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文档简介
1、流式细胞术,1,细胞染色,制备单细胞悬液 上机获取数据 数据分析,2,PMT,PMT,PMT,PMT 4,Dichroic,Filters,Bandpass,Filters,流式细胞检测原理,Laser,1,2,3,4,Flow cell,3,流式数据表现形式,FS:细胞大小 SS:胞内颗粒性,4,流式血液肿瘤数据分析步骤,1 、寻找异常细胞 2、 定义异常细胞 -异常细胞是什么细胞? -异常细胞的量有多少? 3、结论,5,如何寻找异常细胞?,6,正常细胞群的分布,CD45:白细胞共同抗原,表达于所有白细胞,7,异常细胞群,8,异常细胞群,9,异常细胞的量如何计算?,10,流式如何定义细胞?
2、-以白血病细胞表达的抗原标志作为依据,11,粒细胞成熟过程,12,不同阶段粒细胞CD分子的表达情况,13,单核细胞的成熟过程,14,不同阶段单核细胞CD分子的表达情况,15,红系的成熟过程,16,B淋巴细胞成熟过程,17,T淋巴细胞的成熟过程,18,其他血液系统肿瘤的特异性标志 毛细胞性白血病:CD19+,CD103+, CD11c/CD22双阳性高表达 CLL:CD19+/CD5+ CMML:CD14+/CD68+/CD13+CD33+/高SSC MM:CD19+,CD38+,19,流式报告单的结论如何得出?,20,21,病例分析,22,病例一,异常细胞,23,髓系?淋系?,24,25,流式
3、细胞术检测结果表明骨髓细胞中髓系母细胞(CD34+或/和CD117+)约占骨髓细胞总数32%;同时伴有单核细胞系列分化倾向的细胞约占骨髓细胞总数约70%。结果符合急性髓性白血病伴单核细胞系列分化(AML-M5)。因为原始单核细胞幼稚单核细胞大于等于80为M5a,x小于80为M5b,在分界线上,所以不区分a,b.治疗方法类似。,淋巴细胞-4.2 T细胞占淋巴细胞44.9%,CD4:CD8=0.66,未见明显异常;NK细胞占淋巴细胞3.9%,未见明显异常;成熟B细胞占淋巴细胞40.7%,为多克隆B细胞,未见明显异常。 粒细胞-22.7 相对比例未见明显减少。免疫表型提示粒细胞发育成熟标记物表达紊乱
4、。 单核细胞-37.7 相对比例明显增多,其中约70%为成熟单核细胞,免疫表型为CD14+,CD64+,CD11b+, CD13+,CD33+,HLA-DR+和CD4+。 CD45 Dim-33.0 相对比例明显增多,为髓性原始/幼稚细胞,免疫表型为CD34+,CD117+,CD13+,CD33+和HLA-DR+。 非白细胞-0.2 未见明显异常。,26,病例二,27,28,淋巴细胞-41.5 T细胞占淋巴细胞70.9%,CD4:CD8=1.42,未见明显异常;NK细胞占淋巴细胞4.7%,未见明显异常;成熟B细胞占淋巴细胞17.6%,为多克隆B细胞,未见明显异常。 粒细胞-10.9 其相对比例明显减低,免疫表型未见明显异常。 单核细胞-4.9 未见明显异常。 CD45 Dim-36.1 主要为原始/幼稚B淋巴细胞,其免疫表型为CD34-、CD117-、CD19+、HLA-DR+和CD10+。 非白细胞-6.1 主要为细胞碎片。,流式细胞术检测表明结果原始/幼稚B淋巴细胞约占骨髓细胞白细胞总数30%, 其免疫表型为CD34-
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