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文档简介
1、纤维素分解微生物的分离纤维素酶纤维素酶是一种复合酶,通常被认为至少包括三种成分,即C1酶(核酸外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶。前两种酶将纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。取两个20毫升试管,实验:纤维素酶分解纤维素的实验,加入一个滤纸条,分别加入11毫升和10毫升的pH4.8和0.1毫升/升的醋酸钠缓冲液,向第二个试管中加入1毫升纤维素酶,将两个试管固定在锥形瓶中,在摇床上以140转/分钟的速度摇动1小时。结果:第二个试管的滤纸条试管的功能是什么?建议本实验的自变量是纤维素酶是否存在。操作方法是在一个试管中加入适量(1mL)的纤维素酶溶液,而不是在另一个试管中加入纤
2、维素酶,但需要加入等量的缓冲液代替蒸馏水,否则溶液的酸碱度会受到影响。实验分析:P27的小实验如何构成对照?根据是否产生透明圈,可以筛选纤维素分解菌,并分析培养基的组成。在以尿素为氮源的选择性培养基上铺展细菌,在以纤维素粉为碳源的选择性培养基上铺展细菌,固体培养基,液体培养基,筛选菌株,选择性培养,思考:本实验的实验过程与主题2的实验过程有何异同?在第二个任务中,从土壤样品制备的细菌悬液直接包被在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上,并直接分离菌落。在本课题中,通过选择性培养使纤维素分解细菌增殖,然后将细菌溶液涂布在选择性培养基上。其他步骤基本相同。根据受试者1的稀释操作方法,将选择性培养后的培养
3、基稀释101107倍。3。梯度稀释,4。将样品涂布在用于鉴定纤维素分解细菌的培养基上,(1)制备鉴定培养基3360,(2)涂布平板:将0.1毫升稀释度为104,106的细菌悬浮液涂布在平板培养基上,并倒置培养基30。鉴别纤维素分解菌的培养基,(水溶性羧甲基纤维素钠),方法1:首先加入刚果红进行显色反应。方法2:同时加入刚果红。培养微生物,倒平板,5。刚果红染色法,选择产生透明圈的菌落,一般是分解纤维素的菌落。这两种方法的优缺点是什么?颜色反应基本上是纤维素分解细菌的功能。刚果红将导致殖民地的混合。操作简单,不存在菌落混合问题。1.产淀粉酶的微生物也会产生模糊透明的圆圈。2.一些微生物可以降解色
4、素并形成明显的透明圈。在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,这将提高培养基的碱度和提高其酸碱度。将酚红指示剂加入培养基中。如果酸碱度上升,指示剂会变红,刚果红会与纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解时,红色复合物不能形成,以纤维素分解菌为中心的透明圆会出现在培养基上。观察菌落周围是否有有色环来鉴别尿素分解菌,观察菌落周围是否有透明环来筛选纤维素分解菌。脲酶检测,刚果红染色,在有明显透明圈的菌落中,挑取接种于纤维素分解菌的选择性培养基上,在300-370培养,得到纯化培养物。6.净化和培养。为了确认分离的纤维素分解细菌是,需要_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _实验。纤维素酶的发酵方法有_ _ _ _ _ _发酵和_ _ _ _ _ _发酵。纤维素酶的测定方法是定量测定_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
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