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文档简介

1、纤维素棉是自然界中纤维素含量最高的天然产品。纤维素是地球上最丰富的多糖,植物每年生产超过70亿吨的纤维素;分布在植物的根、茎和叶中;在食草动物的消化道中,也有分解纤维素的微生物。原理是纤维素酶是用来分解纤维素的,但是人类没有分解纤维素的能力。2.农作物秸秆:稻草、麦秸、稻草、草、锯末等。富含大量纤维素,使用机会少,效率低;纤维素生物燃料是最有前途的石油能源替代品。科学家们正在研究如何将农业废弃物、木材和生长较快的草本植物转化成各种生物燃料(甚至航空燃料)。(1)纤维素和纤维素酶,纤维素:一种由葡萄糖首尾相连组成的高分子化合物,广泛存在于植物的根、茎、叶和其他器官中。纤维素酶:由微生物分泌的复合

2、酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。由于它们的协同作用,纤维素最终被分解成葡萄糖。纤维素、纤维二糖、葡萄糖,取两个20毫升试管,实验:用纤维素酶进行纤维素分解实验,向每个试管中加入一个滤纸条,向每个试管中加入10毫升10.1毫升/升乙酸钠缓冲溶液,向第一个试管中加入1毫升蒸馏水,向第二个试管中加入1毫升纤维素酶,并在摇床上以140转/分钟的速度摇动试管1小时。结果:第二个试管的滤纸试管的功能是什么?刚果红染色,刚果红可与纤维素等多糖形成红色复合物,但不与水解的纤维二糖和葡萄糖反应。(2)纤维素分解菌的筛选:当添加刚果红的纤维素培养基用于培养微生物时,如果培养基中出现以菌落为中心的透明圈,则表明

3、该菌落为纤维素分解菌,因为它分解了被岗国红染成红色的纤维素。1.为了验证设计,请根据实验流程图、提供的三种材料和“操作提示”设计一个详细的实验方案。*,采样环境,1。土壤采样:富含纤维素的环境(森林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝落叶等)。),操作步骤,讨论:如果你找不到合适的环境,你可以把滤纸埋在土里。将滤纸埋在土壤中的作用是什么?你认为滤纸应该埋在土壤里多深?将滤纸埋在土壤中可以使纤维素分解菌相对集中,这实际上是一个适合人为设置纤维素分解菌生存的环境。一般来说,滤纸应该埋在大约10厘米深的土壤里。2.选择性培养,增加纤维素分解菌的浓度,以确保所需的微生物可以从样品中分离出来。目的:制

4、备选择性培养基。操作:P29。介质成分分析。建议自变量为培养基类型,即完全培养基和选择性培养基。完全培养基可以用作对照,或者纤维素可以变成葡萄糖。侧栏中的公式是液体介质还是固体介质?为什么?是液体培养基,因为配方中没有凝结剂(琼脂)。这种培养基对微生物有选择性作用吗?如果是,是如何选择的?在这个公式中,纤维素是主要的碳源,只有能够分解纤维素的微生物才能大量繁殖。你能设计一个对照实验来解释选择性培养基的功能吗?这表明配方中的酵母抽提物还可以提供少量的碳源,这样其他微生物就可以在培养基中生长繁殖。然而,由于酵母抽提物的含量很少,只有以纤维素为碳源的微生物才能繁殖。在选择性培养的条件下,那些能够适应

5、这种营养条件的微生物可以快速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物被抑制繁殖,因此它们可以起到“浓缩”的作用。,为什么选择培养可以“浓缩”所需的微生物?根据受试者1的稀释操作方法,将选择性培养后的培养基稀释101107倍。3。梯度稀释,4。将样品涂布在用于鉴定纤维素分解菌的培养基上,(1)制备鉴定培养基P29,(2)涂布平板:在平板培养基上涂布0.1毫升稀释度为104、106和30的细菌悬浮液。反向文化。鉴别纤维素分解菌的培养基,(水溶性羧甲基纤维素钠),方法1:首先加入刚果红进行显色反应。方法2:同时加入刚果红。培养微生物,倒平板,5。刚果红染色法,选择产生透明圈的菌落,即分解纤维素的菌落。

6、这两种方法的优缺点是什么?透明圈的微生物基本上是纤维素分解微生物。刚果红会造成殖民地之间的混乱,这很容易操作,不会造成殖民地混乱。1.产淀粉酶的微生物也会产生模糊透明的圆圈。2.一些微生物可以降解色素并形成明显的透明圈。氯化钠溶液在方法一中的作用?思考:冲洗掉与纤维素结合不牢的刚果红,以免透明的圆圈不够清晰。这样,我们可以判断酶的活性。事实上,刚果红是一种与培养基结合的多糖底物,但是纤维素分解细菌可以产生纤维素酶,纤维素酶可以将这种多糖底物分解成单糖,因此刚果红不能被结合,弱结合的刚果红可以被氯化钠溶液冲走,从而留下大大小小的透明圆圈,这些圆圈当然具有很强的分解纤维素的能力。土壤取样、选择性培

7、养、梯度稀释、将样品涂到鉴定培养基上、选择菌落、什么样的环境取样?训练的目的是什么?选择性培养基的特性?选择什么样的殖民地?识别培养基的特性?如何识别?根据微生物对生活环境的要求,寻找相应的环境;提高纤维素分解菌的浓度,确保纤维素分解菌能够从样品中分离出来;液体培养基为固体培养基刚果红染色法。在回顾实验后,选择具有透明圈的菌落,并选择具有明显透明圈的菌落接种在纤维素分解菌的选择性培养基上,在300至370下培养,从而获得纯化培养物。净化和培养;4.结果分析和评估;1.培养基的配制是否合格,所选培养基是否筛选出菌落。培养过程中无菌落生长的培养基意味着培养基的制备合格。如果观察到产生透明圈的菌落,

8、这可能表明已经获得了分解纤维素的微生物。2.分离结果是否一致因为土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌,所以细菌是最容易分离的。然而,由于土壤样品的环境不同,不同的学生可能会得到不同的真菌和放线菌分离结果。为了确定所分离的纤维素分解菌,有必要进行_ _ _ _ _ _实验,而纤维素酶的发酵方法包括_ _ _ _ _ _发酵和_ _ _ _ _ _发酵。纤维素酶的测定方法是定量测定_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

9、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的含量。发酵生产纤维素酶、液体、固体和葡萄糖。5.主题的扩展。思考:在这个实验对象2中,实验过程之间有什么相同点和不同点?主题2:土壤样品的梯度稀释直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上,并分离和计数菌落。在该受试者中,首先培养纤维素分解细菌,然后稀释并涂布在鉴定培养基上以选择菌落。土壤取样、选择性培养、梯度稀释、将样品涂到鉴定培养基上、选择菌落、什么样的环境取样?训练的目的是什么?选择性培养基的特性?选择什么样的殖民地?识别培养基的特性?如何识别?根据微生物对生活环境的要求,寻找相应的环境;目的:提高纤维素分解菌的浓度

10、,确保所需微生物能从样品中分离出来;刚果红染色、纤维素分解微生物的分离、纤维素酶的种类、功能、催化活性、刚果红染色、筛选原理、实验设计、土壤取样、选择性培养、涂膜培养、纯化培养、染色前和染色后、富含纤维素的土壤、增加分解菌的含量、染色和鉴定、分解菌的分离、以下不是微生物: ()蓝藻菌、蘑菇、葫芦菌、铁线蕨菌、噬菌体、黄曲霉、放线菌和阿米巴分析病毒、原核生物(如细菌、放线菌、支原体、蓝藻菌)一般来说,多细胞植物和动物不是微生物。例如,葫芦是苔藓植物,铁线蕨是多细胞高等植物。【答案】B、微生物营养素,在微生物营养素的描述中,正确的说法是()一种物质是碳源,不能同时是氮源。所有的碳源都提供能量。除水

11、以外的无机物只提供无机盐。无机氮源也能提供能量。分析不同的微生物需要不同的营养,因此应根据微生物的具体情况进行具体分析。对于A和B选项,其描述是不完整的。一些碳源只能是碳源,如CO2;一些碳源可以同时是氮源,例如NH4HCO3;一些碳源也是能源,如葡萄糖;有些碳源既是氮源又是能源,如蛋白胨。对于选项C,除水以外的无机物具有各种类型和功能。例如,CO2可以用作自养微生物的碳源。碳酸氢钠可作为自养微生物的碳源和无机盐;而氯化钠只能提供无机盐。对于选项D,无机氮源可以提供能量,例如,NH3可以为硝化细菌提供能量和氮源。【答案】D、微生物与病毒的关系,在病毒增殖的描述中,正确的是()甲病毒侵入宿主细胞

12、后,它合成一种蛋白质,乙病毒只在宿主的活细胞中繁殖,而丙病毒可以在核衣壳中作为一个单位繁殖。d病毒可以在普通培养基上培养。分析要解决这个问题,有必要从以下几个方面进行分析:第一,病毒以寄生方式生存,必须生活在活细胞中,不能独立生存。其次,在繁殖过程中,病毒的核酸进入宿主细胞,子代个体由宿主成分合成,宿主成分应包括除核衣壳之外的病毒的其他结构。应该有不止一种蛋白质,包括许多结构蛋白和许多合成物质所需的酶。【答案】B培养基的种类,为了从各种细菌中分离出某一种细菌,培养基应该是()A培养基用青霉素B培养基用高浓度盐C固体培养基D液体培养基【分析】固体培养基应该用于微生物分离,而且很难使用选择性培养基,因为某一种细菌的种类是未知的。例如,酵母和

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