一种新的CD4细胞计数方法ppt课件

1、.,1,全新的非流式CD4细胞绝对计数,上海汇中细胞生物科技有限公司,.,2,CD4+T淋巴细胞 HIV病毒靶细胞，免疫系统枢纽,.,3,HIV 感染病程发展,0 3 6 9 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12,周 年,初期病毒感染,CD4 细胞绝对值 (cells/l),临床潜伏期,病毒载量 (copies/ml),AIDS,(机会性感染）,HIV 病毒载量,每年上升0.1 log,.,4,流式细胞仪,.,5,上海汇中细胞生物科技有限公司,.,6,CDC,美国CDC实验室向我们提出：在我们的特异性细胞分离平台上，可否开发出低价、便捷的CD4细胞检测方法 ?,.,7,特

2、异细胞,细胞表面抗原,固 相 载 体 玻 片,抗体,免疫结合反应,.,8,反应原理,普通光学显微镜,CD4抗体,+全血,淋洗,CD4细胞,CD4抗原,其他细胞,CD4细胞,染色,单核细胞,单核细胞,单核细胞,CD4细胞,CD4抗原,特异结合反应,显微镜记数,包被载玻片,细胞化学染色,.,9,CD4细胞检测试剂盒,.,10,单凹表面包被有CD4 单克隆抗体的载玻片,.,12,显微镜下CD4细胞和单核细胞,.,13,临床考核,该方法在上海传染病医院、北京协和医院、北京佑安医院、上海中山医院、美国CDC（疾病预防控制中心）和日本大分大学艾滋病诊疗中心共进行1300多例临床考核，与流式细胞法相关性达到

3、0.95，并经中国药品与生物制品检定所抽样检测，所用试剂盒全部符合质量标准。,.,14,.,15,.,16,.,17,.,18,.,19,.,20,.,21,操作者间重复性检测,.,22,批次间重复性检测,.,23,1. 四种结果的相关系数均大于0.95 2. 本试剂盒相关性优于三种仪器之间的相关性,.,24,1. 四种结果的平均检测误差均小于50个/l 2. 本试剂盒检测误差小于三种仪器之间的检测误差,.,25,质控方法,流式细胞法为金标准法，且有相应质控品。 同一血样检测结果与流式细胞法的相关性考核客观可行。,.,26,流式细胞仪,光学显微镜,成本低 & 就地操作,技术特点一,.,27,红

4、细胞融解,全血,vs,技术特点二,.,28,流动的细胞,固定的细胞,vs,物理记录，永久存档,技术特点三,.,29,微量采血,流式细胞法的1/400 ，可用手指末梢血。,100L,0.25L,技术特点四,.,30,技术特点五,培训简单、无维护,.,31,技术特点六,无冷藏要求,室温保存,冰箱保存,.,32,手工方法的技术局限,一定的劳动强度（5分/片）。 操作者失误（特别是读片计数）。,.,33,专业读片,可由专业读片人员进行计数。,.,34,.,35,.,36,新药证书编号 （国药证字S20060027）,.,37,.,38,美国CDC交流,泰国世界艾滋病大会,南非卫生机构培训,.,39,研

5、发中心,.,40,.,41,可一次同时检测 CD 3、CD 4、CD 8 等多种特异性细胞数量,下一代产品,.,42,谢谢！,.,43,.,44,CD4 细胞,非CD4 细胞,荧光标记CD4 单克隆抗体,流式细胞原理,.,45,CD4检测技术回顾 HIV 论坛 CD4 工作组工作报告 第二届世界艾滋病大会 泰国 曼谷 2004年7月,.,46,.,47,2005年7月，“CD4细胞玻片计数检测法” 通过了上海市医学会组织的“新技术临床准入专家评审”，获得上海市卫生局临床准入批文，并进入医保收费，至今已开展了包括体检、亚健康检查、肿瘤辅助检查等在内的10000多例临床应用。,临床应用,.,48,

6、人体处于亚健康状态等免疫力下降时，CD4细胞绝对计数值已经明显低于正常范围，而白细胞、淋巴细胞、淋巴细胞%、流式CD4%的检测结果大都在正常范围内，故目前常规的体检手段无法针对这些人群作出正确判断。,.,49,相关基金、论文及会议,基金 上海市科委生物技术基础课题研究项目（044119641） 上海市科委重大专项科技攻关项目（05DZ19320） 科技型中小企业上海市创新资金及国家科技部创新基金 论文 A biochip for specific cell separations J. American Biotechnology Laboratory, September 2002, 28.

7、 A biochip for CD4 cell count The 2nd International AIDS Society Conference, July 2003, Paris. 一种CD4细胞计数方法 第二届亚洲检验技师学术大会，2005，96 艾滋病诊疗关键技术-CD4T淋巴细胞的计数检测艾滋病的实验室检测技术 中华中医药学会防治艾滋病学术研讨会，2005，232-242 会议 世界生物技术大会 Bio 2002 Toronto（加拿大多伦多，2002，6） 第二届世界艾滋病诊疗技术巴黎会议（法国巴黎，2003，7） 全国艾滋病临床治疗与诊断技术进展专家研讨会（北京，2004，6） 曼谷世界艾滋病大会（泰国曼谷，2004，7） 全国CD4T淋巴细