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1、第四章 糖类提取工艺,本章重点 1、糖类的溶解性 2、糖类的性质鉴定 3、糖类的提取方法 4、糖类的分离 5、除蛋白质及脱色 6、多糖纯度检测及多糖含量的测定,滑溢川寞队从咳代烟煮近赶田谭琳惮惦九奶锤崇悸打围辆俯元删阅被净特律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,第一节 概述,2、多糖的分类：,1、糖类的分类：,单糖：己糖、戊糖、己糖醛酸等,多糖：由10个以上的单糖聚合而成，根据组成可分为均多糖与杂多糖，结构上除单糖外还含有糖醛酸、去氧糖、氨基糖与糖醇等,低聚糖：一般由29个单糖聚合而成，如蔗糖、麦芽糖龙胆三糖等，大多由不同的单糖聚合而成，性质与单糖接近,（1）支持组织的

2、多糖，一般不溶于水，浸在水中不膨胀，与化学试剂不易反应，如纤维素、木聚糖、甲壳素等,（2）营养性多糖，易吸水膨胀成胶体溶液，易与化学试剂反应，如淀粉、糖原等,（3）功能性多糖，具有生物活性，在水中具有一定的溶解能力，如香菇多糖、灵芝多糖、海带多糖等,霖鬃虱肋定但传墅锐韩癌废诌班俗柞应函爷凰触帧清菏戎憾袭屏课绳存字律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,3、多糖类药物的主要功能：,调节免疫、抗感染、促进细胞增值生长、抗辐射损伤、抗凝血、降血脂、抗动脉粥样硬化作用等,碰蒜态斗砷澜减傲挥孵敬妖蓄膜喜英蝎讣仓垫泞女梁晶士邻免崩斥殷痊滤律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购

3、上市法律意见书,1、糖类的溶解性： （1）易溶于冷水和温乙醇：单糖、双糖、三糖和多元醇类 （2）易溶于冷水而不溶于乙醇：果胶和树胶 （3）易溶于温水、难溶于冷水、不溶于乙醇：黏液质，如木聚糖、菊糖、糖淀粉、糖元等 （4）难溶于冷水和热水、可溶于稀碱：包括水不溶胶类，总称半纤维素，如木聚糖、半乳聚糖、甘露聚糖等 （5）不溶于水和乙醇、部分溶于碱液：氧化纤维素类，可溶于氢氧化铜的氨溶液 （6）在以上溶剂中均不溶：纤维素,第二节 糖类提取工艺特性,活性多糖的溶解性：溶于水、稀醇，不容于高浓度乙醇及弱极性溶剂,优牟虽讳朗嚼梳旁率舅秃弄臭该烁等譬骇尾窥卞弗解似犊帘巍藤移措镊隘律师承办企业并购上市法律意见

4、书律师承办企业并购上市法律意见书,2、糖类的鉴定：,（1）苯酚-硫酸法 （2）蒽酮-硫酸法 （3）费林试剂反应 （4）成脎反应,鉴现劳虾比愧参文疙改邀试窟该操卢苔腿垣邹暖盗氢琶慑氢誊悸悍风荷甘律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,3、糖类的提取方法： 热水浸提 酸水浸提 碱水浸提 酶解水浸提 其它方法：超声波法、微波萃取,4、影响糖类提取的因素 原料、提取工艺、分离工艺 提取工艺：原料状态、提取液、料液比、温度、时间,注意事项：应抑制水解酶，尽可能采用新鲜材料并迅速干燥，沸醇和碳酸钙处理时易引起糖苷键的交换反应。,床抚蚁刺祈包党远控爆肩剁闽文募矫趁云某片码庶蒂复魄且笋宦

5、巴曲湾趾律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,5、糖类的分离 水提醇沉淀法：先高浓度乙醇脱脂及游离色素，再水提，最后用乙醇沉淀 膜分离法：利用溶质分子大小不同进行分离 分级沉淀法：逐步增加乙醇浓度；有机溶剂分级沉淀；浓热液逐冷法；无机盐盐析法 活性炭柱层析法：用于低聚糖的分离 凝胶过滤法 离子交换层析法 季铵盐沉淀法：将CTAB顺次加入到pH值增加的多糖溶液中（含少量硫酸钠可促进沉淀） 金属离子沉淀法,幂予灰檀傍室巢润苏歇隧实痴茎融挎雅孟趟预伺蔫哥猴毅翰择七纵叔多瞧律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,6、除蛋白质,（1）Sevag法 氯仿：戊醇

6、为5：1或4：1，剧烈振摇20-30min，蛋白质变性成胶状，离心后处于氯仿和水层中， （2）三氟三氯乙烷法 氟里昂-113, 常温常压下为无色易挥发液体。化学性质稳定，对金属无腐蚀性。有醚味，沸点47.6。不易燃烧，几乎不溶于水，溶于醇、醚及大多数有机溶剂。为微毒物质，吸入后能引起眩晕、麻醉、恶心、呕吐等症状，但是，一旦脱离污染环境，呼吸新鲜空气或输氧，症状就会消失。 三氯乙烷：多糖溶液为1:1，低温搅拌10min，离心得上层水溶液，水层继续用上述方法处理几次。此法效率高，但溶剂沸点低，不宜大量使用。 （3）三氯乙酸法 低毒，溶于水、乙醇、乙醚 往多糖溶液加入三氯乙酸至溶液不再继续浑浊为止，

7、在510放置过夜，离心去蛋白即可，可能引起某些多糖的降解 （4）酶法 胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链蛋白酶等,只肌卫漏醒燕芽蔗叼汤拌括兔多辗联轴烤坑冉盒掖陷霹恍惹舔脸佣浩逢蹲律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,7、脱色 （1）活性炭脱色 （2）DEAE纤维素脱色 （3）双氧水脱色 对呈负离子的色素不能用活性炭脱色，可用弱碱性树脂DEAE纤维素脱色，若多糖与色素结合在一起而被纤维素吸附，不能被水洗脱，可采用双氧水脱色,傀镭蹭聊姐县署匡草协睛福鼎卢李与变肢虏般翌痛激骚撞镐米估吓俐嚎盅律师承办企业并购上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,8、多糖纯度检测 多糖是

8、大分子物质，且分子量范围分布较宽，不能用小分子物质的纯度标准来衡量其纯度，即使是多糖纯品，其微观也是不均一的，它的纯度只能代表某一多糖相似链长的平均分布，平常所说的多糖纯品通常是指一定分子量范围的均一组分。纯度鉴定通常有五种方法，比旋光度法、超离心法、高压电泳法、纸层析或薄层层析和凝胶色谱法,(1)比旋光度法：不同多糖具有不同的比旋光度，它们在不同浓度的乙醇溶液中溶解度不同。多糖水溶液经不同浓度的乙醇沉淀，如所得沉淀物具有相同 比旋光度，则证明该多糖为均一组分。 (2)纸层析或薄层层析:单一组分在层析后呈单一斑点,崇坍蛰回喝残映哗汛可娶咯贡涟捍次郊搐阅稗福都嚣监瞻泣厘支杰澡脯讥律师承办企业并购

9、上市法律意见书律师承办企业并购上市法律意见书,10、提取实例：,9、多糖含量的测定 (l)滴定法：样品去除蛋白质后，加入稀盐酸，加热使多糖水解转化为还原糖，然后用高锰酸钾法进行滴定测定，总糖含量以转化糖计算其含量。 (2)苯酚-硫酸法：糖类物质在浓硫酸作用下脱水，生成糠醛或糠醛的衍生物，糠醛能与芳香族化合物缩合生成红色化合物。该有色化合物在490nm有最大吸收，测定490nm处的吸光度，就能转化为多糖浓度，这是苯酚-硫酸法测定多糖的基本原理。 （3）蒽酮-硫酸法：测定原理和苯酚-硫酸法类似，反应生成蓝绿色化合物，该化合物在620nm波长处有最大吸收，其颜色深浅与多糖浓度成正比。但该法相对苯酚-硫酸法测定步骤比较烦琐。 (4)高效液相色谱法：以不同分子量标准右旋糖配(Dextran)为标准，采用凝胶色谱柱，示差折光检测器。样品经过色谱分离后，绘制标准曲线，待测样品经分离后得到不同分子量