高效液相色谱法及应用

1、第三，由于高速液相色谱法和应用、2004年3月1.4日、慢中速、电色谱分离、液体与气体性质的差异，液体中溶质的扩散系数比气体小105倍左右的液体黏性系数比气体大102倍左右的液体， 比气体大104倍左右的液体密度比气体大103倍左右的液体表示无法压缩，液相色谱仪y以液体为流动相的固定相可以是固体也可以是液体(担载在固体的表面)，与气体色谱法相比，带来了一系列变化：例如， 柱瓦斯气体吉卜赛人格拉夫柱填充时，一般填充剂的尺寸为80-100目，粒度约2毫米，但一般高速液相色谱法的固定相粒度为210微米，流动相通过这种固定床时产生了较高的反压。 因此，我们通常所说的高速液相色谱法(highperfor

2、manceliquidschromatography )实际上也是高压液质联用(highpressureliquidchromatography )，如果没有高压力就不能得到高的分离效率耦合相高速液相色谱法使用耦合相的固定相，因此是电色谱的模型。 一、液质联用分类按溶质分离过程的原理：在吸附色谱法中分配电色谱体积电阻色谱分析法亲和色谱法，二、电色谱固定相的形式：平板电色谱(平面电色谱) 柱电色谱3 .分离的压力高压液相色谱仪彝(高速液相色谱仪彝)中压液相色谱仪彝常压液相色谱仪彝、Hdp关系谱图、二、液质联用一般将吸附电色谱称为液相色谱。 液质联用的固定相一般为固体吸附剂，常用碳酸钙元素、硅凝胶

3、、氧化铝、过氧化镁、活性炭等。 在那之中硅凝胶是最常用的。 吸附色谱法对中分子量的油溶性样品可得到最佳分离，但强极性或络离子型样品产生不可逆吸附，有时得不到满脚丫子的结果。 基本原理：吸附剂一般为多孔物质，它们的表征中存在分散的吸附中心，溶质分子和流动相分子在吸附剂表面的活性中心上相互竞争，同时不同溶质之间和相同溶质的不同官能化学基之间的液体也相互竞争。 竞争的综合结果是不同溶质在吸附剂表面吸附，形成解吸平衡。 吸附、解吸、x是溶质分子，后缀m是流动相，s是固定相m是流动相分子，后缀m是流动相，s是固定相n是被溶质分子置换的流动相分子的数量， 有机化合物在极性吸附剂上的保留顺序由下式表示：氟化

4、合物饱和烃芳烃有机卤代物醚硝基化合物亚硝基叔胺醛族酮氨基羧酸磺酸，三，键合相液质联用键合相固定相：在硅凝胶表示中通过键合反应使官能化学基键合在表面，解决固定相流出的问题。 正相色谱分析法：流动相极性小于固定相极性的反相色谱：流动相极性大于固定相极性，可认为是耦合相色谱分析法的反应历程分配色谱的反应历程，也有人认为是吸附色谱法的反应历程，但实际上应该有2个成分，现在提出了疏散理论等机制。 四、高速液相色谱法装置、液体贮藏和输送设备样品系统柱系统的检测器控制和数据处理系统，选择流动相的原则：保持柱稳定性的化学惰性，使用的检测器对样品以一定的溶解能力进行清洗，交换容易，毒性小的沸点，黏性系数等物理性

5、质适宜， 在反相色谱最常用的流动相：水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、异丙醇等。 水甲醇系：用约5.0水黏性系数最大水乙腈系：用3.5水黏性系数最大。 保管流动相的容器是惰性的，有机溶剂必须遮光。 输液泵产水量平稳，调节产水量范围宽，要求能承受高压。 一般是柱塞往复泵。 样品系统包括手动样品和自动样品。 手工样品和自动样品都必须通过六通阀。 六方阀的样品是高压系统的需要，不影响系统的正常运行，可以把样品放入系统。 柱系包括柱与柱温箱的反相结合相柱，最常用的是ODS柱，即C18柱。柱温箱的温度控制，流体的黏性系数受温度的影响较大，因此必须比较准确。 液质联用量测仪器测定原理不同的分类：光学性质量测仪器电

6、学和电化学性质量测仪器热性质量测仪器，光学性质量测仪器：紫外可见光检测器差示折射检测器荧光检测器蒸发光散射检测器化学发光检测器，紫外吸收检测器有三种类型：固定波长紫外吸收检测器：低压水银灯提供固定的254nm或280nm紫外光。 可变多波长检测器：以氘灯为光源，光栅分光光电二极管阵列检测器photodiodearray detector(PDAD、PDA、DAD ) :钨丝灯与氘灯组合而成的光源，进入检测池的不是单色光，而是紫外波长的光。 PDA可以辅助定性。 折光指数检测器(refractive index detector RID ) :也称为示差折射检测器。 溶液的折光率等于溶剂和其中含有的各成分溶质的折光率与各个摩尔分数的积之和。 RID是通用型的检测器，但灵敏度不高。 RID不能用于梯度洗脱。 蒸发光散射检测器、电和电化学检测器：安培检测器导电检测器库仑检测器介电常数检测器极谱检测