肿瘤超微病理ppt课件

1、，1，肿瘤微病理，病理学和周秀田。20，30年代成功开发了电子显微镜，直到20世纪50年代初，逐渐应用于生物和医学领域的所有领域。在过去的50多年里，电子显微镜和电子显微镜样品制备技术得到了很大的发展，取得了令人瞩目的成果，特别是在促进分子生物学、细胞学、组织学、微生物学和病理学方面，发挥了很大的作用。肿瘤细胞超微结构的研究也是其中之一。肿瘤超微结构研究不仅需要性能优秀、技术力量出众的电子显微镜，还需要适合电子显微镜观察、质量好的样品。透射电子显微镜的主要特点和超薄切片技术简介。发展史、3，电子显微镜类型，透射显微镜，扫描电镜，超高压电子显微镜和分析电子显微镜。一般称为电子显微镜是指具有以下特

2、征的：分辨率能力强的透射电子显微镜：分辨率高是电子显微镜最重要的特征，所谓分辨率技术是能够区分两个相邻点的最小间隔。人眼分辨率技术可以为0.1毫米，光学显微镜为0.2米，电子显微镜为2A左右(1微米=10000A)。4，电子显微镜在医学和生物学中的应用，大部分用于观察正常或病理状态的细胞或组织。这些细胞或组织需要制作适合电子显微镜观察的样品，其中最常见的是超薄切片。为了维持细胞超微结构的生物电状态，在样品制备过程中尽量不发生人的变化，保证观察效果，超薄切片与制备方法上石蜡切片类似，还经过提取、固定、脱水、浸泡、嵌入、切片、染色等过程。但是超薄切片在制造中也有其特点。超薄切片的制造方法，5，超薄

3、切片的制造方法，(1)为了保持细胞结构的生物电状态，组织在体内取出后的最短时间内投入固定液，以防止细胞在缺氧状态下发生变化。一般想在一分钟内投入固定液。组织体积要小，例如用戊二醛固定液预先固定(厚度3mm，长宽比1mm左右)。用锇酸固定液固定，组织大小必须小(1毫米)。抓住组织的时候，刀的剪刀要锋利，工作要轻，避免挤压。6，超薄切片的制备方法，(2)固定预先固定pH值为7.4，2%或3%的戊二醛固定液。固定液先放入卷边或冰箱，使用时取出。预先制作的固定液过一段时间后pH值可能会发生变化，必须重新测量并调节。戊二醛固定液中固定的组织可以不立即嵌入，放入冰箱(4)保存，但时间不要太长。否则，可能会

4、影响样品的反差。嵌入前一天，从戊二醛固定液中取出组织，用盐水洗几次，然后通宵放入盐水中，第二天再固定1%的饥饿酸固定浓度(PH7.4)，不要花太长时间。否则，组织容易破碎，变硬，不容易切片。7，超薄切片的制造方法，(3)脱水固定在饥饿的酸固定液中的组织，先用盐水冲洗两三次，然后从低浓度到高浓度的丙酮或酒精脱水。用丙酮脱水时，按顺序从30，50，70，90%到纯丙酮。如果被酒精脱水，则依次使用30，50，70，90%的酒精研磨成90%的丙酮，进入纯丙酮。8，超薄切片制造方法，(4)浸泡和嵌入超薄切片样品，通常最常用的嵌入剂是环氧树脂。以嵌入剂(作为固化剂的马来酸酐)嵌入环氧裴秀智618，组织脱水

5、后，用丙酮和环氧混合液、纯环氧裴秀智、嵌入溶液依次浸泡。9，超薄切片的制备方法，(4)胃浸泡后，放入胶囊嵌入溶液。制备环氧嵌入溶液是在树脂中适量添加固化剂、增塑剂和促进剂。赵霁中要注意药品的纯度。潮湿变质的试剂常常不能很好地聚合，组织太软、不均匀、切片困难等嵌入失败。组织进入胶囊后，在80烤箱中放置24小时以上，树脂完全聚合，变硬。，10，超薄切片的制造方法，(5)组织块、光学位置和切片聚合后的组织块，取出胶囊，从组织一端到锥形塔，顶部表面约1毫米。将光学或超薄切片器切成1厚度的半薄切片，放在幻灯片上，染成米蓝色或苏格宁李红。用光学显微镜观察后，在电子显微镜确定需要观察的位置后，将组织削得更小

6、，利用超薄切片，切成薄片，捞起有膜的铜网络。如果层切面较大或为连续层切面，也可以使用无膜铜网。11，超薄切片的制造方法，(6)染色超薄切片的染色，不是将重金属盐(柠檬酸铅、醋酸铀等)和细胞内结构结合起来，加强电子的散射，增加图像的反差，用染料染色。染色由单盐和复盐组成，单盐由柠檬酸铅湾，复盐由醋酸铀和柠檬酸铅组成。在70丙酮中加入饱和的乙酸铀，组织停留4个小时左右，继续脱水的方式，也可以在组织脱水过程中染色铀。12，概述(a)，据悉，大多数肿瘤可以依靠光学显微镜作出明确的诊断。但是也有即使使用特殊染色也很难做出明确诊断的事例。在这种情况下，电子显微镜(也称为电子显微镜)可以帮助病理学家进一步观

7、察肿瘤细胞的内部结构及其与周围组织的关系，并说明肿瘤的组织学类型和组织发生学。13，概述(2)，一般肿瘤的诊断性超微结构观察包括(1)细胞之间的相互关系。(2)细胞外板(外膜)。(3)细胞轮廓。(4)细胞之间的连接。(5)细胞质颗粒。(6)细胞质纤维。(7)细胞质液泡或包裹。(8)细胞器官的结构、数量和分布。(9)核和核。(10)癫痫等。14，目前透射电子显微镜能解决的主要问题有1，肾炎类型的鉴别诊断2，肿瘤的鉴别诊断肉瘤和癌症的鉴别诊断。未分化鳞状细胞癌和腺癌的鉴定；黑色素瘤和其他肿瘤识别；内分泌肿瘤；小圆细胞肉瘤的鉴别诊断；软组织肿瘤的鉴别诊断，概述(3)，15，各种组织衍生肿瘤根据细胞超

8、微结构有其特点。因此，通过电子显微镜观察肿瘤细胞的超微结构，有助于识别肿瘤的组织类型。特别是细胞质的小器官，对分泌粒子的结构、数量、分布等有很大的意义。细胞表面结构和细胞相邻关系同样重要。相对来说，核的结构与肿瘤组织类型关系较小。总论，16，1，分泌颗粒细胞质内分泌颗粒，刚缠绕在它的表面。但是粒子的大小、形状、中心结构、数量、细胞内分布各不相同，具有一定的特异性，对决定肿瘤细胞的特性和诊断有一定的帮助。总论，17，18，(a)粘液粒子产生粘液的上皮细胞的肿瘤，在不同程度上可以保持细胞内产生粘液的特征。粘液粒子或粘液包的直径为0.51.5u，包含电子密度低或低的物质的外膜为精细或微网状。总论，1

9、9，总论，癌细胞内的粘液包可以填充全部的细胞质。电子在光显微镜下不能轻易发现，而在电子显微镜下可以看到。在产生粘液胞等分化低的细胞中，这种癌细胞似乎来源于粘液上皮。20，21，(2)酶粒子酶粒子是粘液粒子大，直径12um，有外膜包裹，中心电子密度大的腺泡细胞的产物。这些粒子是acinar细胞的信号。正如癌细胞形成线内，酶粒子存在一样，可以考虑acinar细胞癌(涎腺和胰腺外分泌腺)。，总论，22，(3) APUD细胞粒子：APUD细胞，神经嵴发生的内分泌细胞，20多个细胞形成肿瘤，统称APUD肿瘤，这些肿瘤细胞的共同特征可分为细胞质内的APUD粒子，形态上的5种。总论，23，总论，(1)小粒子

10、，直径200400nm，圆形纹理，均匀性，电子密度，(2)大粒子，直径，24，总论，(3)粒子为多态(梨、鼓或卵圆形)，纹理均匀，电子密度，(4)致密的核心粒子，粒子中心的致密核心，核心和粒子周围透明或低电子密度区域，25，总论，(5)粒子具有不规则晶核，粒子外部有膜包(岛的细胞)。APUD粒子必须以形态识别溶酶体。26，APUD颗粒主要出现在以下肿瘤中，(1)类癌可根据发生部位分为三种类型。I前肠类癌(胃、十二指肠、胸腺和支气管)，这些颗粒小、均匀，含有5-HTP或组胺；I中肠类癌(包括工厂、回肠、阑尾和右半结肠)、大颗粒、多形性、血清素；总论，27，总论，I I后肠类癌(左半结肠和直肠)大

11、圆形颗粒。95的类癌发生在消化系统(胃、肠、胰、肝和胆囊)，其余5发生在支气管、胸腺、卵巢、甲状腺或尾部畸胎瘤。28，(2)胰岛细胞瘤，3种类型的粒子。粒子是具有密集核心和明亮光晕的粒子，粒子是结晶型核心粒子(胰岛素瘤)，粒子的大小和密度不同。总论，29，总论，(3)嗜铬细胞瘤，有两种粒子：大粒子，圆形或椭圆形，中间电子密度，周围极窄的亮区，肾上腺素的生化特性，另一种粒子是空泡，具有正肾上腺素的生化特性的致密偏压芯。(4)垂体腺瘤、甲状腺癌、甲状腺瘤都有细小、圆形纹理细密的颗粒。(。30，31，32，(33)，(4)黑色素体中的含黑色素细胞可分为两类，包括黑色素生成细胞、黑色素细胞和黑色素生成

12、细胞内的黑素小体，根据其发展过程，可分为四个阶段。通过第一期细胞内粗糙的面内网络合成的酪氨酸酶，形成了多层平行膜结构，该结构由无黑色素、通论、34、第二包裹结构约10nm的间隔组成，在此期间没有形成黑色素，在第三阶段，酪氨酸酶在多层膜结构中对酪氨酸或酪氨酸氧化中间物的多巴胺进行氧化，从而形成黑色素，因此第三阶段的黑色素具有黑色素的多层膜相似结构。本论，在35，4期，黑色素小体内所有酪氨酸酶都为酪氨酸酶起作用，掩盖黑色素小体的膜上结构。有些黑色素瘤细胞有黑色素瘤小体，但在光内镜中看不到的非常少的黑色素形成，这种肿瘤被称为无黑色素瘤黑色素瘤，在光学显微镜下容易与其他未分化的癌症混淆。用电子显微镜观

13、察黑色素瘤的确诊具有重要意义。总论，36，37，38，总论，(5)粗糙面内内质网肿瘤细胞可以徐璐有其他数量的粗糙面内内质网。腺上皮细胞和局部蛋白质功能旺盛的细胞衍生肿瘤，肿瘤细胞内粗糙表面内质网丰富。特别是肝癌，皮质肿瘤，卵巢癌和浆细胞瘤突出。胃癌、大肠癌、肺癌、乳腺癌中也含有丰富的粗面内质网，未分化或小细胞型恶性淋巴瘤细胞中几乎没有粗面内质网。39，40，41，42，总论，(6)微丝的许多肿瘤细胞中最常见的是鳞状细胞癌。可以看到细胞质由张力微丝组成的张力原纤维分散。这对鳞状细胞癌的确认有重要意义。此外，脑膜瘤、星形细胞瘤、乳腺癌的肌上皮细胞、膀胱移行细胞癌等肿瘤细胞内大量微丝也很引人注目。这

14、种微丝比张力微丝细，不是束，是分散分布。43，44，总论，(7)微管可以在星形胶质细胞瘤、树突神经瘤、旁观者膜瘤、神经母细胞瘤及髓母细胞瘤中徐璐看到不同数量的微管。微管经常多发平行分布。45，总论，(8)线粒体肿瘤细胞内线粒体的数量与起源组织细胞内线粒体的数量有关。大体上有减少，但也有局部堆积或普遍增加的现象。其中甲状腺、甲状旁腺、涎腺的嗜酸细胞瘤和骨巨细胞瘤的巨细胞，如细胞质中所示，大量线粒体几乎填满了所有细胞质，但几乎没有其他小器官。46，47，48，49，50，51，总论，(9)溶酶体一般只在个别细胞或少量细胞中发现。但在某些肿瘤中更常见。其中更突出的是颗粒肌母细胞瘤。肿瘤细胞中出现很多

15、溶酶体。此外，组织细胞型恶性淋巴瘤、肝癌及大肠癌细胞中也有更多的溶酶体。52，53，总论，(10)核蛋白在未分化癌、未分化癌及淋巴组织肿瘤的细胞质中往往是丰富丰富的自由核蛋白，其他细胞器较少。54，55，总论，(11)地质脂肪肉瘤，肾透明细胞癌，皮脂腺癌的癌细胞质中可见圆形脂质滴剂。小水滴周围清晰，内部均匀，电子密度中等。一些癌细胞在退化时可能表现出脂质。例如退行性肝癌细胞中经常发生脂质，周围不规则，内部结构不均匀。56，57，总论，(12)糖原肿瘤细胞可以有不同数量的糖原，有些肿瘤更重要。例如，肾透明细胞癌、肾母细胞瘤、睾丸精原细胞瘤和骨尤文肉瘤的肿瘤细胞富含尤文氏肉瘤、神经母细胞瘤、恶性淋

16、巴瘤鉴别诊断所需的糖分。在鳞状细胞癌或大肠癌中，丰富的糖原也很引人注目。58，59，总论，(13)肿瘤细胞表面起源于微绒毛腺上皮细胞，在自由边缘经常可见多种微绒毛。可以分为两种：被简单的细胞质膜向外折叠的突起，像手指盖一样的形状，绒毛中心没有除少量核蛋白以外的其他结构。肾根小管上皮细胞及胃粘液细胞表面的微绒毛。绒毛中心由细丝组成的另一个轴，可以延伸到细胞质内部，这就像肠子吸收细胞表面的微绒毛一样。60，61，总论，(14)纤毛肿瘤细胞少纤毛，旁观者膜细胞表面更为明显。在个别肺癌中，郑智薰咽癌、垂体瘤、甲状旁腺腺瘤的个别肿瘤细胞偶尔能看到纤毛。纤毛的剖面，62，63，总论，(15)基底上皮组织衍

17、生肿瘤细胞块周围经常有基底包裹。当肿瘤细胞向外侵袭性生长时，肿瘤细胞表面的脚状突起基底向间质方向延伸。起源于Interleaf组织的肿瘤细胞周围通常没有基底。神经鞘瘤及平滑肌肿瘤的肿瘤细胞周围常见。桥粒可见于64，65，普通论(16)上皮组织的肿瘤细胞之间。其中鳞状细胞癌最明显。桥粒和细胞质内的天然碱纤维是判断鳞状细胞癌超微结构的主要依据。腿部粒子也可见于其他类型的上皮，如腺上皮，柱状上皮和移行上皮，起源于实际器官(肝脏脏)的肿瘤细胞之间。66，总论，但这种腿一般发育不良。未分化或未分化的上皮肿瘤细胞间腿部颗粒极少，有时很难找到。桥粒在一些不是上皮组织的肿瘤中也可见，如脑膜瘤、中皮瘤、滑膜瘤。67，68，整体论，(17)紧密连接，主要发现于腺上皮和柱状上皮的来源肿瘤细胞之间。有些腺癌分化较小，只有电子显微镜才能看到肿瘤细胞包围的微小空洞。围绕微腔的肿瘤细胞之间紧密连接，微腔表面可见微绒毛。这个微小的