第六章芳酸及其酯.ppt

1、第六章 芳酸及其酯类药物的分析,第一节 典型药物分类与理化性质,一、水杨酸类,双水杨酸酯 贝诺酯,1. 溶解性 2. 酸性 3. 三氯化铁反应,4. 重氮化-偶合反应,5. 水解,二、苯甲酸类,苯甲酸、苯甲酸钠,羟苯乙酯,布美他尼,丙磺舒,泛影酸,性质： 1. 白色固体结晶 2. 溶解性 几乎不溶于水 3. 酸性 4. 三氯化铁反应 5. 分解性,pKa 4.20,三、其他芳酸类,布洛芬,氯贝丁酯,依他尼酸,苯丁酸氮芥,第二节 鉴别试验,一、与铁盐的反应,酚羟基的特有反应,1. 直接反应 SA在中性或弱酸性条件下，与FeCl3生成紫堇色配 位化合物,可与水杨酸类药物区别,丙磺舒与NaOH成钠盐

2、后，在pH 5.06.0中与FeCl3生成米黄色 布洛芬与高氯酸羟胺，N，N-双环己基羧二亚胺及高氯酸铁反应，即显紫色。基于分子中-COOH的结构。,2. 水解或分解后与三氯化铁反应,ASA水解成SA后与FeCl3 反应，成紫堇色,二、重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,橙红色,1. 直接反应 对氨基水杨酸钠 2. 水解后反应 贝诺酯具有潜在芳伯氨基 3. 甲芬那酸与对-硝基苯重氮盐在NaOH介质中偶合产 生橙红色。,+ K2Cr2O7 深蓝色 棕绿色 甲芬那酸 + H2SO4 黄色 绿色荧光,三、氧化反应,四、水解反应,1. 2. 双水杨酯水解生成SA：SA

3、的mp为158。 3. 氯贝丁酯碱水解后与盐酸羟胺生成异羟肟酸盐， 在弱酸条件下再与三氯化铁反应生成紫色的异 羟肟酸铁。,五、分解产物的反应 1. 苯甲酸钠 可分解成苯甲酸白色升华物。 2. 丙磺舒,3. 丙磺舒高温加热时，能产生二氧化硫气体。,1. 测定max ；min。 例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备0.25mg/ml； max = 265nm, 273nm; min=245nm, 271nm。 2. 在max 处测定一定浓度供试液的吸收度A。 例如：羟苯乙酯，5g/ml max =295nm; A = 0.48 3. 在max 处测定供试液的百分吸收系数。 例如：贝诺酯在max

4、=240nm; = 730760,六、紫外吸收光谱法,4. 在规定的波长测定吸收度比值（即双波长吸收 度比值法） 例如：对氨基水杨酸钠10g/ml; A265/A299 = 1.561.56 再例如：甲芬那酸14g/ml; A278280/A348352 = 1.151.30,七、红外吸收光谱法,水杨酸的红外吸收图谱,37002900cm-1,N-H、 O-H,1660cm-1,C=O,1610,1570 1480,1440,C=C,775cm-1,Ar-H,返 回,37002900cm-1,N-H、 O-H,1640cm-1,N-H,1580cm-1 1500cm-1,C=C,1300cm-

5、1,C-N,1188cm-1,C-O,对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱,第三节 特殊杂质检查,一、阿司匹林中特殊杂质检查,1. 溶液的澄清度 碳酸钠试液中不溶物（苯酚、水杨酸苯酯、醋酸苯酯等） 方法：取阿司匹林0.5g，加温热至45的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应澄清,2. 游离水杨酸（有毒、氧化为醌有色物质）,(1) 杂质来源：原料残存、水解产生 (2) 检查方法 标准对照法 反应原理：酚羟基可直接与高铁盐Fe3+反应 限量 原料：0.1%； 阿司匹林片：0.3%； 阿司匹林肠溶片：1.5%； 阿司匹林栓：3.0%,二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质检查,间氨基酚（有毒，易氧化变色） 来源：未反应完

6、全的原料；贮存中产生 检查原理：药物与杂质在乙醚中的溶解性差异，分离出醚层，再用盐酸滴定,三、二氟尼柳中有关物质的检查,Ch.P收载的方法，由于杂质的结构不清，故采用TLC法中和HPLC法的 供试品自身对照法：,固定相：GF254硅胶,展开剂：正己烷-二氧六环-冰醋酸 （85：10：5）,正相TLC法,甲芬那酸是以邻-氯苯甲酸和2，3-二甲基苯胺在Cu的催化下 缩合而成，因此成品药物中要检查铜盐及有关物质。 分光光度法：利用Cu 2+与Na-DDC呈色后测定A 1. 铜盐检查法 原子吸收分光光度法：BP（2000） 2. 有关物质的检查 主要检查的是酰胺、二甲基苯胺和邻氯苯甲 酸。各国药典均采

7、用TLC法中的自身高低浓 度对照法。,四、甲芬那酸中特殊杂质的检查,五、氯贝丁酯中特殊杂质的检查,主要检查成品药物中残留的对氯酚原料和挥发性杂质,GC-FID法,HPLC法：以对-羟乙基酚作内标，用正相HPLC,2. 挥发性杂质的检查方法 GC法,1. 对氯酚检查,返 回,第四节 含量测定,（一）直接滴定法 阿司匹林原料药、水杨酸、双水杨酸酯 1. 原理：利用阿司匹林（ASA）游离羧基的酸性，以标准碱液直接滴定。,一、酸碱滴定法,2. 方法,阿司匹林 ChP（2005） 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo

8、1/L）滴定。每1ml的氢氧化钠液（0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。,3.终点判定： 酚酞由无色变为红色，即到达滴定终点。 弱酸用强碱滴定时，化学计量点偏碱性。 4.讨论 中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。 “中性”是对中和法所用的指示剂而言 温度在0-40,测定结果几乎无影响。 不断搅拌，稍快滴定，防止局部碱度过大，避免水解。,5.方法优缺点 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰 酸性杂质干扰（如水杨酸） 6.适用范围 不能用于含水杨酸过高或制剂分析， 只能用于合格原料药的含量测定,（二） 水解后剩余滴定法 1. 原理 利用ASA的酯结构在碱性溶液中易于水解的性质，加

9、入过量氢氧化钠滴定液，加热使酯水解，剩余碱用酸回滴。,2.操作 以USP（25）为例: 取本品1.5g, 精密称定，准确加氢氧化钠液（0.5mol/L)50.0ml水浴上煮沸10分钟，放冷，以酚酞为指示剂，用硫酸液（0.25mol/L)滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的0.5mol/L氢氧化钠液相当于45.04mg的C9H8O4。,3.讨论 进行空白试验的原因 碱液在受热时很易吸收二氧化碳，形成碳酸钠用酸回滴时要影响测定结果，故需在同样条件下进行空白试验校正。 4.计算 含量,（三） 两步滴定法,（阿司匹林片、阿司匹林肠溶片） 1.原理： 以NaOH中和游离酸（乙酰水杨

10、酸、水杨酸、醋酸、枸橼酸、酒石酸等）, 再加定量过量碱使阿司匹林酯键完全水解，以H2SO4回滴剩余NaOH。,第一步：中和,第二步：水解后剩余滴定,2.操作 中和：精密称取适量片剂细粉（约相当于ASA0.3g），加中性醇溶解ASA，过滤，以酚酞为指示剂，用氢氧化钠液（0.1mol/L）迅速滴定至粉红色，即将可能存在的游离酸全部中和，ASA也同时成为钠盐。 水解：在中和后的供试品溶液中，加入定量并过量的碱液40ml，加热使酯结构水解。迅速冷至室温，再用0.05mol/L硫酸液滴定剩余的碱，并将滴定结果用空白试验校正，即得。供试品中ASA的含量由水解时所消耗的碱量计算。,3.讨论 本法消除了酸性杂

11、质的干扰 降低了 酯键水解的干扰,4.计算,二、亚硝酸钠滴定法,具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物 对氨基水杨酸钠,三、 双相滴定法 (芳酸碱金属盐),1. 原理 利用苯甲酸钠、苯甲酸在水和乙醚中溶解度差异,苯甲酸钠 Ch.P(2005),2. 操作（苯甲酸钠为例） 取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基红指示液2滴，用HCl滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用HCl滴定液(0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙

12、红色。 每1ml 0.5mol/L盐酸液相当于72.06mg的C7H5NaO2,乙醚的作用：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底。滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。,优点：消除了反应产物的干扰,3. 讨论,四、紫外分光光度法,（一）直接紫外分光光度法 丙磺舒的盐酸乙醇溶液在249nm有最大吸收 （二）柱分配色谱-紫外分光光度法 SA的限量测定 阿司匹林胶囊含量测定 特点： 可同时测定ASA、SA，不需水解步骤。 比较专属，共存物或赋形物不干扰测定，适于制剂和血样的含量测定。,（三）离子交换-紫外分光光度法,氯贝丁酯及其制剂

13、Ch.P(2000)采用酸碱滴定法；当含有酸性杂质对氯酚时，可采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后， 在甲醇溶液中，226nm波长处，采用对照品比较法。 具体计算：W1000 1/100 1/100 = Cu (g/ml) Au/As = Cu/C Cu = C(Au/As) W(mg) = 10 Cu = 10 C(Au/As),Ch.P(2000)ASA的胶囊剂的含量测定采用此法。 USP（24）ASA片、对氨基水杨酸钠、甲芬那酸、布洛芬、丙磺舒等及其制剂，采用此法。,五、HPLC法,（一）ASA栓剂的含量测定,色谱条件：色谱柱ODSC18；流动相为甲醇：0.1%二乙胺：HAC (40:

14、60:4);检测波长280nm；内标物为咖啡因。 系统适用性试验： n 2000; ASA与SA与内标物的R 1.5 具体计算： Cx = Rx/RRCR W(g) 1/50 2/50 = Cx W测 = 1250 Cx,标示量% = W测/W W平/标示量100% = Cx 1250 W平/W 标示量100%,色谱条件：色谱柱苯基硅胶柱；流动相为NaH2PO3 0.1% HAC液- 0.1% HAC乙腈液(50:50);检测波长254nm。 系统适用性试验： n 3900; T 2.3; 重复性 RSD1.5% 具体计算：,（二）丙磺舒原料的含量测定,W 1/100 = Cu(mg/ml);

15、 Cu = Au/As C 供试品中丙磺舒(mg)=100C(Au/As),返 回,选择题,1. 鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是 A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾 2. 测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是 A. 重量法 B. 酸碱滴定法 C. 高效液相色谱法 D. 络合滴定法 E. 高锰酸钾法,（C）,（BC）,选择题,3. 苯甲酸钠的含量测定，Ch.P（2005）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为 A. 水乙醇 B. 水冰醋酸 C. 水氯仿 D. 水乙醚 E. 水丙酮 4. 双相滴定法含量测定可适用的药物为 A. 阿司匹林 B. 对

16、乙酰氨基酚 C. 水杨酸 D. 苯甲酸 E.苯甲酸钠,（D）,（E）,选择题,5. 两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是 A. 测定阿司匹林含量 B. 消除共存酸性物质的干扰 C. 使阿司匹林反应完全 D. 便于观测终点 E. 有利于第二步滴定,（B）,选择题,6.能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有 A苯甲酸钠 B水杨酸 C对乙酰氨基酚D氢化可的松 E丙酸睾酮 7. 采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是 A. 防止反应产物的干扰 B. 乙醚层在水上面，防止样品被氧化 C. 消除酸碱性杂质的干扰 D. 防止样品水解 E. 以上都不对,（ABC

17、）,（A）,选择题,8. 区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是 A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾 9. 在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是 A. 水杨酸钠 B. 对氨基水杨酸钠 C. 乙酰水杨酸 D. 苯甲酸钠,（C）,（D）,选择题,10.用直接滴定法测定阿司匹林含量 A. 反应摩尔比为1：1 B. 在中性乙醇溶液中滴定 C. 用盐酸滴定液滴定 D. 以中性红为指示剂 E. 滴定时应在不断振摇下稍快进行,（ABE）,计算题,1. 对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查：称取本品3.0g，置50ml烧杯中，加入无水乙醚25ml，用玻璃棒搅拌1min，注意将乙醚液滤入分液漏斗中，不溶物再用无水乙醚提取两次，每次25ml，乙醚液滤入同一分液漏斗中，加水10ml与甲基橙指示液1滴。振摇后，用盐酸滴定液（0.02mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，消耗盐酸滴定液不得过0.3ml。问： （1）无水乙醚提取什么？ （2）盐酸滴定液滴定什么？ （3）间氨基酚（分子量为109）限量是什么？,2. 氯贝丁酯含量测定：取本品2g，精密称定(2.0631g)，加中性乙醇10