卫生样品的采集与处理ppt课件

1、2020/7/7,.,第二章 样品的采集与处理,第一节 样品的采取和制备 第二节 样品的处理,2020/7/7,.,样品的采集和保存样品的预处理*分析方法的选择及试样的测定分析数据的处理分析报告的撰写,卫生分析工作的第一步：样品的采集,卫生样品分析的一般程序：,影响结果准确度,2020/7/7,.,第一节 样品的采取和保存,总体：分析对象的全体,一、几个基本概念,样品：从总体中抽出部分个体，代表全部待分析物料的平均组成。,采样目的：获得能代表全部待分析总体平均组成的样品。,采样：按一定规则，从总体中抽取分析样品的过程。,2020/7/7,.,二、样品采集的原则,代表性、典型性和适时性,1.代表

2、性,采集的样品必须能充分代表被分析总体的性质,2.典型性,根据检测目的，采集的样品必须能充分说明此目的的典型样品,3.适时性,某些样品的采集要有严格的时间概念,2020/7/7,.,非典时期的支原体与衣原体之争 当广东开始非典流行时，国内权威机构报道非典是由“衣原体”导致的时候，我的第一个反应是怀疑。但基于以下理由觉得迷惑： 一、依据明显缺乏科学性：医学研究绝对不是这样的，仅仅从几个尸解病人的标本中发现衣原体“包涵体”（在细胞浆或细胞核内形成的具有一定形态的病变结构）就仓促下结论是违背科学精神的。 二、治疗效果：如果非典真的是衣原体造成的，那就一点也不可怕了。因为只要正确使用抗菌素，衣原体感染

3、是可以控制的。当时那么多国内甚至国际一流的专家会不考虑到这个？,2020/7/7,.,后来的发展证实了我的看法，相信国内很多医务人员也经历过和我一样的疑惑。 那么，为什么在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵体”呢？这其实是病原学研究时，最基本的需要分辨的，即“宿主”还是“过客”这一最基本的问题。 “宿主”是指病原体是造成疾病的病因；“过客”是指病原体只是在疾病出现后，由于环境的改变，适合它在此繁殖，即上面文章中所说的“继发感染”。 具体到上述的在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵体”的原因是这样：非典病人受到冠状病毒的侵犯后，肺部环境发生了巨大的变化。原来衣原体无法生存的地方变成衣原体生长的“

4、沃土”，从而出现了继发衣原体感染。,2020/7/7,.,三、各类样品的采集方法,（一）空气,大气监测 工作场所空气中有害成分监测 室内空气质量监测 公共场所空气质量监测,样品的采集方法,2020/7/7,.,1. 直接采集法,容器预先抽真空，在现场采集样品；或通过采样泵将气体样品直接引进容器。,2. 浓缩采集法（富集法）,空气样品中待测组分浓度较低时，使用此法。,2020/7/7,.,3. 采样装置,收集器 流量计 采样动力,基本组成,（二）水,见书 p10,2020/7/7,.,（三）食品,2020/7/7,.,小龙虾致肌溶解,肌溶解(rhabdomyolysis)是当肌肉受伤时，肌肉中的

5、一种叫做肌球素(Myoglobin)的蛋白质被释放出来，进入血液循环系统。这种蛋白质在肾脏会被过滤，并可能被分解成有毒物质，危害肾脏，这可能就是为啥我们会看到酱油尿。,2020/7/7,.,造成肌溶解的原因有很多，常见的是酗酒、外伤、癫痫、机体过劳、肌肉缺血性萎缩、遗传原因等等，但某些药物也可能造成这种病，几乎每个地方都提到的是降胆固醇药statins、可卡因、安非他明、海洛因，等等。,2020/7/7,.,龙虾中毒引发的肌肉损伤和肌红蛋白血症有如下可能原因： 1)龙虾被重金属污染， 2)龙虾被某种细菌污染， 3)龙虾中还有某种化学物质能抑制线粒体的功能，具体原因等待卫生部的调查。,2020/

6、7/7,.,（四）生物材料,生物材料：人或动物的体液、排泄物、 分泌物和脏器等,1.血,包 括：全血、血浆和血清,采样部位：手指血、耳垂血和静脉血,保存方法：置于聚四氟乙烯、聚乙烯或 硬质玻璃管中密塞，4下 保存，长期保存在-20。,2020/7/7,.,2.尿,采样仪器：聚乙烯瓶或用硝酸溶液 浸泡过的玻璃瓶,3.毛发,取样方法：枕部距头皮2cm左右的发段,4.组织,取样：肝、肾、肺等脏器，冷冻保存,2020/7/7,.,第二节 样品的处理,一、样品处理的目的和要求,1.样品处理的目的, 使被测组分从复杂样品中分离出来，制成可被测定的形式。, 可通过衍生化使难测定物质转化为易于测定的物质形式,

7、 去除干扰测定的物质, 必要时进行浓缩富集,2020/7/7,.,2.样品处理的要求, 必须使样品分解完全，回收率足够高, 不能引入干扰测定的物质和待测物质, 方法简单易行，速度快,二、样品溶液的制备方法,1.溶解法,2020/7/7,.,2.分解法,2020/7/7,.,三、常用的分离与富集方法,问题的提出,实际样品的复杂性,干扰的消除,控制实验条件,使用掩蔽剂,分离,分析方法灵敏度的局限性,满足对灵敏度的要求,选择灵敏度高的方法,富集,2020/7/7,.,例：,海水中 U （IV） 的测定,C = 1 3 g / L,难以测定,富集为 C = 100 200 g / L,可以测定,分离效

8、果,干扰成分减少至不再干扰,待测组分有效回收,2020/7/7,.,分离效果的好坏用回收率衡量,常量组分，含量 1%，,回收率 99 % 以上,微量组分，含量 0.01 %，,回收率 95 % 或更低,2020/7/7,.,常用分离方法,沉淀与共沉淀分离法,溶剂萃取分离法,固相萃取与微萃取法,色谱分超临界流体萃取法,挥发和蒸馏分离法,膜分离法,2020/7/7,.,（一）溶剂萃取分离法,在含有被分离物质的水溶液中，加入萃取剂和与水不相混溶的有机溶剂，振荡，利用物质在两相中的分配不同的性质，使一些组分进入有机相中，使另一些组分仍留在水相中，从而达到分离的目的。,2020/7/7,.,1. 萃取分

9、离的基本原理,物质,亲水性,疏水性,离子型化合物,极性,共价键化合物,弱极性或非极性,相互转换,萃取分离的实质,将待萃取组分由亲水性转化为疏水性，使其萃入有机相中。,例. 8-羟基喹啉-CHCl3对Al 3+ 的萃取,萃取的反过程（将组分从有机溶液中萃取到水溶液中）。,反萃取,2020/7/7,.,例. 8-羟基喹啉-CHCl3对Al 3+ 的萃取,溶于CHCl3,8-羟基喹啉,CHCl3,萃取剂,溶剂,水合离子的正电性被中和，亲水的水分子被疏水有机大分子取代,2020/7/7,.,(1)分配系数,有机溶剂从水相中萃取溶质A，若A在两相中的存在形态相同，平衡时，在有机相的浓度为Ao, 水相的浓

10、度为Aw之比，用KD表示。,萃取平衡,分配定律,2020/7/7,.,(2)分配比,如果溶质A在两相中存在多种型体，如离解、缔合、络合、聚合等，则把溶质A在两相中各种型体的浓度之和相比，称为分配比D。,溶质在两相中存在形式完全相同时，DKD。 两相体积相等时，若D1，溶质进入有机相的量多。 在实际工作中，一般要求D至少大于10。,2020/7/7,.,（3）萃取率E,萃取效率和分配比的关系是：,式中Vw/Vo称为相比。 萃取率由分配比和相比决定,2020/7/7,.,在实际分离工作中，萃取率E 最有意义。 最常采用-等体积溶剂进行萃取，即相比为1，此时萃取率可写成:,如果 D 值较小而要得到较

11、高的萃取效率，可以采取连续多次萃取。,一次萃取：E 90%以上，D10 E 90%以上，D100,2020/7/7,.,n次萃取后,式中，n 为萃取次数，m 为被萃取物质的总量，mn 为经 n 次萃取后留在水相中被萃取物质的量，Vw 为水相体积，Vo 为每次萃取所用有机溶剂的体积。,2020/7/7,.,例2. 用8-羟基喹啉氯仿溶液，于pH=7.0时从水溶液中萃取La3+，已知它在两相中的分配比D=43。现取含La3+为lmgmL-1的水溶液20.00mL，用20.00mL萃取液，计算一次萃取和分两次萃取（每次10.00mL）的萃取效率。,解:一次萃取,2020/7/7,.,两次萃取,上例结

12、果说明，用同样数量的萃取液，分多次萃取比一次萃取的效率高。,2020/7/7,.,2.重要的萃取体系,根据组分的性质不同，萃取体系分：,用于萃取的有机溶剂称为萃取溶剂,简单分子萃取体系 螯合物萃取体系 离子缔合物萃取体系 溶剂化合物萃取体系,2020/7/7,.,3.萃取条件的选择,萃取溶剂的选择,溶液酸度的选择,其它试剂的选择,4.萃取操作,2020/7/7,.,（二）固相萃取法 Solid phase extraction，SPE,固相萃取： 液-固分离 分离载体： 一般为硅氧基甲烷， 颗粒直径40-80 m 分离原理: 利用样品中被分离组分与萃取柱中固定相的作用力（吸附、分配和离子交换等）不同而进行分离。,固相萃取柱,2020/7/7,.,固相萃取装置： 由柱管、筛板和固定相三部分组成,2020/7/7,.,图 2-3 固相萃取过程,2020/7/7,.,选适宜SPE管,加入样品溶液到载体,洗涤除去共存物,洗脱待分离物质,润湿载体,固相萃取法一般程序为：,固相萃取柱,2020/7/7,.,始于1992年，