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文档简介
1、一、课题目标,2尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。,1说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。,基础知识,(一)固定化酶的应用实例,1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例,(1)高果糖浆的生产需要 酶,葡萄糖异构,(2)葡萄糖异构酶的优点,稳定性好、可以持续发挥作用,(3)在生产中直接使用酶有什么缺点?,酶溶解于葡萄糖溶液后,无法回收,造成浪费,2.固定化酶的反应柱示意图,3.固定化酶在生产实践中的优点,反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。,(二)固定化细胞技术,1.将酶或细胞固定化的方法,将酶(或细胞)包埋在细微网格里,将酶(或细胞)相互连
2、接起来,将酶(或细胞)吸附在载体表面上,包埋法,化学结合法,吸附法,2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别,联系:应用相同,都能催化某些反应,区别,1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收;,2)固定化细胞技术对酶活性影响更小;,3)固定化细胞固定一系列的酶;,4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制;,【比较】酶和细胞的固定方法和特点,3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料,明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等,,其共同的特点是不溶于水的多孔性载体,思考:直接使用酶、固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点?,实验操作,(一)制备固定化酵母细胞,实验操作,1、酵
3、母细胞的活化,(一)制备固定化酵母细胞,实验操作,2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2,无水CaCl2 0.83g+150mL蒸馏水,(一)制备固定化酵母细胞,实验操作,3、配制海藻酸钠的溶液,0.7g海藻酸钠+10mL蒸馏水酒精灯加热并搅拌溶化后,蒸馏水定容至10mL,注意:如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。,(一)制备固定化酵母细胞,实验操作,4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合,(一)制备固定化酵母细胞,实验操作,5、固定化酵母细胞,将海藻酸钠与活化酵母混合液用注射器匀速注入到CaCl2溶液中,浸泡30min左右,形成凝胶珠。,凝胶珠检测:1.用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。2.在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。,(二)用固定化酵母细胞发酵,实验操作,1、将固定化的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2到3次。,2、将150m
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