农产品分析3-3.ppt

1、第六章 油脂及脂肪酸的测定第一节 概述,油脂是重要的生活资料，又是重要的工业原料 油脂是人类食物的重要营养物质之一。它不仅供给人们热量和脂溶性维生素，而且它在人体中参与合成肾上腺皮质激素，使人能抵抗外来的刺激和疾病的感染。人类如长期缺乏油脂食物，则将引起严重的机能混乱并丧失劳动能力。,油脂是作物中的重要化学成分，各种作物的油脂含量依作物种类、品种特性、栽培条件及成熟程度而异。被称为世界五大油料作物的油脂含量油菜中约含35-42、大豆约含17-20、向日葵约含44-54、花生含38-50、棉籽含17-30。,油脂除食用外，在工业上亦有极其广泛的用途， 如：制造肥皂、供照明、作润滑剂、制硬化油和涂

2、料 等。,脂类包括中性脂肪和类脂两大类物质。 中性脂肪主要是油和脂肪，通常是由甘油和三分子脂肪酸组成的三酰甘油酯。 类脂是那些性质类似油脂的物质，主要有磷脂、糖脂和固醇等，此外，也包括脂溶性维生素和脂蛋白。 油脂是油和脂肪的总称。通常把常温下的液体叫做油，如菜油、桐油；把常温下是固态的叫做脂，如猪油、羊油。油脂不论来自动物或植物体，不论在常温下是液态或固态，它们的水解产物均有高级脂肪酸和甘油。,油脂是高级脂肪酸与甘油所生成的高级脂肪酸甘油酯，是酯类的一种类型。其通式为： R1、R2、R3代表饱和烃基或不饱和烃基。它们可以相同，也可以不同。若R1、R2、R3均为饱和高级脂肪酸形成的甘油酯熔点较高

3、，常温呈固态，叫做脂肪，即为脂。若R1、R2、R3为不饱和高级脂肪酸形成的甘油酯熔点较低，常温呈液态，称做油。,脂肪是农产品中重要的营养成分之一。脂肪是人体组织细胞的重要成分，是一种富含热能的营养素，每克脂肪在体内可提供的热能比碳水化合物和蛋白质要多1倍以上。 它还可为人体提供必需脂肪酸亚油酸和脂溶性维生素，是脂溶性维生素的含有者和传递者。 脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白，在调节人体生理机能和完成体内生化反应方面起着十分重要的作用。,必需脂肪酸是组织、细胞的组成成分。它对线粒体和细胞膜尤为重要，在体内参与磷脂的合成，并以磷脂的形式出现在线粒体和细胞膜中。必需脂肪酸对胆固醇的代谢也很重要，只有当胆

4、固醇和必需脂肪酸结合时才能在体内转运，进行正常代谢。若必需脂肪酸缺乏，胆固醇将与饱和脂肪酸结合，不能在体内正常转运、代谢，并且有可能在体内沉积。 必需脂肪酸在植物油中含量较多，动物脂肪中含量较少。,饱和脂肪酸：现已证明，血浆胆固醇的含量可受食物中饱和和多不饱和脂肪酸所影响。饱和脂肪酸可增加肝脏合成胆固醇的速度、提高血胆固醇的浓度，易在动脉粥样斑块中沉积。 菜籽油消化、吸收慢，营养价值较低。特别是动物试验发现，当大量喂饲菜籽油时可引起心脏、肾上腺和骨骼肌暂时性脂肪渗入，并有坏死性和纤维性心脏损害。,但过量摄入脂肪对人体健康也是有害的。在人类的膳食中不能完全没有脂肪它在膳食中的重要性和可能发生的问

5、题，越来越为人们所注意因此，各种食品中的脂肪含量是重要的质量指标之一。,组成（composition） 脂肪是由一分子甘油和三分子高级脂肪酸脱水生成的。 油脂的结构与类型取决于脂肪酸，如果三个脂肪酸的R烃基相同，就称简单脂， 即醇与脂肪酸组成。如果脂肪酸的R烃基不同，则为复合脂。,脂类的组成、性质,性质（proporty）,物理性质（physical property） 脂类一般为无色，无臭、无味，呈中性，比重小于1，固体脂类比重约为0.8，液体脂类比重为0.915-0.940，脂肪不溶于水，而溶于有机溶剂，根据这点我们一般采用低沸点的有机溶剂萃取脂类。,化学性质（chemical prope

6、rty） a)水解与皂化（一切脂肪都能在酸、碱或酶的作用下水解为脂肪酸及甘油） b)氢化与卤化（利用氢化将液体油氢化成半固体脂肪，人造猪油）。 c)氧化与酸败,天然油脂暴露在空气中与氧会自发进行氧化作用，产生酸味，也就是我们所说的酸败统称哈败。 酸败是由于（1）脂肪中不饱和链被空气中的氧所氧化，生成过氧化物，过氧化物继续水解，产生低级的醛和羧酸，这些物质使脂肪产生不愉快的嗅感和味感。 油脂酸败的另一个原因（2）在微生物的作用下，脂肪分解成醇和脂肪酸，脂肪酸经过氧化后生成苦味及臭味的低级酮类。,另外，除上面几点以外，油在高温加热时发生劣变，在用油脂进行油炸食品的过程中，会因长时间高温加热使油脂产

7、生劣变，颜色加深，稠度增大，并且油易起泡。高温长期加热的结果是游离脂肪酸增多，另外不饱和脂肪还可聚合生成各种聚合物，其中的二聚物对人体的毒性较大，长期食用这种油脂可使肝脏肿大。,在食品生产加工过程中，原料、半成品、成品的脂类的含量直接影响到产品的外观、风味、口感、组织结构、品质等。 蔬菜本身的脂肪含量较低，在生产蔬菜罐头时，添加适量的脂肪可改善其产品的风味。对于面包之类的焙烤食品，脂肪含量特别是卵磷脂等组分，对于面包芯的柔软度、面包的体积及其结构都有直接影响。因此，在含脂肪的食品中，其含量都有一定的规定，是食品质量管理中的一项重要指标。,脂肪及脂肪酸的测定意义,是油料作物品种鉴定的基础； 是评

8、价油脂的营养价值和生理特性所必需的； 脂肪还是脂溶性维生素的良好溶剂，有助于脂溶性维生素（A、D、E、K）的吸收。 提供必需脂肪酸（亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸） 了解和改进提高油料作物含油量和油的品质是耕作管理、施肥等措施所必需的； 是评价油料作物的成熟程度和了解其生理生化过程的一种必备手段。 对生产过程的质量管理、实行工艺监督及其研究农产品的储藏方式是否恰当等方面都有重要的意义。,提取剂的选择及样品预处理,脂类在植物细胞和组织中存在形态可分为两类：一类为游离态，另一类为结合态。游离态油脂，如植物性油脂，常常大量存积于植物的贮藏器官中，以小滴形状而存在。这是榨油工业的基础。 另一类是与其他成分

9、相结合的脂类，存在于谷物等淀粉颗粒中以及植物营养组织中结合态的脂类。例如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白等，与蛋白质或碳水化合物等形成结合态。 对于大多数农产品来说，游离态的脂肪是主要的，结合态的脂肪含量较少。,提取剂的选择,脂类的结构比较复杂，到现在没有一种溶剂能将纯脂肪萃取出来，也就是说提取出来的都是粗脂肪。（大部分是脂肪，还有一些其他成分）。 脂类不溶于水，易溶于有机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有机溶剂。常用的溶剂有乙醚、石油醚、氯仿甲醇混合溶剂。其中乙醚溶解脂肪的能力强，应用最广泛。,乙醚（非极性）的优缺点 优点： a.乙醚的沸点低：34.6 b.溶解脂肪能力强,大于石油醚 缺点： a.

10、能被2%的水饱和 b.含水的乙醚抽提能力降低（氧与水能形成氢键使穿透组织能力降低，即抽提能力下降） c.含水的乙醚使非脂成分溶解而被抽提出来，结果偏高（糖蛋白质等） d. 乙醚易燃。,实验结果比较:,由此可见，使用乙醚时，样品不能含水分，必须干燥。而且使用乙醚时室内需空气流畅。因为乙醚在空气中，最大允许浓度为400ppm，超过这个极限易爆炸。 乙醚贮存在棕色瓶中，放置一段时间后，光下照射就会产生过氧化物，过氧化物也容易爆炸，如果乙醚贮存时间过长，在使用前一定要检查有无过氧化物，如果有应当除掉。 排除过氧化物的方法：过氧化物乙醚+FeSO4(少量)-可除掉过氧化物 检查过氧化物的方法。（注意事项

11、）,石油醚,石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少。没有乙醚易燃。使用时允许样品含有微量水分，它没有胶溶现象，不会夹带胶溶淀粉、蛋白质等物质。采用石油醚提取剂，测定值比较接近真实值。 对于乙醚、石油醚这两种溶剂适用于已烘干磨碎样品，不易潮解结块的样品，而且只能提取样品中游离态的脂肪，不能提取结合态的脂肪，对于结合态脂，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。有时可利用两种溶剂的优点，混合使用。,氯仿-甲醇,氯仿-甲醇是另一种有效的溶剂 它对于脂蛋白、磷脂的提取效率较高，特别适用于水产品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。,样品的预处理,样品的预处理方法决定于样品本身的性质，

12、牛乳预处理非常简单，而植物和动物组织的处理方法较为复杂。 粉碎 粉碎的方法很多，不论是切碎、碾磨、绞碎或者采用均质等处理方法，应当使样品中脂类物理、化学以及酶的降解都要减小到最小程度。,加海砂 有的样品易结块，用乙醚提取较困难，为了使样品保持散粒状可以加一些海砂，一般加样品的4-6倍量（目的使样品疏松，这样扩大了与有机溶剂的接触面积，有利于萃取）。 加入无水硫酸钠 因为乙醚可被2%水饱和，使乙醚渗入到组织内部抽提脂肪的能力降低，所以有些样品含水量高时可加入无水硫酸钠，用量以样品呈散粒状为止。,干燥 目的：提高脂肪的提取效率。 干燥时要注意温度： 温度过高（1）脂肪氧化 （2）脂肪与糖、蛋白质结

13、合变成复合脂； 温度过低：脂肪易降解 酸处理： 温度过高时脂与糖、蛋白质等接触，变成复合脂，产生复合脂后，不能用非极性溶剂直接抽提，所以要用酸处理。 对有些样品含有大量的碳水化合物，测定脂肪时应先用水洗掉水溶性碳水化合物再进行干燥、提取。,脂类的测定方法,由于农产品的种类不同，其中脂肪含量及其存在形式也不相同，测定脂肪的方法也就不同。 常用的测定方法有：抽提法、酸水解法、比重法、折光法、电测和核磁共振法等 过去测定脂肪普遍采用的是索式提取法，这种方法至今仍被认为是测定多种农产品脂类含量的代表性的方法，但对于某些样品测定结果往往偏低。,酸水解法测出的脂肪为游离态脂和结合脂全部脂类，由于磷脂可水解

14、，酸水解法不宜用于磷脂含量较高的农产品。 折光法：有精密折光仪的条件下，大批同种油料作物种子样品含油量的测定，采用简单快速而准确的折光法，最为方便。,第二节 脂肪的测定,油重法（索式提取法，抽提瓶增重法，经典方法） 原理 将已经过预处理而干燥分散的样品，用无水乙醚或石油醚等有机溶剂（乙醚：沸点34.6、石油醚：沸点3060、二硫化碳：沸点46.3、丙酮：沸点56.5、四氯化碳：沸点70、三氯甲烷：沸点61、苯：沸点80等）提取（反复经过抽提、蒸发、冷凝、回流、抽提循环过程 ），使样品中的脂肪进入溶剂当中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（粗脂肪）。,由于残留物中除了除游离脂肪外，还含有少量的

15、可溶于脂肪的有机酸、磷脂、糖脂、高级醇、石蜡、游离脂肪酸、色素、挥发油、香精、醛、酮、脂溶性的维生素等脂溶性物质，故只可称为粗脂肪， 多数食品中此类物质含量很少，可忽略不计。 为什么用索氏提取法测定脂肪测得的为粗脂肪?,适用范围,索氏提取法适用于脂类含量较高，结合态脂类含量较少（如油料作物和谷类作物籽粒中油脂的测定），能烘干磨细，不宜吸湿结块的样品的测定。 此法只能测定游离态脂肪，而结合态脂肪无法测出，要想测出结合态脂肪需在一定条件下水解后变成为游离态的脂肪方能测出。,方法,滤纸筒的制备 将滤纸剪成长方形8cm15cm ，卷成圆筒，直径为6cm，将圆筒底部封好，最好放一些脱脂棉，避免向外漏样。

16、 称取样品 将样品烘干磨细，称取一定量与纸筒封好上口，最好用测定水分的样品。 索式抽提器的准备 索氏抽提器由三部分组成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重。其它要干燥。,抽提 将装好样的纸筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量从提取管加入，加入的量为提取瓶体积的2/3 接上冷凝装置，在恒温水浴中抽提，水浴温度大约为55左右，可用滤纸检验，理论值抽提6-8小时，实际值3-4小时，但也根据样品性质来决定。 回收乙醚 当乙醚在提取管内即将虹吸时立即取下提取管，将其下口放到乙醚回收瓶内，使之倾斜，然后将提取瓶放到100-150烘箱烘至恒重。,计算 脂肪 % = (W2- W1

17、)/W 100 W2瓶和脂肪重（g） W1瓶子重量（g） W样品重量（g）,本法为索氏提取法，为脂肪提取经典方法，测定准确，但费时、费试剂。 本法测定的脂肪称乙醚浸出物或粗脂肪。 本法抽提所得的脂肪为游离脂肪，若测定游离及结合脂肪总量可采用酸水解法。 本法要求必须干燥无水，水分有碍有机溶剂对脂肪的抽提。,乙醚中不得含有过氧化物、水分或醇类。乙醚中约可饱和2的水分，水和醇会导致糖类及水溶性盐类等物质溶出，使测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时还有引起爆炸的危险，过氧化物可氧化脂肪使质量增加。 过氧化物的检查方法：取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过

18、氧化物，应进行处理后方可使用。,乙醚中过氧化物的阻化、抑制与除去：贮存乙醚时，可加入阻化剂以阻其氧化，如活性碳、活性氧化铝或苯三酚。 除乙醚中过氧化物：常用的有硫酸亚铁、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、氯化亚锡、锌与酸、钠与醇、铜与锌、高锰酸钾、氢氧化银和二氧化铅等。 多次实验结果表明,新鲜乙醚要比长期放置的乙醚测定结果低0.5%左右。,本法要求样品必须充分干燥和磨细，必要时掺以4-6倍干净海砂，无水硫酸钠，以助于燥。 样品中含水分会影响溶剂提取效果，造成非脂成分的溶出。 烘干样品的温度不能过高，否则将使脂肪氧化，或与蛋白质及碳水化合物形成结合态，以致乙醚无法浸提。,乙醚稍有残留，放入烘箱时也有发生燃烧

19、爆炸的危险。 乙醚在使用过程中，室内应保持良好的通风状态，仪器周围不能有明火，以防空气中有乙醚蒸气而引起着火或爆炸。切忌明火加热应用电水浴。 脂肪接收瓶反复加热时，会因脂类氧化而增重。质量增加时，应以增重前的质量为恒重。 对富含脂肪的样品，可在真空烘箱中进行干燥，这样可避免因脂肪氧化所造成的误差。,抽提是否完全，可凭经验，也可用滤纸或毛玻璃检查，由提脂管下口滴下的乙醚(或石油醚)滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下痕迹即表明已抽提完全。 提取瓶在烘箱中干燥时瓶口应侧倒45度放置，使挥发物易与室气形成对流，干燥较快。 自制滤纸筒的要求 滤纸包必须包裹严密，松紧适度。试样的粗细得当，绝不可出现渗漏试样

20、。宽度不大于浸提器的内径，其高度应低于虹吸管顶端，不应超过回流弯管，否则溶剂不易穿透，以至于脂肪不能提尽。,在抽提时，冷却管上端最好连接氯化钙管，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球，以防止空气中水分的进入及避免乙醚在空中挥发。 使用符合医药部门规定的脱脂棉。 样品浸提时间随样品种类(含油量不同)和浸提条件而定。 植物茎叶及谷物、大豆、油沙豆的种子： 68h（浸泡未浸泡） 油菜、红花、芝麻、花生、向日葵、蓖麻的种子 ：810 h,样品及醚抽提物在烘箱中干燥时，时间不宜过长，一般于100105下烘1.53h。有条件的可真空干燥。 备注：电烘箱105恒重法只适用于不干性油的水分测定，而葵花籽油、大豆油

21、的碘值在100-130左右属半干性油（130/40min定温定时烘箱法值得提倡）。因此，若想除去此两种油中水分不宜用“电烘箱105 恒重法”。 提取过程中若溶剂蒸发损耗太多可适当从冷凝器上经漏斗口小心加入适量溶剂补充。 含多糖及糊精的样品，应先以冷水处理，干燥后连同滤纸一并投入抽提器中。,提取温度一般以抽提温度以65-68较为宜，每min下滴乙醚130-160滴，确保每小时回流8次以上。 确保冷却水 抽提的全过程须注意守护，确保冷却水不断流。否则，乙醚急速蒸干，整个试验就前功尽弃了。对偶发断水现象，或对某些条件稍差，须有应急措施。可在电热恒温水浴旁另配一个冷水浴，以便在断水时快速将抽提器转移至

22、冷水浴暂停抽提，待来水后再抽提 平行测定结果的相对误差，大豆不得大于2，油料作物种子不得大于1。,对恒重的看法 GB5512-82粮食、油料检验粗脂肪测定法中规定：“抽提结束后，将抽提瓶连同瓶中的粗脂肪在105烘箱中烘至前后二次重量差在0.0002g 以内即视为恒重”。而在GB6433-86饲料检验粗脂肪测定方法中则规定：“对抽提瓶首先要求烘至两次重量差小于0.0008g为恒重；尔后，对抽提结束抽提瓶连同瓶中的粗脂肪要求复烘至两次重量之差小于0.001g为恒重”。,残余法（或滤纸包减重法，间接法） 方法原理 将样品烘至恒重，用能与脂肪混溶的有机溶剂除去脂肪，再烘至恒重，样品减少的重量（样品质量

23、和残渣质量之差）即为粗脂肪重量。,注意事项 如试样为高油脂含量的小粒油料作物种子，须与滤纸包一起，放入一小块滤纸在称量瓶中，以备研样和称样时擦净研钵及角匙上的样粒及油迹之用。 用铅笔编号。 平行测定的结果用算术平均值表示，保留小数点后两位数字。两次平行测定结果的允许相对误差，谷物不得高于5，大豆不得高于2，油料不得高于1.5。 试样包均捆在一粗玻棒上(防止样品包上浮)，放入浸提筒内，使样品包顶部低于泄液管虹吸高度。,油重法与残余法的优缺点,油重法 优点： 样品含有的粗脂肪，完全被抽提瓶回收，可以进一步分析样品脂肪酸组成及脂肪酸品质； 是经典方法，结果准确、可靠，重现性好。整个过程在样品绝干状态

24、下进行，实验结果产生误差的机会小。,缺点： 长时间烘干，抽提瓶会在恒重之后又增重，主要原因是粗脂肪有可能在抽提瓶内发生氧化反应使重量增加，粗脂肪品质同时也发生变化。 抽提瓶重量、体积均较大，在分析天平上称量时有一定的困难。 样品量大时需要较多器具，不利于同时进行，在实验性教学上不方便。 时间长，溶剂量大，危险大，整个实验完成大概要8h左右。乙醚有毒，易挥发，大量吸入会致人头晕、眼酸、腹泻。,残余法 优点： 速度较快，也有相当的准确性。 适于大批样品分析。一个抽提管可以盛多个样品包（只需在样包上用铅笔做出标记即可）， 有利于同时进行多个样品，或进行多组重复，适合教学实验用。 滤纸包中的样品经过脱

25、脂处理， 可以进行其它相关养分的分析测定，省去再脱脂的步骤。,缺点： 滤纸包在称量过程中，由于是绝干状态，很容易吸潮，在分析天平上很难平衡，对实验结果造成影响； 实验不能进一步分析样品中粗脂肪的品质及组成， 因为不能清楚粗脂肪来源于哪个样包， 哪种样品。,折光法,方法原理：本法是利用种子中的油的折光率与溶剂的折光率具有显著差异这一特性来进行样品含油量的测定。 用折光率高的非挥发性有机溶剂浸提样品。由于油的折光率较低，所以，溶剂溶解样品中的油后，溶液的折光率即低于溶剂，降低的值与溶解的油量成正比。因此，可由折光率的下降程度来测量样品的含油量。,折光法不如索氏提取法准确，但由于分析速度快，适宜于育

26、种工作中大量样品筛选，提高作物品质具有重要意义。需要精密的折光仪。,第三节 脂肪酸的测定,粮油里的脂肪酸是其脂类物质的基本成分。从结构上来看，脂类物质可以认为是脂肪酸甘油酯及与其类似的物质，脂类物质中，脂肪酸的种类很多，各种脂肪酸种类和数量的变化，往往造成粮油样品中脂类物质在物理和化学特性上的差别，所以，不论是以粮食油料及油品在储藏期间品质变化的角度来考虑，还是从粮油的质量变化以及油料品种资源利用来考虑，对粮油品种中脂肪酸组成的分析，都具有一定的实际价值。,饱和脂肪酸：月桂酸(十二碳酸)、豆蔻酸(十四碳酸)、软脂酸(十六碳酸)、硬脂酸(十八碳酸)及花生酸(二十碳酸)等，其中尤以软脂酸和硬脂酸最

27、普遍（油棕及椰子油） 不饱和脂肪酸：油酸(十八碳一烯酸)、亚油酸(十八碳二烯酸)及亚麻酸(十八碳三烯酸)等。 在植物油脂中，脂肪酸的种类很多，有的种子和果实中所含的脂肪以饱和脂肪酸为主，有的则以不饱和脂肪酸为主。,饱和脂肪酸 其结构式中不含双键，一般分子式为CnH2n+l COOH或CnH2nO2。 低级脂肪酸（挥发性脂肪酸）C10，常温下液态，主要有丁酸、己酸、辛酸及癸酸。 高级脂肪酸（固态脂肪酸）C10，常温下固态，主要有月桂酸、豆蔻酸、软脂酸、硬脂酸。 不饱和脂肪酸 在空气中容易被氧化而变干，愈不饱和的脂肪酸，愈容易氧化，它们这种性质有极大的工业上应用价值。,脂肪的性质及营养价值与其脂肪

28、酸的组成种类及含量有很大关系，例如亚油酸是人体必需脂肪酸，而亚麻酸的存在则使油脂容易氧化变质、不耐贮藏。 油料作物品质主要由脂肪含量及脂肪酸组成决定。几种主要油料作物籽粒的脂肪酸组成见表21。,气相色谱法,特点：具有分离能力强，灵敏度高，分析速度快，但不能用来直接分析未知物，无论是定性还是定量必须要有相应的纯物质作对照，而这些物质往往不易得到。 在色谱法中，当用气体作流动相时，称为气相色谱法，不仅流动相位气体，样品在色谱柱中移动、分离及流经检测器的过程也必须一直保持气态，故得名。,为什么可用气相色谱法进行脂肪酸的测定？ 脂肪酸不具有吸光能力，也无适当的呈色试剂，所以，不宜用液相色谱法分析。脂肪

29、酸因其本身具有挥发性，所以能够直接作为气相色谱法的试样，但一般是使之成为挥发性更强的脂肪酸甲酯，然后上机测定。,方法原理： 测定作物脂肪中的脂肪酸 1、首先用乙醚提取作物中的脂肪 2、再用碱将脂肪水解，即游离出结合在脂肪中的各种脂肪酸钠盐。,酸化后即得游离态的脂肪酸。由于作物脂肪中常见的脂肪酸分子极性及沸点均很高，且在高温下也很不稳定，不便于分析，所以一般先进行甲酯化处理，形成极性和沸点均较低的脂肪酸甲酯： 用气相色谱仪测定各脂肪酸甲酯，间接得到各脂肪酸的含量。,在相同的条件下注入脂肪酸甲酯(FAME)混合物标样，根据各自的保留时间来鉴定各种脂肪酸。若要定量，用归一化法或外标法/内标法定量测定

30、，用积分仪或半峰高法，求出各峰的峰面积，相对于峰面积总和各个面积的百分率即为脂肪酸组成。,样品的处理,粗脂肪的提取 脂肪酸甲酯的制备 有多种，最常用的三氟化硼一甲醇法则快速、定量、无副反应，且试剂稳定，被美国谷物化学协会(AACC)定为审批方法。 其他的如盐酸甲醇法、重氮甲烷法、酯交换法等。在这几种方法中，盐酸甲醇法需经较长时间的皂化、酯化，且能使不饱和脂肪酸异构化；重氮甲烷易与脂肪酸的双键生成加成物，影响分析结果，同时重氮甲烷有毒性，很不稳定，易爆炸；酯交换法易引起低级脂肪酸损失。,实验条件,色谱柱 玻璃柱内径4mm，长1.5m 载体（担体） ChromosorbWAW（DMCS）粒径60-80目，即经酸洗硅烷化的硅藻土。 固定液 25聚二乙二醇丁二醇酸酯（DEGS）。柱子在使用前 185通气老化 30h以上。 色谱条件（随仪器而不同） 检测器 氢火焰离子化检测器；