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文档简介
1、恢复试验,第一,实验目的,第一,掌握恢复试验的原理和方法。熟悉本实验的操作过程,掌握数据处理方法。2.实验原理1。葡萄糖氧化酶法测血糖原理:葡萄糖氧化酶能将葡萄糖氧化成葡萄糖酸并释放出过氧化氢。在过氧化物酶(POD)的作用下,后者与生色氧受体4-氨基安替比林偶联合成红色醌,即Trinder反应。红色醌化合物的产率与葡萄糖含量成正比。回收实验的原理,这种分析方法正确地确定了添加到常规分析样品中的纯分析物的能力,并且用于确定测试方法的比例系统误差,该误差随着分析物浓度(指添加剂的浓度)的增加而增加,这是由普通样品中的其它物质与分析物竞争并与它们反应引起的。通过测量GOD-POD法测得的血糖回收率,
2、可以反映该方法的比例系统误差的存在或大小。3。设备、微量吸管、计算器、三用水浴、722可见分光光度计、4。试剂,1。含2.2摩尔/升血糖的血清样品(用于恢复实验),2。葡萄糖标准溶液(80毫摩尔/升),3。葡萄糖测定的God-Pod法,5。操作步骤。样品回收制备基础样品:血清0.9毫升0.1毫升蒸馏水回收样品:血清0.9毫升0.01毫升80毫升/升葡萄糖标准溶液0.09毫升蒸馏水回收样品:血清0.06毫升80毫升/升葡萄糖标准溶液0.04毫升蒸馏水回收样品:血清0.9毫升0.09毫升80毫升/升葡萄糖标准溶液0.01毫升蒸馏水,按下表操作,混合均匀,放入水浴中37分钟15分钟,调整空白6.回收
3、实验1的结果计算、数据处理。添加浓度计算:添加浓度(毫摩尔/升)=2。回收浓度计算:通过回收样品3测量的浓度。回收率计算:回收率=100%,4。请填写计算结果表:7。注意事项:在本实验中,准确添加样品尤为重要,因为要分析的理论值是根据标准溶液和原始样品的体积获得的。添加样品溶液后,总浓度必须在该方法的分析范围内。通常,需要添加高、中、低浓度进行回收实验,并计算平均回收率。加入标准溶液后,最好使实验样品的测量浓度达到医学确定的水平。加入的标准溶液的体积优选在整个反应溶液体积的10%以内。如果稀释度太大,误差会改变。方法学评价和回收率试验:一般检验方法要求回收率在95.5%之间,最理想的回收率应为100%。回收率接近100%,表明分析方法对纯溶液或复杂基质环境中的分析物具有相同的反应能力,且
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