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1、pET-NiV G:NiV F重组载体的诱导表达与NiV G和NiV F蛋白的纯化,Inducing vector pET-NiV G:NiV F to express and purification of target proteins NiV G and NiV F 报告人： 导 师：,研究背景 目的及意义 实验方法 实验结果 讨论与结论 致谢,研究背景,尼帕病毒脑炎是一种高度烈性人畜共患传染病。 目前我国虽然没有该病爆发，但其已经对我国构成了严重威胁。,目的及意义,以大肠杆菌O BL21表达重组载体（pET-NiV G:NiV F重组载体），以IPTG作为诱导引物诱导目蛋白的表达，之后

2、对目的蛋白（尼帕病毒粘附蛋白G和融合蛋白F) ，进行分离及纯化。,实验方法,一 、 pET-NiV G:NiV F重组载体转入感 受态工程菌BL21 利用热击的方法使感受态的工程菌BL21 吸收pET联NiV G和NiV F重组载体 二、目的基因的诱导表达 分离纯培养含目的基因的菌落，大量扩增之后，以IPTG作为诱导物诱导大肠杆菌表达目的蛋白。,三、目的蛋白的提取 用超声处理法破碎细胞，并用尿素反复 溶解可溶性的杂质蛋白，以获取较纯净的目的蛋白，并在各个阶段提取纯化样品。 四、目的蛋白的鉴定 对蛋白样品进行SDS-PAGE电泳和 Western-blot鉴定。,实验结果,一、诱导表达NiV F蛋白及纯化结果 目的蛋白表达并且通过处理后获取较纯净的蛋白,二、诱导表达NiV G蛋白及纯化结果,目的蛋白表达并且通过处理后获取较纯净的蛋白,实验讨论与结论,实验讨论：实验获取的目的蛋白依然含有较多的杂质，如果对纯化后的产物进行过柱处理，特异性的保留目的蛋白，可获取更为纯净的目的蛋白。 实验结论：本实验成功的获取了较纯净的目的蛋白，并

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