动物微生物和免疫学.ppt

1、制作：蒋教授四川农业大学动物免疫研究室，动物微生物学和免疫学，教育安排，实验场所：动科大楼403教材：兽医微生物学，陆承平主编，第四版(2007 )参考书：1)郭万柱等主编：动物微生物学，四川科学技术出版社2 )崔治中，崔保安主编：兽医免疫学，中国农业出版社第一版(2004) 3 教室教育内容，绪论1第一篇总论9第二篇免疫学知识16第三篇细菌学各论10第四篇病毒学10第五篇真菌学2实验27自修5共计48 27 5=80，绪论，一，微生物概念个体微小，结构简单，多细胞或单细胞没有细胞结构，繁殖快，分布广泛。 9种：细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、放线菌、螺旋体、支原体(霉菌体)、立克次氏体、衣原体、

2、病毒、朊病毒。 二、微生物学的发展历史，(一)形态学时期(17世纪后半19世纪中叶): 荷兰吕文虎克(1676 ) :显微镜。 巴斯德曲颈瓶实验(1861 ) :否定生物自然发生论。吕文虎克微生物开山祖，巴斯德著名曲颈瓶实验，(二)生理学和免疫学期： (18701920 )巴氏消毒法。 发现了厌氧菌。 疫苗的研制(炭疽菌苗，狂犬病疫苗)，(3)现代微生物学时期： (1920至今)用电子显微镜识别微生物的亚细胞结构，发现了病毒。 微生物分离培养鉴定方法酶标记技术、细胞培养技术、单克隆技术； 微生物核酸序列测定，核酸探针技术，PCR技术，基因工程研究，第一章总论，第一章细菌形态结构第二章细菌的增殖

3、第三章细菌生态学第四章消毒，灭菌和动物微生物实验室生物安全第五章细菌感染和病原机制第六章细菌的分类，第一章细菌形态结构，第一节细菌形态第二节细菌的基本结构第三节细菌的特殊结构，第一节细菌的形态，第一节细菌的形态微米单位。 球菌：直径。 杆菌和螺旋菌：纵横比。 二、细菌的基本形态和变化，(一)球菌1、双球菌2、四连球菌3、八连球菌、4、链球菌、鸡血中兽疫链球菌、5、葡萄球菌、(二)杆菌、1、单在菌(大肠菌) 2、链菌(炭疽菌) 3、芽胞菌(破伤风梭菌) 4、梭菌(魏氏梭菌) 5 分支杆菌(结核分支杆菌) 7，棒状杆菌(化脓棒状杆菌) 8，棒状杆菌(空肠弯曲菌)，(三)棒状杆菌，1，棒状杆菌：一些

4、弯曲2，弧菌(霍乱弧菌):一个弯曲，三，细菌的集团形态1、菌落概念：一种细菌在固体培养基上繁殖，形成肉眼可见的细菌群体沉积物。 也被称为“克隆”，根据菌落数量进行细菌的计数，用菌落形成单位(CFU:colony forming unit )表示。 2、菌落特征：菌落大小、菌落形状、边缘形状、表面形状、隆起度、颜色、透明度、粘稠度、血液平板上的溶血情况、细菌繁殖、细菌菌菌落特征、大肠菌粉红色菌落、第三节细菌的基本结构、细胞膜细菌的基本结构细胞质核体细胞内容物、细菌细胞结构图、1、细胞壁、(1) 4095%为肽聚合物，磷壁酸(teichoic acid:TA； 壁磷壁酸wall teichoic

5、acid和脂磷壁酸lipoteichoic acid、外膜蛋白(outermemberprotein:omp )等充满网状结构。 多肽多糖由n乙酰葡萄糖、n乙酰瓜氨酸形成网状结构。 TA是特异的表面抗原。革兰氏阳性菌细胞壁，2，革兰氏阴性菌细胞壁具有分层结构。 外膜是由外膜蛋白(OMP ) (含细孔蛋白、脂蛋白)和脂多糖(LPS )组成的周质间隙(外膜与细胞膜之间的间隙)，有12层肽蛋白和多种蛋白酶、核酸酶。 多肽蛋白占细胞壁干重量的1020%。 LPS由脂质a、核心多糖类、侧链多糖类组成。 脂质a是内毒素的主要毒性成分，侧链多糖是菌体o抗原。革兰氏阴性菌细胞壁，多肽结构，1，染色工程结晶紫(

6、紫色) 12分钟，革兰氏碘液23分钟，95醇3060秒，稀释苯酚红(红色) 1030秒，镜子检查，g菌染上紫色，结晶紫和g氏碘液的复合体充满了多肽的网状结构。 95%的酒精有收缩多肽糖和溶解脂质的作用，收缩多肽糖使网格缩小，溶解脂质使网格扩大。 g菌多为肽聚糖(4060% )，脂质少，因此网眼缩小的力大于网眼扩大的力，最终网眼缩小，牢固地粘着紫色复合体，不溶出。 稀释酚不染成红色，所以呈紫色。 当革兰氏阳性菌、g菌染成红色、g菌肽多糖少、脂质多的95%醇脱色时，使肽聚素收缩网眼的力比溶解脂质使网眼扩大的力小，最终网眼扩大的结晶紫和g氏碘液的复合体无法粘着而脱落革兰氏阴性菌(三)作用于功能，1，

7、定形作用2，保护作用3，选择性屏障作用4，鞭毛支撑作用5，分裂繁殖，(四)原生质和原生质，g菌经青霉素和溶菌酶处理，完全失去细胞壁，仅由细胞膜包围细胞质的菌体称为原生质G-菌经溶菌酶处理，只能失去细胞壁内层的多肽蛋白，还形成被外膜包围的菌体，称为原生质体。 将两种不同的原生质体或原生质体融合生成细菌的技术称为原生质体融合技术。 二、细胞膜、1、结构：脂质双重结构。 亲水基在外侧，疏水基在内侧。 2、功能：渗透屏障，参与菌体的新陈代谢，参与细菌分裂繁殖。 3、间体：细胞膜向内侧凹陷形成的囊状或管状物。 细胞膜结构示意图，细胞膜结构，三，细胞质，粘稠，透明胶体。 主要成分为水、蛋白质、脂质、多糖类

8、、核酸及少量无机盐。 四、核体和质粒，一、核体：无核膜、核仁、无线状染色体、原核细胞。 细长、共价键、环状双链的大型DNA分子。 一次成一倍体。 与真核细胞的染色体相似，有的把细菌核体称为细菌染色体。 致密，呈球状、卵形、哑铃形，有些稀疏，像网状或海绵状。 2、质粒：细菌核体外的环状双链，小型DNA分子。 虽然与细菌的生命无关，但具有一定量的基因，例如耐性基因。 核体，五，细胞内容物，1，异染粒子：聚偏磷酸盐。 储藏磷酸盐。 2、脂质： -羟基丁酸聚合物或脂肪滴，储存碳源和能量。 3、肝糖和淀粉粒：储藏碳源和能量。 碘染色肝糖呈红褐色，淀粉呈蓝色。 4、空泡和气泡空泡中含有液体，调节细胞渗透压

9、的气泡中含有气体，降低了菌细胞的比重，漂浮在液体表面生长，形成菌环和菌膜。 5、核糖体：由2/3的核糖核酸rRNA和1/3蛋白质组成的小粒样物质，蛋白质合成场所。 细菌rRNA有5S、16S、23S三种，各细菌种16S rRNA保守，常用于细菌鉴定。 由50S和30S的亚基组成，红霉素、链霉素等药物与亚基结合，妨碍蛋白合成，杀菌。 第三节细菌的特殊结构，一、荚膜(capsule )细菌在生活过程中在细胞壁外制造黏液样物质包围整个菌体，称为荚膜。 多种细菌荚膜融合成一个凝胶状，含有多种细菌，这叫做菌凝胶。1、组成：含有90%的水分、多糖类、多肽。 2、形成：用动物体内或营养丰富的培养基原代分离，

10、容易形成荚膜。 3、功能保护功能具有处理碳源和储藏能量的代谢废弃物的抗原性。 4、观察：见难染色的普通染色法、菌体周围的透明环，特殊荚膜染色法，可染色。细菌荚膜、细菌荚膜、二、细菌s层(s-layer )是某些细菌的特殊表层结构，完全包围菌体，由单一蛋白质亚基组成，规则排列，呈类格子结构。 许多病原菌和菌株都有s层。 功能：分子筛、离子通道、类荚膜作用。 三、鞭毛(flagellum )、细菌细胞外的毛状、波状的丝状物。 比菌体细，在光镜下很难看到，用特殊鞭毛染色法，人只有增大其直径才能看到。 1、组成：蛋白质(鞭毛素)、少量糖类、脂质。 2、功能：鞭毛收缩、菌体运动。 3、类型：单鞭毛、单鞭

11、毛、双鞭毛、双鞭毛、周鞭毛。 各种鞭毛、单鞭毛、单鞭毛、单鞭毛、周鞭毛、周鞭毛、微免课件的语音照片显示，语音鞭毛类型. swf，4，菌毛(pilus )位于菌体外，是比鞭毛短且硬的毛状灯丝。 1、化学组成：中空的蛋白质管2，分类：稍长而少(14根)为性菌毛，其馀为普通菌毛。 3、功能吸附功能：吸附在宿主细胞上吸收营养，病原菌失去菌毛就失去致病性。 互相粘合：有利于表面的生长，吸收更多的氧气，在表面形成菌膜。 凝聚动物红血球。 性菌毛作为通道作用于细菌的接合传递。 菌毛、菌毛、性菌毛、五、芽胞(spore )、细菌处于生长发育阶段，细胞质浓缩的一种内生孢子被称为芽胞。 1 .形成旺盛的生长后，培

12、养基中的营养物质消失后就形成。 2 .性质强抵抗力微弱的营养物质(休眠)不易染色。 3、大小、形状、位置的大小：小于菌体的(炭疽)或大于菌体的(纺锤)形状：圆形、卵形或椭圆形的位置：菌体中央、偏端、极端4，出芽：条件适当，出芽形成新的细菌。 芽胞只能产生一个菌体，不是细菌繁殖器官。 非染色芽细胞，染色芽细胞，第二章细菌的增殖，第一节细菌细胞的代谢过程第二节细菌的增殖第三节细菌的人工培养第四节细菌新陈代谢及其产物第五节细菌的生化反应，第一节细菌细胞的代谢过程，第一节物质摄取1，单纯扩散：从高浓度到低浓度，不需要能量。 O2、CO2、H2O、甘油等小分子物质。 2、促进扩散：与膜蛋白暂时合成，促进

13、构象变化，物质向细胞内扩散，不需要能量。 3、自主输送：从低浓度到高浓度泵入细胞内，需要能量。 4、基重排：物质在运输时经化学修饰后被细胞吸收。 二、由生物合成、摄取的物质合成多种氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸及其他高分子所必需的物质。 磺胺剂干扰细菌所需叶酸的合成并进行抗菌。 三、聚合作用、细菌DNA的聚合作用称为复制，新生霉素能抑制和抗菌细菌DNA复制过程中所需的外消旋酶的活性。 RNA转录蛋白的翻译。 四、组装、自我组装方式：鞭毛、核糖体以此方式进行。 指导组装方式：表面膜结构以相互方式进行。 保罗菌肽、万古霉素干扰组装细菌细胞成分所需载体功能的多粘菌影响细胞膜的级装。 第二节细菌的繁殖，(

14、1)缓慢生长：活菌数不增加，略微减少。 (二)对数生长长期：活菌数呈几何级数增加。 (3)稳定期：繁殖的活菌数相当于衰退菌数。 (4)衰退期：活菌大量衰退。 第三节细菌人工培养，第一，培养基基础培养基和营养培养基。 固体、半固体、液体培养基。 鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基。 二、气体：氧气、二氧化碳、厌氧。三、温度：好冷菌： 1020oC好温菌： 2040oC好热菌： 5060oC四，酸碱度：多种病原菌适用于PH7.2-7.6。 第四节细菌的新陈代谢及其产物，第一，细菌呼吸1，概念细菌通过呼吸酶的作用，以氧化还原方式将营养物质还原得到能量，形成中间产物的过程。 2、细菌呼吸类型，(1)厌

15、氧呼吸：脱氢酶从基质中脱氢，通过辅酶传递给氧以外的物质。 (2)好氧呼吸：脱氢酶从基质中脱水，通过辅酶传递至氧化酶活性化的氧，形成水。 (3)兼性厌氧呼吸：有脱氢酶和氧化酶，在有氧的环境下进行好氧呼吸，在无氧环境下进行厌氧呼吸。 好氧呼吸与厌氧呼吸比较，二是细菌营养类型，一是光能自营养菌：以光能为能量，由无机碳合成有机碳。 2、化学能自培养菌：由氧化无机物产生的能量，由无机碳合成有机碳。 3、异养菌：从有机碳中获得碳源。 腐生型和寄生型细菌是这一类。三、细菌代谢和产物，一、细菌分解代谢产物碳水化合物：有机酸，CO2气蛋白质：靛蓝基质，H2S、NH3、H2、CO2、酸类，胺脂肪：脂肪酸、甘油、二

16、、细菌合成代谢产物，(一)色素：水溶性和脂溶性(二)毒素：产生并分泌到菌细胞外毒性强，没有耐热性。 内毒素：产生后，残留在菌体内。 毒性弱，耐热。 (3)抗生素(4)维生素(5)芳香物质，第5节细菌的生化反应，1，氧化酶实验：是否产生氧化酶。 阳性是紫色。 2 .接触酶实验：是否产生过氧化氢酶。 出现气泡，不阳性。 3、糖发酵实验：是否分解某糖产酸产气剂。 4、VP实验：分解葡萄糖产生二乙酰，红色为阳性。 5、MR实验：分解葡萄糖使PH值在4.5以下，红色为阳性。 6、柠檬酸盐利用实验：以柠檬酸盐作为唯一的碳源生长。 淡绿变成深蓝者为阳性。 7、吲哚实验：分解色氨酸产生吲哚，红色者为阳性。 8

17、、硫化氢实验：分解含硫氨基酸，产生H2S，变黑呈阳性。 9、尿素酶实验：产生尿素酶，分解尿素产生氨，红色者阳性。 第三章细菌生态学，第一节水中微生物第二节土壤中微生物第三节空气中微生物第四节正常动物体微生物，第一节水中微生物，第一，水中微生物分布污水池微生物最多，静水池、流水次，井水和泉水少(土层过滤)，自来水少(浮游白粉消毒)第二，水中病原微生物与患病动物的排泄物、分泌物、病死动物的尸体一起在水中水有自洗作用：微生物拮抗； 日光、紫外线、雨水变淡。 三、水的微生物指标生活饮用水：细菌总数不超过100ml，大肠菌群的最近数量不超过3个100ml。 四、水中微生物检查(一)的取样：天然水源采取1015cm深度的水样自来水放水510分钟后取样的氯处理水中加入1.5%硫代硫酸钠2ml。 (二)细菌总数为1，概念：测定1g或1ml样品中的活细菌数。 2、方法：有限稀释涂布平皿法。 3、结果计算1 )取菌落数在