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文档简介

1、超完全细菌药物易感性总结一、在什么情况下进行药物易感性试验药敏试验原则是仅对与感染相关的致病菌或致病菌进行药敏试验,否则会导致不必要的治疗。 制作药物易感性需要考虑的主要因素如下1 .标本来源(1)无菌部位标本分离的细菌最有临床意义如脑脊液、血液、体液、骨髓等。 从血、无菌体液标本分离的细菌必须进行药敏试验,除血培养一次性分离的芽胞杆菌属、棒状杆菌属、凝固酶催化剂阴性葡萄球菌外,从无菌体液分离的芽孢杆菌属除外。 多次培养分离上述同种细菌,需要药敏试验。(2)来自正常菌群或污染部位的标本;如果需要药敏试验,如伤口、脓肿和其他污染部位的标本,培养一种或两种中等或大量致病菌质量合格的痰标本,培养一种

2、或两种中等或大量可能的致病菌生长。 对正常菌群和污染菌不进行药敏试验。2 .无法预测治疗用药的易感性伤口分离的化脓连锁球,通常对青霉素敏感,不进行药敏试验伤口分离的金黄色葡萄球菌一样,易感性无法预测,因此需要药敏试验。3 .定量培养在以下情况下,必须进行药敏试验(1)中段尿标本的菌落数为105CFU/ml,对分离成1种或2种致病菌的女性将有临床症状的患者分离成1种致病菌,菌落数1.0,000 cfu/ml的6.5岁以上的患者留置导管采集尿标本,菌落数1.0, 用000cfu/ml纯培养的直接导尿和膀胱镜等采集尿标本,单纯培养或分离2种致病菌,各菌的菌落数为1000CFU/ml。(2)静脉插管前

3、端分离的凝固酶催化剂阴性葡萄球菌1.5个菌落。4 .其他微生物的存在和定量正常菌群的存在和定量是重要的考虑因素。 通常对纯培养细菌进行药敏试验,混合细菌的生长是否进行药敏试验还不清楚。 需要药敏试验的定量培养支气管镜采集标本:为用毛刷标本生长103CFU/mL、支气管肺泡清扫液生长104CFU/mL (或半定量为中等量/大量、多于正常菌群)分离培养的下呼吸道病原菌、厌氧菌(仅限毛刷标本)、定量计数103104CFU/mL的纯5 .患者年龄分离特定年龄组细菌需要药敏试验,如痰培养正常菌群中存在中等流行性感冒菌,2岁儿童患者需要药敏试验,成年患者不进行药敏试验。6 .独特的宿主要素(1)正常免疫患

4、者需要遵循一般规律的免疫抑制患者对一些条件的致病菌进行药敏试验(2)对选择的药物过敏,如从青霉素过敏患者中分离的化脓性链球菌,使用红霉素治疗无反应,需要药敏试验.二、在什么情况下不需要进行药物易感性试验1 .天然耐受力的细菌/抗微生物剂组合与获得性和突然变异耐受力相反,天然(固有)耐受力是大部分细菌种类的特性。 如果药物抗菌能力的临床表现不足或没有固有的药物耐受力,临床治疗就会失效。 在这种情况下,没有必要执行药敏试验。肠杆菌科在三代头孢菌素、头孢吡肟、阿密特拉南、卡林/棒酸、哌拉西林/他唑巴坦和氨基甲酰青霉烯类均无天然药物耐受力. 柠檬酸杆菌属、瓦斯气体发生剂肠杆菌属、变形杆菌属、丙泊酚菌属

5、、粘质沙雷菌对其他-内酰胺类(青霉素类及酶催化剂阻化剂复方药、一代、二代头孢菌素和头孢菌素等)有一定程度的天然药剂耐受力光谱。了解细菌的天然耐受力,有助于识别一般的表型,可以做评估试验方法的精准性。出现1%3%的敏感结果,有助于验证累积药物易感性试验的数据,可能是由于方法学上的差异,突然变异,或低水平的耐受力表达所致。 审查上述报告书的“敏感”结果,重复鉴定和药剂易感性结果是否正确的实验。2 .通常不能报告的菌株/抗微生物剂从脑脊液分离的菌株通常不能报告的抗微生物剂包括口服抗微生物剂、第一代头孢菌素(头孢西肟注射剂除外)、克林霉素、宏命令内酯类、抗四环素类和氟喹诺酮类,以及头孢菌素类(头孢替胺

6、、头孢西丁、头孢西丁等)。3 .腐生葡萄球菌引起的泌尿道感染不需要通常的药剂易感性腐生葡萄球菌引起的泌尿道感染不需要通常的药敏试验4 .临床上不需要对稀有菌进行常规药敏试验对临床上少见的细菌和苛养菌引起的感染不需要进行药敏试验,临床上根据经验用药,只在临床上需要重症感染的情况和药剂易感性结果对于治疗很重要的情况下进行药敏试验。因此,正确鉴定致病菌直接影响临床选择药物和治疗。 侵蚀多杀巴斯德菌属和农杆菌(常见于动物咬伤感染)的常规药品为阿莫西林/胆碱酸。 棒状杆菌属、JK棒状杆菌、尿棒状杆菌,通常在-内酰胺类、宏命令内酯类、氨基葡萄糖苷类中有耐受力。 红斑丹毒杆菌和多数乳杆菌属对万古霉素天然耐受

7、力产单核李斯特菌对头孢菌素类有天然耐受力的明珠菌属,单球菌属对万古霉素的天然耐受力敏感,但对-内酰胺类、氯霉素和氨基糖苷类敏感。 卡他莫拉菌产生-内酰胺酶,对青霉素和氨西林有耐受力,但对大环内脂质的耐受力较少。 根据经验治疗,应避免使用天然药物耐受力的药物。三、根据药剂易感性标准,选择正确的药剂易感性方法1 .仅用mic方式检测时(1)标本来源:从CSF标本分离的肺炎链球菌应采用可靠的MIC法检测并报告青霉素、头孢替胺或头孢曲松、美罗培南的结果。 分离菌来源于细菌性心内膜炎、脑膜炎、败血症、骨髓炎、免疫抑制患者、人工瓣膜、人工关节感染,临床治疗无效时用MIC法测定。 分离到正常无菌部位(如脑脊

8、液、血液和骨髓等)的绿色链球菌对青霉素和氨西林用MIC法进行了检测。(2)菌株/抗微生物剂检测:肺炎链球菌检测头孢吡肟、阿莫西林、阿莫西林/棒酸、头孢呋辛、乙烷青霉烯、亚胺培南需要MIC法,葡萄球菌属和肠球菌属需要达特霉素、肠球菌万古霉素中介,洋葱伯克霍尔德菌氯霉素, 左氧氟沙星和卡林/棒酸,麦芽孢杆菌是对头孢他啶和卡林/棒酸,以及其他非肠杆菌科细菌(包括假单胞菌菌和其他非苛性培养,非发酵葡萄糖的革兰氏阴性杆菌)的药敏试验。2 .选择正确的药剂易感性方法金黄色葡萄球菌的头孢西丁纸法或MIC法可判断mecA阴性或阳性。 用头孢替胺和苯并重氮西林将金黄色葡萄球菌或者金黄色葡萄球菌检出为云同步,并作

9、为药剂耐受力之一报告为“苯并重氮西林药剂耐受力”。一部分苯并二氮杂西林MIC为0.52g/mL的凝固酶催化剂阴性非表皮葡萄球菌不具有mecA基因,苯并二氮杂西林的弯曲点(0.5g/mL )过高地评价了这样的菌的耐药性,因此由这样的菌引起的严重的感染,能够防止mecA和PBP2a头孢替胺纸法是检测mecA介导的苯唑沙星耐受力表型凝固酶催化剂阴性葡萄球菌的最佳方法。 大部分分支登葡萄球菌不产生mecA基因,75%菌株不产生内酰胺酶,但采用金黄色葡萄球菌药物的敏感点。检测葡萄球菌的万古霉素易感性应采用MIC法,纸片法不能区分金黄色葡萄球菌的易感性与介导(VSSA和VISA )与凝固酶催化剂阴性葡萄球

10、菌的易感性。 万古霉素纸(30g )能检测出含有vanA基因的VRSA,纸的周围完全没有抗菌环,因此有必要确认菌株的鉴定结果。四、不常见耐受力表型的讨论结果1 .罕见的耐受力表型指特定细菌从未向特殊抗微生物剂报告过耐受力或罕见的耐受力。 如流感嗜血杆菌对卡巴青霉烯类、第三、第四代头孢菌素、氟喹诺酮类不敏感,而氨西林有耐受力而不产生内酰胺酶的淋病奈瑟菌对第三、第四代头孢菌素不敏感的脑膜炎奈瑟菌对第三、第四代头孢菌素、美罗培南对米诺霉素不敏感的肺炎链球菌,对万古霉素不敏感的溶血链球菌,对青霉素和青霉素;对第三、第四代头孢菌素不敏感的绿色链球菌,对达特霉素、埃尔塔青霉烯或美罗培南,对万古霉素不敏感的

11、金黄色葡萄球菌万古霉素的中介程度等。2 .应该对罕见的耐受力表型采取措施只用敏感的解释标准检测不敏感菌株,应采取以下措施(1)探讨鉴定和药物易感性结果,改变送入参考实验室的方法的药物易感性结果,必须采用CLSI的参考方法,如肉汤微量稀释法、琼脂稀释法和纸片扩散法、FDA合格的商品化试验。(2)金黄色葡萄球菌万古霉素MIC8g/mL的结果罕见,对感染管理和公共卫生部门有重要意义的部分凝固酶催化剂阴性葡萄球菌万古霉素居中,但万古霉素耐受力株少见。(3)确认c组和g组-溶血链球菌属较大菌落,若氨西林和青霉素不敏感则为少见的耐受力表型小菌落c组和g组-溶血链球菌属绿色链球菌组,对药物易感性的解释标准不

12、同。五、连续治疗中监测分离菌耐药性的发展由于某些对抗微生物剂敏感的菌株在治疗后会发展为中介或药物耐受力,所以在应对再次分离的同一菌株进行药敏试验治疗后34天出现耐受力时;1 .三代头孢菌素治疗肠杆菌属、柠檬酸杆菌属和沙雷氏菌属,这些个细菌可通过AmpC型内酰胺酶的产生发展为耐受力2 .治疗銅綠假單胞菌的抗微生物剂和治疗葡萄球菌的喹诺酮类3 .万古霉素易感性金黄色葡萄球菌(MRSA )在延长治疗期间发展为中间体(VISA ),MIC为48g/mL,适宜的方法为含有Etest或6g/mL万古霉素的脑心浸液平板。实验室应了解患者的特殊情况和病情轻重(如从早产儿血培养中分离阴沟肠杆菌等),与临床医生协

13、商后,明确何时对重复分离菌重复药物敏感性试验。六、通过检测药剂耐受力反应历程,正确解读药剂易感性结果1.内酰胺类药物的耐受力机制(1)强制在葡萄球菌临床分离菌中检测甲氧苄啶耐受力。 甲氧苄啶、苯并恶唑啉和/或头孢替胺耐受力或mecA基因、PBP2a试验阳性葡萄球菌可以通过现有的-内酰胺系耐受力、青霉素系、-内酰胺系/-内酰胺系抑制剂复合药物、头孢噻肟系(除了新型的苯并恶唑啉耐性黄色葡萄球菌活性的头孢菌素以外的芹菜(2)肺炎链球菌:对-内酰胺类耐受力比较常见,用苯并重氮西林纸进行筛选试验,如果抗菌环径大于等于20mm,则报告青霉素易感性直径小于等于19mm,对来自无菌部位的菌株测定青霉素、头孢替

14、胺/头孢曲松或美罗培南MIC值(3)草绿链球菌:为肺炎链球菌开发的苯并重氮西林纸的筛选试验对草绿链球菌不敏感,青霉素和氨苄青霉素要检查MICs。 有青霉素耐受力时,需要测定氨西林(阿莫西林)和头孢替胺(头孢曲松)的MICs,并不能根据青霉素的结果判断头孢菌素和氨基甲酰青霉烯的易感性。(4)肠球菌属:有氨苄青霉素耐受力对尿素系青霉素类和氨基甲酰青霉烯类的耐受力报道,肠球菌属通过内酰胺酶产生的耐受力机制非常少见,粪链球菌的氨苄青霉素耐受力是PBP5对-内酰胺酶类药物的亲和性降低。(5)肠杆菌科:肠杆菌科细菌的耐受力机制复杂,基于检测耐受力机制化学基判断头孢菌素和卡巴青霉烯的易感性报告药易感性结果已

15、带来多种问题,2010年后CLSI根据药物代谢动力学药效学(PK/PD )性能评价和有限临床资料,化学基头孢菌素(头孢唑仑) 修订了头孢替胺、头孢他啶、头孢替胺和头孢曲松)和氨曲南、氨基甲酰青霉烯系药物易感性的一部分,注释了对应新折扣点的用药方案。EUCAST标准减少了对肠杆菌科头孢菌素、氨曲南和氨基甲酰青霉烯类的敏感判断,检测出了包括ESBL、质粒介导的AmpC酶催化剂产生株在内的“临床意义”耐受力机制的氨基甲酰青霉烯酶催化剂(a、b和d类酶催化剂) 和联合(阻碍AmpC酶催化剂、产生ESBL、降低通透性等)耐受力机制不做ESBL、不改进霍奇(mht )的确认试验,缩短了报告时间的动物模型、

16、PK/PD分析、蒙特卡洛公式支持这一修订,临床效果和MIC值的相关性采用修订后的拐点可以减少更多地使用氨基甲酸酯青霉烯类和氟喹诺酮类药物报告ESBL,减少氨基甲酸酯青霉烯酶催化剂等药物耐受力机制株的选择性压力9。 常规剪纸法和商品化药剂易感性系统可升级到2010年CLSI药剂易感性标准的新点(药剂易感性测试浓度能够复盖新修订点和软件升级)实验室,在个体化治疗、医师选择药剂方面,特别是各级医院在政府抗微生物剂药剂的CLSI对头孢菌素和静脉用头孢呋辛、头孢吡肟、头孢替胺和头孢西丁的要点进行了重新评价,头孢西丁由于目前的临床试验数据和符合PK/PD的头孢替胺没有一盏茶数据萨通讯端口,未改变拐点的头孢

17、吡肟和头孢吡肟按照标准推荐的剂量进行治疗CLSI没有评价氧头孢替胺、头孢西尼、头孢菌素和头孢歌舞剧酮的折扣点,考虑到应用这些个药物治疗大肠菌群、克雷伯菌或变形杆菌感染,需要进行ESBL试验。(6)流感嗜血杆菌:产内酰胺酶对氨西林和阿莫西林产生耐受力(TEM-1型)。 内酰胺酶阴性氨苄青霉素耐受力株(BLNAR )的耐受力机制是ftsI基因突变,PBPs对-内酰胺酶的亲和性降低,BLNAR菌株导致了氨西林和-内酰胺酶阻化剂的复方药、一代和两代头孢烯耐受力。(7)淋球菌:产内酰胺酶阳性对青霉素、氨西林、阿莫西林产生耐受力。 在内酰胺酶试验中可以迅速且正确地检测出介由质粒的青霉素耐受力。 染色体介导

18、的耐受力采用纸片法和琼脂稀释MIC法进行测定。2 .大环内脂质药物的耐受力反应历程宏命令内酯类、磷酰胺类和链霉亲和素类有不同的化学结构,但有类似的作用机制,受同一药剂耐受力机制的影响。 当所有细菌对红细胞吉卜赛人素敏感,检测到中度敏感或耐受力时,可根据红细胞吉卜赛人素的结果,报告同种药物的敏感性,如红细胞吉卜赛人素、克拉红霉素。 来自葡萄球菌属、青霉素过敏宫内孕女性的b群链球菌,红色吉卜赛人霉素耐受力以克林霉素易感性,进行克林霉素诱导试验(d试验)测定MLSb的耐受力状况,阴性则报告克林霉素敏感性阳性, 一旦产生rib抗性基因使MLSb耐受力,或产生泵的排出反应历程,就报告克林霉素耐受力,“根据克林

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