微生物的实验室培养最新(课堂PPT)

1、主题2:微生物的培养和应用；主题1:微生物的实验室培养，微生物，原核生物：真核生物，非细胞物种：衣原体，支原体，细菌，放线菌，蓝细菌，小个体，简单结构，酵母，霉菌，食用菌(蘑菇，灵芝)，真菌，原生动物，微藻微生物的共同特征：微生物的基础知识，自养微生物：光能自养：光合细菌，蓝细菌，微藻自养：硝化细菌，铁细菌，硫细菌异养微生物：绝大多数微生物，细菌形态，球菌，弧菌，杆菌，螺旋体概念：根据微生物对营养的不同需求，3。培养基的类型和用途。培养基的组成：一般含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质。此外，它还需要满足微生物生长对酸碱度、特殊营养物质和氧气等的要求。培养基类型，添加凝结剂如琼脂代替凝结剂，工

2、业化生产，观察微生物的运动，分类和鉴定，分离和鉴定微生物，计数活菌，保藏菌株，含有化学成分不清楚的天然物质，工业化生产，培养基成分清楚，分类和鉴定，液体培养基，半固体培养基，固体培养基，液体培养基，表面生长，均匀混浊生长等(锻炼与否)，固体培养基：菌落，菌落， 定义：当一个或几个细菌(或其他微生物)在固体培养基上繁殖时，它们会形成一个具有一定形态结构的亚细胞群体，称为菌落。 特征：尺寸、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。功能：每种细菌在一定条件下形成的菌落可作为菌种鉴定的重要依据。几个菌落及其形式，几个菌落及其形式，(2)微生物所需的营养物1，碳源2，氮源3，无机盐4，水.生长因子、维生素、

3、任何能为微生物提供所需碳的营养物质。无机碳源：CO2；有机碳源：糖类、脂肪酸、花生面饼、石油等。构成细胞物质和某些代谢物的异养微生物的能量来源，概念，来源，功能，1。微生物碳源，注：自养微生物碳源为无机碳源，异养微生物碳源为有机碳源，无机氮源为N2、NH4、NO3-和无机氮源有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等。可以为微生物提供氮的营养。主要用于合成含氮的蛋白质、核酸和代谢物.2。微生物的氮源。概念：来源：功能：注意：固氮菌的氮源是无机氮源，做法，1。不能作为异养微生物碳源的是(A)碳水化合物(B)碳质有机物(C)石油(D)碳质无机物(D，2)。自养微生物和异养微生物之间的主要区别在于：(

4、1)碳源；(2)氮源；(3)无机盐；(4)生长因子在实施例：中对微生物营养物的描述中，正确的是：(1)作为碳源的物质不能同时作为氮源；(4)所有的碳源都提供能量；(5)除水以外的无机物只提供无机盐；(5)无机氮源也能提供能量。分析：不同的微生物需要不同的营养，应根据微生物的具体情况进行分析。选项A和B的表达式不完整。一些碳源只能是碳源，如二氧化碳；一些碳源可以同时是氮源，例如NH4HCO3；一些碳源也是能源，如葡萄糖；有些碳源既是氮源又是能源，如蛋白胨。对于选项C，除水以外的无机物具有各种类型和功能。如二氧化碳，可用作自养微生物的碳源；碳酸氢钠可作为自养微生物的碳源和无机盐；而氯化钠只能提供无

5、机盐。对于选项D，无机氮源可以提供能量，例如，NH3可以为硝化细菌提供能量和氮源。D，16，3。通过选择培养基，可以从混合微生物群中分离出所需的微生物。在以纤维素为碳源的培养基上，大多数微生物不能生长。在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌。上述方法可用于从混合微生物群中分离()大肠杆菌、霉菌、放线菌和纤维素分解细菌。分析：选择一个。主题检查微生物分离的知识。纤维素分解细菌可以利用纤维素，但大多数微生物不能。青霉素可以抑制细菌和放线菌，但霉菌可以生长。4.某细菌培养基的组成为葡萄糖、尿素、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁和蒸馏水，其中混凝剂为，碳源为，氮源为。众所周知，只有能够合成脲酶的细菌才能在这

6、种属于培养基的培养基上生长。从同化类型来看，在该培养基中培养的细菌属于()，同化：自养/异养异化：好氧/厌氧/兼性厌氧，琼脂，葡萄糖，尿素，选择性，异养微生物，18。思考？1.获得纯文化的关键是什么？2.除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染之外，无菌技术的目的是什么？无菌技术还能有效防止操作人员被微生物感染。(3)防止外来细菌入侵的无菌技术。19.消毒和灭菌有什么区别？孢子：一些特殊群体的休眠细菌对热、碱、酸、高渗和辐射有很强的耐受性。煮沸消毒方法：在100煮沸5-6分钟。巴氏杀菌法：在70-75下煮沸30分钟或在80下煮沸15分钟。化学消毒法：用75%酒精和新洁尔灭对皮肤消毒；水源氯消毒

7、。紫外线消毒：照射30分钟。消毒方法：4。常用的消毒灭菌方法，针对物体表面和空气中的微生物，使用的设备是紫外线灯。照射30分钟后，可先喷洒石炭酸或煤酚皂溶液，以增强消毒效果。紫外线消毒，23，24，干热灭菌160170；12h，需要保持干燥的耐高温物品(玻璃器皿)，高压蒸汽灭菌100千帕121 15-30分钟，通常用于培养基的灭菌。本实验中，实验者的手用酒精消毒，操作环境用紫外线照射，培养基用高压蒸汽灭菌，玻璃器皿用干热灭菌，接种环燃烧灭菌。结小，体积小，结构简单，易于培养，生命周期短。2.实验操作以大肠杆菌的培养为例：制备牛肉膏蛋白胨培养基：通过培养基的制备，表明大肠杆菌的代谢类型(厌氧)是

8、异养的。第一步是准备牛肉膏蛋白胨培养基，1。计算2。体重3。溶解：牛肉膏(连同称重纸)蛋白胨和氯化钠琼脂加蒸馏水至100毫升4。对培养皿进行干热灭菌。5.倒盘子：50。拔出酒精灯火焰附近的嘴，打开培养皿，倒入培养基，关闭培养皿并冷却，然后将其倒置，加热，搅拌，加热并搅拌，溶解，并防止糊状物底部溶解，28。例：在制作牛肉膏蛋白胨固体培养基的描述中，误差为()A，操作顺序为计算、称量和溶解。用玻璃棒取出称重纸。当培养基冷却到大约50时，倒平板。在平板冷却并凝固约5分钟和10分钟后，将平板倒置。分析：选择a。研究了牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备工艺。顺序是：计算、称重、溶解、消毒和倒平板，因此项目A是

9、错误的。29，方法1:平板划线方法2:稀释和涂布平板法核心目标：防止杂菌污染并确保培养物的纯度。步骤2:大肠杆菌的纯化，接种，定义：接种环，连续划线，稀释和分散，菌落，步骤：1。接种环焚烧灭菌2。冷却接种环，打开棉塞3。试管口灭菌(杀灭)4。浸泡细菌溶液5。杀死棉塞6。标记接种7。接种环灭菌，连续划线5定义：梯度稀释，涂布，菌落，方法2:稀释涂布平板法，步骤：1。稀释操作：1)试管灭菌编号2)移液管，稀释菌液3)重复操作，完成5个试管的稀释2。涂板：1)涂药器酒精消毒2)取菌液3)烧尽酒精4)涂散菌液，放入锥形瓶，待培养基冷却至50左右，用酒精灯照射2天后观察，即可接种，无杂菌污染。平板操作，

10、A:你可以用手触摸装有培养基的锥形瓶，当你感觉锥形瓶的温度下降到刚好在它变热之前，你可以倒平板。2.为什么你需要让锥形瓶的瓶口穿过火焰？答：通过燃烧和消毒，可以防止瓶口的微生物污染培养基。1.培养基消毒后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。你如何估计培养基的温度？3.为什么平板在冷凝后要倒置？在倒盘子的过程中，如果培养基不小心溅到盖子和盘子底部之间，盘子还能用来培养微生物吗？为什么？答：盘凝结后，水滴会凝结在盘盖上，凝固的培养基表面湿度会更高。翻板不仅能使培养基表面的水更好地挥发，还能防止盘盖上的水滴落入培养基中造成污染。答：空气中的微生物可能在盖子和盘子底部之间的培养基上繁殖，所以最好不要

11、用这个盘子来培养微生物。答：操作的第一步是燃烧接种环，以避免接种环上的培养物可能被微生物污染；每次划片前灼烧接种环的目的是杀死最后一次划片后接种环上的残余菌株，使接种环上的菌株直接来自下一次划片的最后一次划片的末端，从而通过增加划片次数逐渐减少每次划片的菌株数量，从而获得菌落。标记后焚烧接种环可以及时杀灭接种环上的残留菌株，避免细菌污染环境和感染操作人员。1.为什么在操作的第一步和每次划线之前都要烧掉接种环？在划线操作结束时，您还需要烧掉接种环吗？为什么？2.燃烧接种环后，为什么要等它冷却后再做标记？答：避免接种环温度过高而杀死菌种。3。为什么你总是在第二次和随后的划片操作中从最后一次划片的末

12、尾开始划片？答：划线后，线末端的细菌数量少于线开始的细菌数量。从每次划片的最后一次结束开始，随着划片次数的增加，细菌数量逐渐减少，最终可以获得单个细菌繁殖的菌落。答：“无菌”应该从操作的每一个细节中得到保证。例如，酒精灯和培养皿之间的距离应适当，吸管头不应接触任何其他物体，吸管应围绕酒精灯的火焰。涂层板的所有操作都应在火焰附近进行。考虑到平板划线和系列稀释的无菌操作要求，考虑如何在步骤2中进行无菌操作。2。稀释涂布板的操作方法，第三步：微生物恒温培养，接种培养基不含接种培养基，在37培养箱中培养12小时和24小时，效果：对照实验，如果没有菌落生长，说明培养基配制成功。否则，培养基被杂菌污染，需

13、要重新制备。第四步：菌种保存，第四步：在易被污染或变异的固体斜面培养基上保存。长期保存：20个甘油瓶保存在冰箱里。暂时保存：3。结果分析和评价，本学科知识总结：例2。以下是对灭菌的错误理解：(1)防止杂菌污染；(2)消除杂菌；(3)培养基和实验包括培养基的制备、灭菌、接种和培养、菌落的观察和计数。请回答与这个实验相关的问题。(1)培养基中所含的蛋白胨和淀粉为细菌培养提供了和谐。此外，培养基的基本成分必须是和。(2)对培养基进行灭菌时，应采用上述方法。(3)为了尽快观察细菌培养的实验结果，接种湖水样品的平板应在37的培养箱中培养。为了使这个实验的结果可靠，我们也应该把它接种在另一个板上作为对照。

14、(4)培养20小时后，平板上观察到不同形状和颜色的菌落，表明湖水样品中存在一种细菌。一般来说，菌落总数越多，湖水被细菌污染的越多。(5)如果培养基中氯化钠浓度增加，可用于筛选抗性细菌。这种培养基叫做。无菌水，更多，更高，培养基的选择，盐，实践，1。获得纯培养物的关键是A对用于微生物培养物的器皿、接种器皿和培养基进行灭菌，B对纯细菌进行接种，C在合适的环境条件下进行培养，D防止外来杂菌的入侵，练习1。获得纯培养物的关键是用于微生物培养的器具，接种工具和培养基的灭菌，纯细菌的接种，在合适的环境条件下的培养，防止外来细菌的入侵，实践，2。以下操作与无菌技术无关：A、接种前用肥皂洗手，然后用酒精擦手；

15、B、接种前用火焰烧灼接种针；C、在50左右培养，将斜面D放在酒精灯火焰旁边。2.以下操作与无菌技术无关：接种前先用肥皂洗手，然后用酒精擦手，接种前用火焰烧接种针，在50左右培养，留出坡度D，用酒精灯的火焰完成，练习、3。手术器械和罐头食品的处理应以能杀死的为标准。甲球菌、乙杆菌、丙螺旋体、丁孢子、练、3。手术器械和罐头食品的处理应该以可以杀死的为标准。甲球菌，乙杆菌，丙螺旋体，丁孢子，实习，4。一所学校计划开设食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动和技术课程。首先，对食用菌实验室进行清洁和消毒，准备食用菌栽培所需的各种原料和器具。然后从菌种站购买各种食用菌。请回答以下问题：练习，扩大所购真菌的培养，

16、首先准备试管培养基， 写出制备固体牛肉酱蛋白胨培养基所需的原料：_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _提供能量的主要原料是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _； 琼脂的功能是_ _ _ _ _ _，它不提供营养。为了扩大购买细菌的培养， 首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

17、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _提供能量的主要材料是_ _ _ _ _ _ _ _； 琼脂的功能是_ _ _ _ _ _，它不提供营养。牛肉膏，蛋白胨，水，无机盐，琼脂，练习，扩大所购细菌的培养，首先制备试管培养基， 写出制备固体牛肉酱蛋白胨培养基所需的原料：_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _提供能量的主要原料是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _； 琼脂的功能是_ _ _ _ _ _，它不提供营养。，牛肉膏，蛋白胨，水，无机盐，琼脂，