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文档简介

1、小白鼠碳粒廓清实验,问题： 1.这个实验是一个什么性质的实验？或者说通过这个实验反应哪个方面的功能？,问题1答案： 这个实验反应的是机体的免疫方面的功能，反应的是巨噬细胞的吞噬功能。,问题： 2. 机体免疫功能包括那几个方面？巨噬细胞的吞噬功能属于哪个方面的功能,问题2答案： 机体免疫功能包括体液免疫，细胞免疫和非特异免疫功能？巨噬细胞的吞噬功能属于非特异免疫功能,化学物对免疫系统的影响：,免疫抑制,超敏反应,自身免疫反应,机体的免疫系统包括主要免疫器官或组织，免疫细胞和免疫分子；免疫器官或组织包括中枢免疫器官（骨髓和胸腺）和外周（脾脏和淋巴结） 要反应机体的免疫功能，包括很多方面，比如体液免

2、疫功能，细胞免疫功能，NK和巨噬细胞的吞噬功能等等，因此需要一组实验来说明机体的免疫功能，不能单凭一个实验。,检测的方法也有很多，比如免疫器官的重量和脏器系数；T B淋巴细胞的分型（流式细胞仪）；放射免疫方法等。我们今天做的实验是我们学系老师自创的一种方法：碳粒廓清实验,一 目的要求 学习碳廓清实验的原理与方法 ； 进步练习小鼠的眼眶后静脉丛注射,二 基本原理,一定浓度的碳粒经小鼠眼眶后静脉丛注射进入血液，经血流带到肝，脾等处，而被这些部位的巨噬细胞吞噬清除。 在一定浓度范围内，碳粒的清除速率与其剂量成呈指函数关系，即吞噬速度与血液中碳粒浓度成正比，而与已吞噬的碳粒量成反比。 若以血中碳粒浓度

3、的对数值为纵坐标，时间为横坐标，两者则呈直线关系，其斜率（k）值表示吞噬速度，即未经校正的吞噬指数。这是因为小鼠肝，脾重量不等，故k值不同，所以，一般以校正的吞噬指数表示，反映了每单位组织重量的吞噬活性。计算公式如下： 体重/(肝重+脾重）K1/3,四 操作步骤 小鼠称重 用印度墨汁，按小鼠每10g体重0.1ml计算，经左眼眼眶后静脉丛注入体内，注射完毕，立即计时(注意注射的深度和力度）。 注入墨汁后220分钟内选两个时点（例如2分钟，10分钟，可以自定时间，但两次间隔时间要长一些），用预先肝素处理的毛细管分别从右眼眶静脉丛取血20l，置入盛有3ml NaCO3溶液的试管中，摇匀。用0.5cm比色杯在721分光光度计600nm波长处测光密度（OD），用0.1NaCO3溶液为空白。 处死小鼠，取肝，脾称重（若肝脾皆变黑，说明注射成功）。,五 计算与结果 按下式计算吞噬指数 K=（lgOD1-lgOD2）/ (t2- t1) 为未经校正的吞噬指数。 OD1为t1（例如2分钟）血标本的OD值 OD2为t2（例如10分钟）血标本的OD值 吞噬指数体重/(肝重+脾重）K1/3,六 注意事项 静脉注入碳粒的量，取血时间，取血量一定要准。 墨汁经放置，碳粒沉于瓶底，临用前应摇匀

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