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文档简介
1、C-反应蛋白 (CRP),感染疾病中的临床应用,定义,CRP是一种急性相蛋白,健康人血清中浓度很低,当人体受了微生物等多种因子侵袭后,人体的血清在几小时后很快产生一种急性期反应蛋白,这种蛋白以与肺炎球菌C多糖体超反应。CRP由肝细胞合成,在人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中均可测出。是高度灵敏的炎症指标,3,急性相蛋白,由肝细胞释放到血液中的蛋白质,它的量随着损伤,炎症或各类疾病而作出迅速反应地增加或减少。 是炎症过程中的抑制剂或媒介 某些急性相蛋白已被用于诊断和跟踪疾病或用于肿瘤标志,急性相反应,创伤 感染 介质释放 激素 细胞因子 二十烷类 身体不适 炎症 发热 白细胞趋化性 食欲不好
2、血小板聚集 白细胞增多 水肿 消瘦 免疫抑制 急性相蛋白合成 维生素A1结合蛋白降低 白蛋白降低,致炎因子,C-反应蛋白(CRP)的生成,由肝细胞在IL6、IL2、TNF刺激下合成,炎症局部巨噬细胞也可少量产生。 正常合成率1-10mg/d,急性炎症时每天合成1g。 半衰期19h,不耐热,6530min破坏,沉淀系数615715S,等电点4182。 不能通过胎盘,在体内分布甚广,除血液外,胸水、腹水、心包液、关节液中均可测出。,CRP 的功能,激活补体,增强NK细胞活力,促凝血,IL-1r合成增加,抗肿瘤效应,与LDL结合,清除染色质,抑制组织蛋白酶等,趋向性,阻滞过氧化物释放,血红素凝集增加
3、,抑制血小板聚集,阻滞巨噬细胞活性,对细菌/细胞的调理作用,C-反应蛋白(CRP)特点,CRP升高见于急性和慢性炎症(如伴有细菌感染)、组织损伤(心梗、手术创伤、烧伤、放射线损伤等 )、恶性肿瘤、风湿性疾病等 疾病后4-6h开始升高,36-50h达到高峰 比正常值高1001000倍,升高幅度与感染的程度呈正相关 病变好转时其含量急速下降,1周内可恢复正常(T1/2约19 h),此反应不受放疗、化疗、皮质激素治疗影响 病毒感染没有标志性升高 受影响因素小(年龄,免疫状况,药物等) 时相性+灵敏性,N Engl J Med 1999; 340:448-454.,血清淀粉样蛋白A,结合珠蛋白,纤维蛋
4、白原,转铁蛋白,白蛋白,8,C-反应蛋白与白细胞,常用感染指标WBC、ESR、CRP 比较,2020/7/5,CRP 与超敏CRP,由于检验技术的发展,我们能够准确测定极低浓度的“C反应蛋白(CRP)”,通常把范围在0-8mg/L范围内的“C反应蛋白”称作为“超敏C反应蛋白或高灵敏度CRP(hsCRP)”。一般的“C反应蛋白(CRP)”最低检测限 3mg/L,而“超敏C反应蛋白(hsCRP)”检测则可准确给出从0.15-8.0mg/L定量值。,11,CRP 的稳定性,CRP稳定性: 室温 418 全血1天 3天 血清(浆)1天 7天 6月 溶血液3小时内稳定,全程CRP(hsCRP+常规CRP
5、),特点,全程CRP检测项目,包括:超敏CRP和常规CRP检测,检测线性范围:0.5-200mg/L,一次检测同时出具超敏CRP和常规CRP两个检测结果,增加了CRP的临床运用价值。,常规CRP、hsCRP 、全程CRP的区别,全程CRP检测原理,全程CRP检测使用的是免疫荧光,双抗体夹心法,将血液样本和检测缓冲液充分混匀,缓冲液中荧光标记的抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物。当混合样本加入到检测板的加样孔后,该复合物被固相在检测板上的抗CRP抗体所捕获。荧光信号强度反映了被捕获的CRP数量。 全程CRP默认是以mg/L为单位,全程CRP检测步骤,检查并插入ID芯片确定检测
6、板和ID芯片相匹配 从冰箱中取出检测缓冲液,放置10分钟使其平衡至室温 吸取8.5ul全血(5ul血清,血浆样本或质控品,EDTA抗凝)放入到有检测缓冲液的管子中,充分混匀。膜封口型:用全血取样器刺破封口膜,将样本加入缓冲液中,充分混匀30s-1min 移液器加样:用移液器取75ul样本混合液加入检测板的加样孔中,在室温下反应3分钟 全血加样器加样:将全血取样器倒置过来并将前2滴溶液滴至取样器盖中,并确保加样端无气泡,随后垂直滴加3滴到测试卡的加样孔中。 点击测试,输入编号,将检测板放在飞测免疫荧光分析仪的检测板承载器中,确保检测板方向正确并将其完全推入,仪器开始自动扫描。 测试卡加样反应时间
7、为3min,待屏幕上即可读取结果或直接打印结果或通过LIS系统输出数据。,健康人CRP浓度正常参考范围,(A) Frequency distribution of CRP concentrations in sera from 100 healthy adults. (B) Serum CRP concentration in monthly samples over 10 months in 10 healthy subjects.,Wilkins, J. et al. Clinical Chemistry. 1998;44:1358-1361.,正常情况下,CRP浓度很低 儿童和成人10mg/L 新生儿(16月)2mg/L 成人3mg/L即表示存在潜在心血管炎症。 CRP一定要使用高敏感的检测方法( hsCRP ) 常规CRP : 8160mgL hsCRP: 0.58mg 全程CRP: 0.5200mg = hsCRP +常规CRP 三者检测血中相同的物质,全程CRP浓度的解释,CRP检测的临床意义,监测病情 监控
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