应按备注的方法进行预处理后再录制光谱 盐酸盐一般采用氯化钾基质；如果不与溴化钾发生离子交换，则采用溴化钾作基质。 测定时

8、注意二氧化碳及水汽等大气的干扰，可采用干燥氮气吹扫。,(2)注意事项,仪器在录制样品的光谱前，应录制聚苯乙烯薄膜的光谱图，与光谱集中聚苯乙烯薄膜的光谱图的比较，以便正确的判断 本法对多组分或多晶现象的药物不适用。 制剂鉴别 制剂提取分离后鉴别,制剂的红外鉴别 品种项下应明确规定供试品的前处理方法 辅料无干扰，与原料药的标准图谱对照 辅料有干扰，在指纹区可规定35个待测 成分的特征吸收峰，实测谱带与规定的波 数的误差应小于0.5%。,三. 鉴别方法-（二）光谱鉴别法,3 近红外光谱法 4.原子吸收法 5.核磁共振法,X射线可产生衍射,即绕过障碍物边缘向前传播. 化合物的晶体无论是单晶或多晶,都有

9、其特定的X射线粉末衍射图.,三. 鉴别方法-（三）X射线粉末衍射法,衍射角 相对强度 面间距,三. 鉴别方法-（四）色谱鉴别法,色谱鉴别法:是利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验。,适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别,具有分离、分析同时进行的特点.,（四）色谱鉴别法 一般在检查或含量测定项下已采用色谱法的情况下采用此法鉴别。,TLC法 采用对照品（或标准品）比较法 HPLC法 利用比较对照品的保留时间 质谱法 m/z,TLC法 （thin-layer chromatography）,采用与同浓度的对照品溶液，在同一块薄层板上点样、展开与检视

10、，供试品溶液所显主斑点的颜色 （或荧光）与位置（Rf）应与对照品溶液的主斑点一致，而且主斑点的大小与颜色的深浅也应大致相同。,（2）采用供试品溶液与对照品溶液等体积混合，应显示单一、紧密的斑点 （3）选用与供试品化学结构相似的药物对照品溶液与供试品溶液的主斑点比较，两者值应不同。 （4）将（3）项下两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的斑点。,斑点的灵敏度、比移值（Rf）和分离效能： 比移值（Rf）=从基线至展开斑点中心的距离/从基线至展开剂前沿的距离。 分离效能： 在对照品与化学结构相似药物对照品溶液制成混合溶液的色谱图中，应显示两个清晰分离的斑点。,薄层色谱法的系统适应性试验,在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。 目的 消除试剂和器皿可能带来的影响,空白试验,4.质谱鉴别法（MS）,三. 鉴别方法-（四）色谱鉴别法,质谱是物质的固有特性，不同的物质除一些异构体外，均有不同的质谱。,利用微生物或实验动物进行鉴别方法。,三. 鉴别方法-（五）生物学鉴别法, 化学法和仪器法相结合,每种药品一般选用24种方法进行鉴别试验,相互取长补短, 方法要有一定的专属性、灵敏性、且便于推广, 尽可能采用药典中收载的方法,鉴别法选用的基本原则,四. 鉴别试验的条件,影响鉴别反应的因素: