药物第十九章中药制剂分析

1、,第十九章,第十九章 中药及其制剂分析概论,紫外分光光度法测定片剂含量：精密称取片剂10片，重量为3.5622g，研细。取上述片粉适量，精密称定重量为：0.0433g，置250ml量瓶中，加规定剂量使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml容量瓶中，加规定溶剂稀释至刻度，摇匀，在257nm处测定溶液的吸光度为0.485. 已知：药物吸收系数（E1cm)为715，片剂标示量为每片0.30g),以中医药理论为指导，运用现代分析理论和方法，研究中药材和饮片、提取物和中药制剂质量的一门应用学科。,与化学药物比较，难度较大，问题较多，更具挑战性 （一）成分复杂，干扰性较大，供试品

2、（溶液）制备困难，多需复杂的预处理。 （二）杂质及有害物质易混入，纯度检查工作量较大。,（三）被检成分多样且含量较低，多采用现代分析技术，如各种色谱法和光谱法。 （四）目前尚有相当多的制剂有效成分（指标性成分）不明确，缺乏客观的内在质量标准，需积极开展药检科研工作，全面提高中成药检验工作水平，故更具挑战性。,中国药典2010年版中药 标准增修订内容介绍,建立符合中医药特色、评价中药质量的完整体系，是中药现代化发展的关键,2010版中国药典一部药典编排格式,凡例 正文 附录,2010版药典标准正文内容药材和饮片,名称 来源 饮片 【性状】 【炮制】 【鉴别】 - - - - - - 【检查】 【

3、性味与归经】 【浸出物】 【功能与主治】 【含量测定】 【用法与用量 】 【贮藏】,2010版药典标准正文内容中成药,药品名称 【处方】 【制法】 【性状】 【鉴别】 【检查】 【含量测定】 【功能与主治】 【用法与用量 】 【规格】 【贮藏】,1.品种大幅增加2010版药典一部品种和项目收载总体情况,2、首次明确了中成药处方入药者均为“饮片”，解决了长期以来配方和投料究竟是使用药材还是使饮片的问题。,饮片系指药材经过炮制后可直接用于中医临床或制剂生产使用的处方药品,3、中药质量标准更符合中药特色,（1）专属性鉴别：建立、完善薄层色谱 鉴别,（2）专属性检测： 根据中药具有多组分、多靶点、相互

4、协同作用的特点，尤其是中药复方制剂更是如此，建立多成分、多组份的含量测定方法控制和评价中药的质量。 2010版药典成方制剂中测定二种以上药味含量的有159个品种， 测定二种以上成分总量或含量的达到258个品种。,（3）指纹图谱、特征图谱的应用 采用了先进的指纹图谱和特征图谱检测技术，更好的控制中药整体质量的变化和均一程度，较全面的控制中药质量的稳定性和有效性。,结合专属性鉴别和多指标成分定量分析，是全面控制中药质量的可行模式，符合中医理论的整体观。,6、金雀异黄素 S、5-甲基蜂蜜曲菌素,乌灵胶囊样品色谱图,4、新方法、新技术应用,（1）聚合酶链式反应法鉴别 饮片：乌梢蛇、蕲蛇 （2）薄层-生

5、物自显影技术法鉴别 地黄、熟地黄（检测成分：毛蕊花糖苷；显色剂：0.1%2，2-2苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液）,（3）液相色谱-质谱联用限量及定量技术,千里光 国际上因其有肝肾毒性和胚胎毒性等而禁用。 国内多种中成药中含有千里光，致使出口骤停。 中国产千里光药材中adonifoline（吡咯里西啶生物碱）含量相对较低或几乎没有 该化合物结构上无生色团，常规方法无法测定,5. 中药安全性评价更受重视,在标准中大幅度增加或完善安全性检查项目，进一步加强对重金属及有害元素、有害成分、树脂残留等的控制，加强了有害物质的检测，使标准的安全性控制加强。,重金属检测标准的研究 大孔吸附树脂有机残留物检测标

6、准的研究 毒性成分的限量控制 雄黄、朱砂中有害成分的控制,强化中药注射剂的安全性控制 一部附录新增了异常毒性检查法、溶血与凝聚检查法、降压物质检查法、过敏反应检查法以及渗透压摩尔浓度测定法等5个附录方法，提高对中药注射剂品种的安全性控制技术要求,如：注射用灯盏花素 相关物质、注射剂有关物质、异常毒性、降压物质、过敏反应、溶血与凝聚检查 增补本将对中药注射剂剂中的铅、镉、汞、砷、铜分别进行了的限定，改变过去仅仅笼统地测定重金属总量的质量控制方式,有毒成分（也是有效成分）含量测定均制定了含量上下限度。 处方中含化学药的品种均建立化学药成分的含量测定并制定含量限度范围。,如：维银翘片 测定处方中的化

7、学药维生素、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏，均按标示量计,（一）中药及其制剂的生产和使用有中医理论的指导,第一节 概述,一、中药的特色与分析特点和对策,中药是以中医药学理论体系的术语表达其性味、功效和使用规律，并且按中医药学理论指导其临床应用的传统药物。 整体观是中医理论体系中的重要概念,中药药效的发挥是多种成分协同作用的结果，因此应从整体（物质群）上来控制中药的质量。,分析对策： 1.运用整体理论对中药进行化学成分的定性轮廓分析。,指纹图谱,注射用双黄连指纹图谱,2. 运用“君臣佐使”理论对制剂中君药及贵重药的主要成分进行分析。 首选君药、贵重药和毒剧药建立分析方法。 例：补脾益肠丸（18味药

8、）的含量测定： 白芍（芍药苷）、补骨脂（补骨脂素、异补骨脂素）,3 . 运用中药药性理论，针对中药药性的化学表征发展科学的分析方法,例： 生物热动力学法定性、定量表示寒、热、温、凉,（二）中药及其制剂的质量有多环节多因素的影响 产地、生长环境、采收季节、加工炮制、生产工艺、包装运输、储藏等因素,对策： 健全科学的中药质量分析体系，对每个环节进行全面质量 控制,例：板蓝根、复方丹参片等质量标准,（三）中药及其制剂成份有复杂多变的特点。 1.单一植物中含多类不同结构的多种成分,人参皂苷,不能仅以某一成分或某类成分进行分析 对策：指纹图谱,2. 不同来源中药的同一待测成分含量差异显著 来源、产地、采

9、收期、生长年限与不同部位 对策：取样的科学性,3. 中药在煎煮炮制和制剂过程中化学成分有量和质的变化 在确定目标成分及分析方法时要充分考虑。,（四）中药不同工艺和不同制剂中同一成分的质量标准有不同要求,针对性制定质量标准,二、中药及其制剂的分类与质量分析要点,中药材和饮片、 植物油脂和提取物、 成方制剂与单味制剂,（一）中药材和饮片 化学显色反应、沉淀反应、光谱鉴别不适于中药鉴别。 含量测定提倡推广指纹图谱、特征图谱,（二）植物油脂和提取物 含量达90%以上的单一有效成分,（三）中药成方与单方制剂,1、丸剂 指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水

10、蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等。,检查项目,水分、重量差异 装量差异(按一次剂量分装的) 溶散时限、微生物限度,水分规定,大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸 15.0% 水蜜丸、浓缩水蜜丸 12.0% 水丸、糊丸、浓缩水丸 9.0%,装量差异,高 低,6丸，照崩解时限检查法,2、散剂 一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服和外用散剂。,取供试品适量置光滑纸上，平铺 约5cm2，将其表面压平，在亮处 观察，应呈现均匀的色泽，无花 纹、色斑。,3、颗粒剂 药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂。,粒度,pH 装量 相对密度 微生物限度,一般检查项目

11、,4、 合剂与口服液 合剂系指药材用水或其他溶剂，采用适宜方法提取，经浓缩制成的内服液体制剂，单剂量合剂也可称为“口服液”。,5、其他中药制剂,酒剂、酊剂、煎膏剂、贴膏剂 片剂、胶囊、注射剂,酒剂与酊剂,酒剂,酊剂,药材用蒸馏酒提取制成的澄清液 体制剂,药物用规定浓度的乙醇提取或溶 解而制成的澄清液体制剂,注射剂,药材经提取、纯化后制成的供注入体内的溶液、乳状液及供临用前配置成溶液的粉末或浓溶液的无菌制剂。 在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。,中药制剂分析的一般程序,取样,鉴别,含量测定,检查,提取,纯化,样品制备,（一）取样与样品保存

12、取样原则：代表性（均匀、合理） 取样方法： 中药材取样法 中药制剂取样法,三、 中药分析用样品制备方法,中药材取样法： 1.取样前的检查 2.从同批药材包件中抽取供检验用样品的原则 不足件的，逐件取样 599，取5件 100-1000件的，按5 取样 超过1000件的，超过部分按1取样 贵重药材不论件数多少，均逐件取样,3.取样方法和取样量 一般包件的取样量一般生药100-500克 粉末状生药25-50克 贵重生药5-10克 “四分法”再取样 一般所得样品不得少于做一次全面检查用量的倍,中药制剂取样法 1、粉末状中药制剂 100g 2、液体制剂 200ml 3、固体中成药 片剂 200片、10

13、0g、 丸剂 10丸、 胶囊 20个 4、注射剂 取样两次；取200支,（二）中药分析用样品的制备,（1）样品的提取 1. 超声提取法 利用超声波的助溶作用进行提取,简便，省时，提取率高,冷浸法 样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方法。,亲脂性, 亲水性,石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水,样品置有机溶剂中加热回流的提取方法。,3. 连续回流提取法 样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法。,4.萃取法 利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法,正丁醇 用于皂苷类,醋酸乙酯 用于黄酮类,氯

14、仿 用于生物碱类,乙醚、石油醚 用于挥发油,萃取溶剂的选择,水相pH的选择,酸性成分 比其pKa低12个pH单位,碱性成分 比其pKa高12个pH单位,仪器和提取次数,酒剂和酊剂先挥去乙醇,防止和消除乳化,分液漏斗,鉴别1次,含量测定 3 4次,5.水蒸气蒸馏法 适用于具有挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定。,麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油等,超临界：当压力和温度超过气体的临界点时所形成的单一相态。,超临界流体：是一种处于超临界点之上的流体，是介于气体与液体之间的一种物相，兼有气体与液体的一些特性。 如CO2：31，7390 kpa,6.超临界流体萃取法（SFE法）,超临界流体萃取与化学法萃取

15、相比有以下突出的优点： （1） 它具有与液体相似的密度，因而具有与液体相似的较强的溶解能力； （2）溶质在流体中的扩散系数与气体相似，具有传质快，提取时间短的优点；,（3）超临界流体的表面张力为零，易渗透到样品中，带走测定组分； （4）超临界流体在通常状态下为气体，萃取后溶剂可立即变成气体而逸出，易达到浓集的目的；,（5） CO2是一种不活泼的气体, 萃取过程不发生化学反应,且属于不燃性气体，无味、无臭、无毒，故安全性好； （6） CO2价格便宜，纯度高，容易取得，且在生产过程中循环使用，从而降低成本； （7） CO2对极性组分的溶解性较差。可加入适量的有机溶剂作为改性剂，如甲醇、氯仿。,（2

16、）样品的分离和纯化,柱色谱法（固相萃取法） （1）保留测定组分在柱上，洗去杂 质，再用适当溶剂洗下组分,（2）保留杂质于柱上。 步骤：上样-淋洗-洗脱,固相萃取柱和固相萃取仪,性状鉴别 显微鉴别 理化鉴别,中药制剂的鉴别包括：,第二节：中药的鉴别,中药及其制剂的鉴别药味的选取原则 单味制剂 中药复方制剂 选择尽量多的药味进行鉴别(超过1/3),一、 性状鉴别,性状鉴别的内容 颜色 形状 气、味 表面特征 质地方面 其他,2 显微鉴别,显微鉴别是利用显微镜直接观察药材（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别。,注意： 处方中的主要药味及化学

17、成分不清楚或尚无化学鉴别方法的药味，应做显微鉴别。 处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为定性的鉴别方法。,六味地黄丸粉末显微特征图,三、 理化鉴别,理化鉴别：用物理的、化学的或物理化学的方法对制剂中所含化学成分进行定性鉴别 微量升华法 一般化学反应法 色谱法,升华法 鉴定具有升华性质的化学成分 （如冰片，大黄蒽醌类等） 观察升华物的形状、颜色、荧光等,化学鉴别反应,（1）矿物药的鉴别：朱砂 （2）含莨菪碱的颠茄草、华山参等的鉴别,TLC法应用最多 （Rf、颜色、荧光）,GC法 适用于含挥发性成分 的药物,HPLC法常与含量测定同时进行,阴、阳对照法,阳性对照 将要鉴别的药材按制剂 工艺处理

18、，再按鉴别方 法提取的溶液,阴性对照 把制剂中要鉴别的药材 除去，用剩下的各味药 按制剂工艺处理，再按 鉴别方法提取的溶液,OO O O O O O O O O O 阴 样 阳 对 品 对,例,第三节 中药的检查项目与内容,安全性、有效性、均一性与纯度,（一）杂质检查法 检查对象： 来源与规定相同，但性状与部位与规定不符。 来源与规定不同的有机杂质与无机杂质，如：沙石、泥块、尘土等。,烘干法（不含或少含挥发性成分） 甲苯法 （含挥发性成分） 减压干燥法（含挥发性成分贵重药） GC法,1. 烘干法,水分测定法,本法适用于不含或含少量挥发性成分的药品。,测定方法: 取供试品25g，平铺于干燥至恒重

19、的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松样品不超过1Omm，精密称定，打开瓶盖在100105干燥5h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30min，精密称定重量，再在上述温度干燥1 h，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量。计算供试品中含有水分的百分数。,2. 甲苯法,水分测定法,本法适用于含挥发性成分的药材 。,仪器装置: A：500ml短颈圆底烧瓶 B：水分测定管 C：直形冷凝管，外管长40cm。 使用前，全部仪器应清洁，并置烘箱中烘干。,测定方法,水分测定法,3. 减压干燥法,水分测定法,范围：含有挥发性成分的贵重药品,4. 气相色谱法,水分测定法,范围：各类型中药

20、制剂中微量水分的精密测定,测定方法： 色谱条件与系统适用性试验：用直径为0.250.18mm 的二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球为载体，柱温为140150，热导检测器检测。注入无水乙醇，照气相色谱法测定。,图4-2 水峰中应扣除的含水量（阴影部分） A.无水乙醇色谱图B.标准溶液色谱图C.供试品溶液色谱图 1.水峰 2.乙醇峰,水分测定法,测定方法： 应符合下列条件要求： 1.用水峰计算的理论塔板数应大于3000，用乙醇峰计算的理论塔板数应大于200。 2.水和乙醇两峰的分离度应大于2 3.将无水乙醇进样5次，水峰面积的相对标准偏差不得大于2.0,水分测定法,测定方法： 标准溶液的制备：取纯

21、化水约0.2g，置25mL量瓶中，精密称定，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备：取供试品适量（含水量约0.2g），粉碎或研细，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入无水乙醇50mL,混匀，超声处理20min，放置12h，再超声处理20min，离心，取上清液，即得。,测定法： 取无水乙醇、标准溶液及供试品溶液各5uL,注入GC，计算，即得,注意事项,水分测定法,1.供试品一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片（破碎时不得使用高速粉碎机）。直径和长度在3mm以下者可不破碎。如使用减压干燥法需先经二号筛。 2.甲苯法中为减少因甲苯与微量水混溶引起水分测定结果偏低，在测定前甲苯需先加少量

22、水，充分振摇达饱和后放置，将水层分离弃去，经蒸馏后方可使用。 3.进行减压干燥时，不可骤然大幅度减压。,4.GC法注意： 对照品溶液和供试品溶液的配制需用新开启的同一瓶无水乙醇 无水乙醇含水量约3，标准溶液与供试品溶液的配置需用同一批号试剂。无水乙醇中的含水量应扣除。含水量的计算采用外标法。,含水量扣除方法： 标准溶液中水峰面积标准溶液中总水峰面积 K标准溶液中乙醇峰面积 供试品中水峰面积供试品中水峰面积 K供 试品中乙醇峰面积 K无水乙醇中水峰面积/无水乙醇中乙醇峰面积,图4-2 水峰中应扣除的含水量（阴影部分） A.无水乙醇色谱图B.标准溶液色谱图C.供试品溶液色谱图 1.水峰 2.乙醇峰

23、,记录与计算 1. 记录供试品称定重量和纯化水称定重量。 2.分别记录无水乙醇、对照溶液、供试品溶液中的水和乙醇的峰面积。 3.根据注意事项下的规定，分别计算对照溶液实际加入的水的峰面积和供试品中水的峰面积。,4.供试品中水分含量按下式计算 含水量（%）= 100% 式中Cr为对照品（纯化水）的浓度（g/ml） Ax为供试品中水的峰面积 Ar为对照品（纯化水）的峰面积 Vr为对照品的溶液体积（50.0ml） W为供试品的重量(g),应用实例 麝香保心丸含水量测定 精密称定本品细粉2.505g,照上述操作方法中供试液制备项下，自“置具塞锥形瓶中”起,依法制备供试品溶液50ml。取无水乙醇,对照溶

24、液及供试品溶液,各1l 注入气相色谱仪，绘制相关的色谱图.已知AxAr0.4889,Cr= 0.0082g/ml.求算供试品水分含量(%)并判断其是否符合规定(9.0%),100%=8.0%,含水量(%)=,费休水分测定法,费休水分测定法,中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由此所得灰分为“生理灰分”，即总灰分。,总灰分加盐酸处理，得到不溶于盐酸的灰分，称为酸不溶性灰分。,由于在酸中钙盐等无机物可溶而泥土、砂石等不溶解，酸不溶性灰分的测定更能准确表明其中泥土砂石等杂质的掺杂含量,酸不溶性灰分的测定,总灰分的测定,五、 农药残留量的检查,中药材,中药材中农药残

25、留的来源,人为喷洒,土壤残留,人工栽培,野生药材,常用农药分类,有机氯类：艾氏剂、六六六、氯丹、DDT，甲氧DDT等,有机磷类：三硫磷、氯硫磷、敌敌畏、乐果等,苯氧羧酸类除草剂：2，4D，2，4，5T,氨基甲酸酯类：西维因,二硫代氨基甲酸酯类：福美铁、福美锌等,无机农药：磷化铝等,植物性农药：拟除虫菊酯类等,其他： 溴螨酯等,长期残留,供试品的制备,提取方法,样品类型和农药种类,溶剂系统：乙腈、丙酮、苯、氯仿、二氯甲烷、醋酸乙酯等及其混合物,有机氯类农药,正己烷、乙腈、丙酮,正己烷丙酮；乙腈水,有机磷类农药,极性不同的溶剂,索氏提取,超声振荡提取,残留农药的提取,供试品的制备,样品纯化,液液萃

26、取,样品,固相萃取,二氯甲烷丙酮/水；二氯甲烷甲醇/水；二氯甲烷乙靖/水等,弗罗里硅土、硅胶、氧化铝，活性炭等,有机氯农药,磺化法：利用脂肪、蜡质等杂质与浓硫酸的磺化作用，生成极性很大的物质而与农药进行分离,1-敌敌畏 2-速灭磷 3-久效磷 4-甲拌磷 5-巴胺磷 6-二嗪农 7-乙嘧硫磷 8-甲基嘧啶硫磷 9-甲基对硫磷 10-稻瘟净 11-水胺硫磷 12-氧化喹硫磷 13-稻丰散 14-甲喹硫磷 15-克线磷 16-乙硫磷,十六种有机磷农药的气相色谱图,有机磷农药残留量检查,六、有关杂质的检查 为了提高用药的安全性，药典中规定了一些中药中有关物质的检查方法,银杏酸,土大黄苷,莨菪碱,双黄

27、连 注射液,双酯型 生物碱,可引起多种不良反应,临床出现皮疹、过敏性休克等不良反应,附子中的效毒成分,有关物质检查例证,银杏叶及其提取物、制剂中的主要毒性物质,伪品大黄的特征性成分,中国药典多采用TLC对有关物质进行限量检查 中药注射剂检查pH、蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、砷盐等,七、其他 （1）黄曲霉素测定法（HPLC） （2）乙醇量测定法：GC、蒸馏法 （3）膨胀度测定法 （4）酸败度测定法,第四节 中药及制剂中成分的含量测定和质量整体控制,如何评价中药的质量？,将指纹图谱技术对中药的定性分析和特定目标成分的定量分析有机的结合起来，可实现中药质量的全面有效控制。,一、指标成分选择的原则,1

28、. 首选君药及贵重药、剧毒药建立含量测定方法，其次考虑臣药及其他味药 2. 有毒药物必须建立含量测定项目。 3. 应选择中药中专属性强的有效成或指标成分测定含量。成分类别清楚的，可测某一类总成分的含量,4.检测成分应与中医用药的功能主治相近 5. 测定成分需考虑与生产工艺的关系。 检测成分应归属某单一药味 确无法含量测定的，可测定药物的总固体量。,二、中药及其制剂化学成分 含量测定的主要方法,1. 高效液相色谱法,色谱条件的选择 供试品溶液的制备 测定方法的选择,2. 气相色谱法,测定薄层板上斑点对单色光的吸 收或反射的强度而进行定量的方法,特点 A、分离效果好 B、适用于无法用UV、HPLC

29、 法测定的组分 C、准确度、精密度低于HPLC,（1）薄层色谱条件,分离好 不拖尾,（2）检测方法,吸收测定法 荧光测定法,反射法 透射法,（3）扫描方式,单波长 双波长,线性扫描法 锯齿扫描法,外标法 内标法,（4）散射参数SX,薄层板的散射使,Kubelka-Munk方程,（三）中药及其制剂的多指标成分的含量测定,中药及其制剂中含有众多成分，仅以单一成分作为质量控制的指标不能全面反映药材质量，更不能保证药效。,分析实例万氏牛黄清心丸,处方 牛黄10g 朱砂60g 黄连200g 黄芩120g 栀子120g 郁金80g,分析实例万氏牛黄清心丸,制法以上六味，除牛黄外，朱砂水飞或粉碎成极细粉；其

30、余黄连等四味粉碎成细粉；将牛黄研细，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜100-200g制成大蜜丸，即得。,性状本品为红棕色至棕褐色的大蜜丸；气特异，味甜、微涩、苦。 功能主治清热解毒，镇惊安神。用于热邪内闭，烦躁不安，神昏谵语，小儿高热惊厥。,方药分析 本方来源于明.痘疹世医心法 ，本方为清心开窍剂，主治热邪内陷心包所致窍闭神昏症。 方中牛黄，清心解毒，豁痰开窍为君药；黄连、黄芩、栀子清热泻火，为臣药；朱砂清心，重镇安神，郁金行气开窍共为佐使药，合用以奏透邪泻热，开窍安神之效。,方药分析 牛黄清热解毒药，主含胆酸类成分。 黄连清热燥湿药，主要为小檗碱。 黄芩清热燥湿药，主要为黄酮

31、类。 栀子清热泻火药，主含栀子甙。 朱砂安神药，主含硫化汞（HgS）。 郁金活血去瘀药，主含挥发油。,鉴别,显微鉴别 郁金糊化淀粉团块几乎无色。 栀子种皮石细胞。 黄芩纤维淡黄色，梭形，厚壁，孔沟细。 黄连纤维鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显。 朱砂不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色。,郁金糊化淀粉团块 栀子种皮石细胞 黄芩纤维 黄连纤维 朱砂不规则块状物或颗粒状物，暗红棕色、鲜红色或棕黄色,化学鉴别,1. 朱砂的鉴别 取本品3g，加水适量，研匀，反复洗去悬浮物，可得少量朱红色沉淀，取出，加入盐酸1ml及铜片少量，加热煮沸，铜片由黄色变为银白色。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+

32、H2S NOTES：在酸性条件下，朱砂与铜片发生置换反应析出金属汞，在铜片表面形成银白色汞齐。,2. 人工牛黄的鉴别 取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研匀，加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加热回流30min,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。 胆酸和猪去氧胆酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。,TLC法 CMC-Na，硅胶G 展开剂 醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇 （32:6:1:1） 显色剂 10%磷钼酸乙醇液， 1100C,10min,人工牛黄,供试品,牛黄空白,猪去氧胆酸,胆酸,3. 黄芩的鉴别 供试品溶液的制备：取本品3g，剪碎，

33、加硅藻土0.5g，研匀，加甲醇20ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：黄芩甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。,TLC法 CMC-Na，硅胶G （4%醋酸钠） 展开剂 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 （5:3:1:1） 显色剂 2%三氯化铁乙醇液,使斑点更为集中,-OH与Fe+3络合,黄芩甙,供试品,黄芩空白,4. 栀子的鉴别 供试品溶液的制备：取本品3g，加乙醚15ml，研磨，弃去乙醚。残渣挥干乙醚，加醋酸乙酯30ml，加热回流1hr,放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇3ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备：栀子甙对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。,TLC法 CMC-Na，硅胶G 展开剂 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水 （10 : 7 : 2 : 0.5） 显色剂 10%硫酸乙醇 1050C, 10m