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1、罗氏地高辛(DIG)系统产品选择指南发布日期:2011-02-15来源:上海浩然生物技术有限公司 浏览次数:374罗氏应用科学部是最早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。罗氏专利的地高辛产品上市近二十年,尽管有许多出色的竞争者涉足这一领域,尽管有定量PCR技术的应用,DIG系统仍然是非放射性高效标记&检测技术的首选。 关于非放射性标记技术罗氏应用科学部是最早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。罗氏专利的地高辛产品上市近二十年,尽管有许多出色的竞争者涉足这一领域,尽管有定量PCR技
2、术的应用,DIG系统仍然是非放射性高效标记&检测技术的首选。 地高辛技术优势地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物(毛地黄和毛花毛地黄)中提取的类固醇物质 Digoxigenin (DIG)。由于洋地黄植物的花和叶片Digoxigenin在自然界中的唯一来源,因此抗DIG的抗体不会与其他的生物物质结合,从而可以满足特异性标记的需要。这一点,正是DIG胜于生物素(Biotin)的地方同样是小分子标记物,生物素广泛存在于各种组织中,对于灵敏度很高的标记检测实验来说,样品自身含有的内源生物素,就会对结果产生干扰。地高辛就能够很好地避免这个问题。 地高辛技术特点 可用于标记核苷酸或蛋白质 检测方法:显色
3、法、荧光或化学发光法 安全环保,不接触放射性物质,不会对环境造成污染 曝光时间短,结果显示时间以分钟计算,无需几小时甚至几天的自显影过程 地高辛标记的探针至少可贮存一年以上,可一次大量制备 可轻松进行探针剥离和重探 应用领域地高辛系统能够安全高效地标记DNA、RNA或是寡聚核苷酸探针,这些探针可以被广泛应用在: Southern blot Northern blot dot blot 菌斑杂交 Microarray ELISA 原位杂交 根据标记方法选择探针 标记DNA探针货号货名规格方法说明11745816910DIG-Nick Translation Mix160 l,40次标记反应缺口平
4、移法此方法标记的探针可以控制探针长度,一般多用于原位杂交11745832910DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I12次标记反应,24次杂交检测随机引物法集标记、封闭、杂交和检测于一体的试剂盒(显色法,底物为 NBT/BCIP),应用于Southern、Northern、dot及菌斑杂交11585614910DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit 12次标记反应,24次杂交检测同上述Kit I相似,区别在于化学发光法检测,底物为CSPD115855509
5、10PCR DIGLabeling Mix500ul,50次标记反应(100ul终体积)PCR扩增法此法适用于模板量少或质量不够高的情况,包含dNTPs和DIG-11-dUTP,多用于dot blot 标记RNA探针货号货名规格方法说明11209256910Digoxigenin-11-UTP25 l 250 nmol (10 mM)转录标记法DIG标记的尿嘧啶核苷三磷酸,用于标记RNA0335924791057 l 200 nmol (3.5 mM)11277073910DIG RNA Labeling Mix 1040 l,20次标记反应包含NTPs及DIG-11-UTP111750259
6、10DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)20次标记反应通过SP6 T7 RNA聚合酶将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中,应用于Southern、Northern、原位及菌斑杂交12039672910DIG-Northern Starter Kit10次标记反应,10次杂交检测以线性的DNA为模板,通过SP6 T7或是T3 RNA聚合酶将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中,借助化学发光底物CDP-Star检测,用于Northern杂交 标记寡核苷酸探针货号货名规格方法说明11333054001Digoxigenin-3-O-methylcarbonyl-ami
7、nocaproic acid-N-hydroxysuccinimide ester5 mg5-末端标记法用于蛋白质或寡核苷酸的DIG标记3353583910DIG Oligonucleotide Tailing Kit 2nd generation25次3-末端标记法用于膜杂交或原位杂交3353591910DIG Gel Shift Kit 2nd generation New formulation containing Terminal Transferase recombinant20次标记反应、200次结合反应、20次杂交检测及20次对照反应用于凝胶迁移分析EMSA实验,检测DNA-蛋
8、白质复合物更多产品选择请参考/sis/lad/index.jsp?id=lad_010100 根据实验方法选择产品 Southern blotting货号货名规格方法说明11745832910DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I12次标记反应,24次杂交检测随机引物法集标记、封闭、杂交和检测于一体的试剂盒(显色法,底物为 NBT/BCIP),应用于Southern、Northern、dot及菌斑杂交11585614910DIG-High Prime
9、DNA Labeling and Detection Starter Kit 12次标记反应,24次杂交检测同上述Kit I相似,区别在于化学发光法检测,底物为CSPD11585550910PCR DIGLabeling Mix500ul,50次标记反应(100ul终体积)PCR扩增法此法适用于模板量少或质量不够高的情况,包含dNTPs和DIG-11-dUTP,多用于dot blot3353583910DIG Oligonucleotide Tailing Kit 2nd generation25次3-末端标记法用于膜杂交或原位杂交 Northern blotting货号货名规格方法说明111
10、75025910DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)20次标记反应转录标记法通过SP6 T7 RNA聚合酶将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中,应用于Southern、Northern、原位及菌斑杂交12039672910DIG-Northern Starter Kit10次标记反应,10次杂交检测以线性的DNA为模板,通过SP6 T7或是T3 RNA聚合酶将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中,借助化学发光底物CDP-Star检测,用于Northern杂交3353583910DIG Oligonucleotide Tailing Kit 2nd generat
11、ion25次3-末端标记法用于膜杂交或原位杂交 Colony and plaque hybridization货号货名规格方法说明11585550910PCR DIGLabeling Mix500ul,50次标记反应(100ul终体积)PCR扩增法此法适用于模板量少或质量不够高的情况,包含dNTPs和DIG-11-dUTP,多用于dot blot In situ hybridization货号货名规格方法说明11745816910DIG-Nick Translation Mix160 l,40次标记反应缺口平移法此方法标记的探针可以控制探针长度,一般多用于原位杂交11585550910PCR
12、DIGLabeling Mix500ul,50次标记反应(100ul终体积)PCR扩增法此法适用于模板量少或质量不够高的情况,包含dNTPs和DIG-11-dUTP3353583910DIG Oligonucleotide Tailing Kit 2nd generation25次3-末端标记法用于膜杂交或原位杂交11175025910DIG RNA Labeling Kit (SP6/T7)20次标记反应转录标记法通过SP6 T7 RNA聚合酶将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中,应用于Southern、Northern、原位及菌斑杂交 ELISA货号货名规格方法说明116361209
13、10PCR ELISA DIG-Labeling50次标记反应PCR扩增法用于标记带DIG的PCR产物11636111910PCR ELISA DIG-Detection192次检测反应用于检测DIG标记的PCR产物更多产品选择请参考/sis/lad/index.jsp?id=lad_010300 根据检测方法选择产品 灵敏度更高的化学发光法货号货名规格12041677001CDP-Star,即用2 x 50 ml11755633001CSPD,即用2 x 50 ml12039672910DIG-Northern Starter Kit10次标记反应,10次杂交检测11585614910DIG-High Prime DNA Labeling and Detection StarterKit 12次标记反应,24次杂交检
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