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文档简介
1、项目5植物油中磷脂含量的测定,刘慎勇食品分公司,主要内容,实验目的掌握油脂中磷脂测定的原理和方法。学会绘制吸收曲线和计算结果。进一步掌握分光光度计的使用。磷脂的定义、实验原理、植物油中的磷脂燃烧成五氧化二磷,然后用热盐酸将其转化为磷酸,再与钼酸钠反应生成磷钼酸钠,再用硫酸肼还原生成钼蓝,用分光光度法在680nm处测定其含量。磷脂测量仪器和仪器,钼蓝比色法1。陶瓷坩埚或应时坩埚;2.分光光度计或带塞子的50毫升比色管;3.移液管:5,10毫升;4.电炉和高温炉;5.容量瓶:100、500和1000毫升;6.观察玻璃、烧杯和量筒;7.恒温水浴锅;8.漏斗、坩埚钳、试剂瓶等。磷脂测定试剂,1.50氢
2、氧化钾溶液;2.盐酸、硫酸、氧化锌和滤纸;3.0.015硫酸二铵溶液;4.2.5钼酸钠稀硫酸溶液:称取140毫升硫酸,注入300毫升水中,摇匀,冷却至室温,加入12.5克钼酸钠,溶解后加水至500毫升,摇匀,静置24小时。5.磷标准溶液:称取0.4391克无水磷酸二氢钾,溶于1000毫升水中,作为1号溶液,含磷0.1毫克/毫升,吸收10毫升1号溶液,用水稀释至100毫升,含磷0.01毫克/毫升,作为2号溶液进行比色。操作步骤,1。绘制标准曲线:取四个50毫升比色管,编为1、2、4、8五个数字,按数字顺序分别注入1、2、4、8毫升磷标准二号溶液,然后按顺序分别加入9、8、6、2毫升水。然后加入8
3、.0毫升;将0.015的硫酸二铵溶液注入4个管中的每一个;加入2.0毫升钼酸钠稀硫酸溶液,塞好并摇匀。取下塞子,将4支试管放入沸水浴中,加热10分钟,取出,冷却至室温,用水稀释至50毫升,摇匀,静置10分钟,然后使用波长为650纳米的分光光度计,使用1厘米的水浴,用水调节零点,分别测量吸光度值。以吸光度为纵坐标,磷含量(0.01、0.02、0.04、0.08毫克)为横坐标绘制标准曲线。操作步骤,2。测量液的制备:用坩埚称取约10克样品(精确至0.001克),加入0.5克氧化锌(氧化锌在灰化过程中可与磷形成磷酸锌,以防止磷以氧化物形式挥发造成的损失),首先在电炉中加热碳化,然后将其送入550,6
4、00的高温炉中焚烧(白色)约1小时,取出坩埚并冷却至室温。 将灰分溶解在10毫升热盐酸(11)中,加热5分钟,过滤溶解的溶液,并将其注入100毫升容量瓶中,用热水冲洗坩埚和滤纸,滤液冷却至室温后,用50氢氧化钾溶液中和至出现浑浊,缓慢加入盐酸使氧化锌沉淀完全溶解,然后滴2滴,最后用水稀释至刻度并摇匀。操作步骤,3。比色法:用移液管吸取10毫升待测液体,注入50毫升比色管,加入8.0毫升0.015硫酸肼,加入2.0毫升稀钼酸钠硫酸溶液,塞住,摇匀。取下塞子,将比色管在沸水浴中加热10分钟,取出,冷却至室温,用水稀释至50毫升,摇匀,静置10分钟,然后使用波长为650纳米的分光光度计,使用1厘米浴,用水调节零点,测量吸光度值。根据待测液体的吸收值,从标准曲线中找出磷含量(P),并根据公式(1)计算磷脂含量。两个测试结
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