血培养的最佳实践.ppt

1、重视血流感染规范送检血培养标本,BD临床诊断部门 宋伟 2018.3.14,2015年标本培养状况,江苏省人民医院 培养标本25746份 12% 香港玛丽医院 培养标本276215份 14.5%,血培养重要吗？,血培养是血流感染检测中最有价值的诊断工具,阳性血培养能确定血流感染中的病原体,抗菌药物敏感试验，指导抗菌药物治疗,3,1.3 阳性血培养的临床意义,阳性血培养能显著改善治疗而降低死亡率,A = Appropriate Therapy（正确治疗） I = Inappropriate Therapy（不正确治疗） Clin Infec Dis 24:584-602, 1997,共同优化血培

2、养的流程,护 士,医 生,检验科,沟通-有效的连接检验科微生物室与临床科室！,一、血培养概念与意义,1.1 血培养概念,采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测. 检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在. 如有细菌,则极有可能为致病的细菌. 进一步进行鉴定/药敏试验.,根据培养结果： 选择正确的抗感染治疗方案 或调整经验治疗方案 判断感染性疾病的类型 评价疗效及预后 正确采取感染控制措施 是否隔离 减少院内感染,1.2 血培养检测的意义,血培养是诊断血流感染的金标准,国内血培养现状 阳性检出率低10%（国外约为15）,血流中含菌量低 血液中抗菌物质 抗生素的应用 培养条件限制,

3、血培养的临床实践 欠规范！,原因何在？,二、血培养的规范实践,CLSI Principles and Procedures for Blood Culture; Approved Guideline (M47-P,2006),血培养临床实践指南,美国【临床实验室标准化协会】,采血指征 采血时机 采血套数 接种血量 消毒灭菌,血培养的关键要点,问题： 血培养的指征是什么?,中华医学会检验医学分会建议一般患者 出现以下一种体征时可作为采血的重要指征,发热( 38 ) 或低温( 36 ) 寒战 白细胞增多(计数大于10.0 109/ L ,特别有“核左 移”时)皮肤黏膜出血昏迷多器官衰竭血压降低C

4、反应蛋白,PCT，SAA升高血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等,摘自：血培养检测规范化操作，主编：徐英春、倪语星、王金良，上海科学技术出版社,怀疑血流感染时应常规行血培养,怀疑血流感染，何时采血最佳？,0,30,60,体温与细菌浓度并不完全同步,体温,寒战,血培养,菌血症的水平,0,30,60,时间 (分钟),17,寒战时，体温高峰前采集最好。但是错过了没关系 体温峰值采血，并不显著增加阳性率 J Clin Microbiol. 2008;46(4):1381-5. Ann Oncol. 2007，18(11):1870-4.Pediatr Rep. 2011，3(1):e4.,怀疑血流感

5、染，何时采血最佳？答 案：,问题： 应该采几套血液标本?,19,血培养：“一套”或“一份”的定义,“一次静脉穿刺 + 2个血培养瓶”= “一套或一份血培养”,20,指南中强调：血培养至少送2套4瓶,在发热开始的24 h内进行血培养。 尽力保证在抗感染治疗前获得首份血培养标本。 同时经2个独立部位抽取血标本，此结果比单一部位的血培养更有临床意义。除外新生儿外，不建议只进行单套血培养（级）。 48-96 h后评估治疗效果，再次血培养不能单取1套，必须同时抽取2套标本（级）。 但对怀疑血管内的感染，则应该间隔一段时间取不同部位的静脉穿刺抽血，有助于诊断持续性菌血症（级）。 成人：任何时候，绝对不能只

6、送一瓶！,Crit Care Med 2008 Vol. 36, No. 4；CLSI指南；英国指南,Cockerill, CID 2004,血培养套数与阳性检出率（）,65,80,96,99,表皮葡萄球菌的临床意义,Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333,问题： 为什么要做厌氧培养？,资料显示：16%的链球菌和17%的肠杆菌科细菌血培养时仅厌氧瓶报告阳性1,根据文献，厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外对葡萄球菌，肠杆菌科细菌以及苛养菌的检测有优势,1.Bartlett JG, Dick J. The controversy regarding routine

7、 anaerobic blood cultures. Am J Med , 2000, 108: 5052506. 2. Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 2172219.,Khanna等2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培 养结果分析显示: 640份血培养阳性,阳性率为9% 需氧和厌氧瓶同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19%,厌氧培养的研究分析,厌氧瓶平

8、均报阳时间快于需氧瓶,小时,提高厌氧菌感染患者的诊断率 提高临床常见兼性厌氧菌的检出率 早期报告时间 保证了足够的采血量,厌氧培养的意义,问题： 应该采集多少血液?,采血量与检出率的关系,每增加1毫升，成年人真性菌血症阳性检出率增加3,要采集多少血液?答 案：,采血量是影响灵敏度最关键因素 成人一份标本2个培养瓶（需氧厌氧），每瓶810ml，共20ml；要求至少采两份标本，即40ml。 儿童一般只需采集儿童需氧瓶，在保证采集血量1总血量下，一般为13ml 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染,BD BACTEC 每个瓶都清晰显示最佳采血量,利用瓶身刻度准确

9、采血,CLSI推荐全自动系统只需孵育5天 90%阳性标本可在12小时内被检测，36小时内可检测出99%的阳性标本。 与孵育7天相比，只有0.3%有临床意义的阳性血培养在5天内不能被检出。设定5天为孵育周期是最具有性价比的。,Huang, et al., European Journal of Clinical Microbiology 17: 637. 1998,(Cockerill, et al. CID 2004),血培养孵育时间,问题： 如何进行消毒与标本采集？,血培养的采集：无菌操作,血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。 所以要最先采集血培养标本。 污染率的指标

10、是 3% （100份标本里只能有不到3个标本出现污染）,护理老师们，您知道您有多重要！,75%乙醇擦拭静脉穿刺部位，等待30秒,1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒，从穿刺点向外画圈消毒,直径1.5-2cm.,用75%乙醇消毒 60秒（脱碘），待酒精挥发干燥后采血.,注意：对于碘过敏的患者，只能使用75乙醇消毒60秒，待酒精挥发干燥后采血.,细菌是干死的，不是淹死的,皮肤消毒程序（三步法）：,其他皮肤消毒方法,洗必泰使用方法： 葡萄糖酸洗必泰作用30 秒，但不适用于2个月以内的 新生儿。,安尔碘使用方法： 原液均匀涂擦二遍，或用原液直接喷于消毒部位二次。作用1-2分钟。（参照厂家说明书）,细菌是干死的，不是淹死的,培养瓶的消毒程序：,去掉培养瓶口的塑料瓶盖。 75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。 自然待干。 将标本注入培养瓶内。 5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。 （儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）,细菌是干死的，不是淹死的,医院常用血培养瓶,采集标本前：于室温保存，切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使用。 采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室温，