动物细胞工程(PPT课件）

1、动物细胞工程，动物细胞工程的常用技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、单克隆抗体生产技术。问：植物细胞工程的常见技术手段是什么？植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术和动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞和组织培养、动物细胞融合、单克隆抗体制备、体细胞克隆、核移植、动物细胞工程技术、动物细胞工程的基础，首先，动物细胞培养，概念：是从动物体内取出相关组织，将它们分散成单细胞，然后将它们放入合适的培养基中让这些细胞生长和增殖。在植物组织培养中，分离的植物器官、组织和细胞在无菌和人工控制的条件下在人工控制的培养基上培养，并给予合适的培养条件以诱导它们产生愈

2、伤组织和丛生芽，最终形成完整的植物。动物细胞培养的原理是什么？2.应该从动物体内取出哪些相关组织？并解释原因。3.将组织分散成单细胞的方法是什么？理论基础是什么？4.动物细胞体外培养应满足哪些条件？动物胚胎或幼小动物的组织器官细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，易于培养。细胞增殖，阅读教材P44，简要描述动物细胞培养的基本过程，动物胚胎或幼小动物组织、器官、胰蛋白酶、单细胞、添加培养液、制作细胞悬液、第10代细胞、某些细胞“癌变”、遗传物质改变、无限传代、动物细胞培养不能最终培养成动物体、第50代细胞、原代培养、细胞株、细胞系、动物细胞培养过程、动物细胞生长特性、细胞粘附：分散在悬浮液中的细

3、胞迅速粘附在瓶壁上，这称为细胞粘附。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易附着。细胞接触抑制：当贴壁细胞分裂生长至表面相互接触时，细胞将停止分裂和增殖，这称为细胞接触抑制。细胞粘附过程，相关概念：原代培养：从体内取出后立即培养的细胞是原代细胞。第一代培养细胞和10代以内的细胞称为原代培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，制备细胞悬液，装入两个或两个以上的培养瓶中进行连续培养，称为传代培养。细胞株：原代细胞一般会扩散到10代左右，细胞生长停滞，大多数细胞因衰老而死亡，少数细胞存活到4050代。这种传代细胞是一种细胞株。细胞系：该细胞系经过50代后，细胞生长再次停滞，由于遗传物质的改变，只

4、有部分细胞在培养条件下可以无限期传代。这个传代的细胞是一个细胞系。细胞系与细胞系的区别：细胞系的遗传物质发生改变，具有癌细胞的特征，失去接触抑制，易于传代培养。如何定义初级文化和亚文化；细胞系和细胞系？1.胚胎组织或幼小动物的组织或器官通常取自动物细胞培养物。请解释原因。细胞的衰老与动物的衰老密切相关，细胞的增殖能力与供体的年龄有关。年轻的动物有很强的细胞增殖能力和旺盛的有丝分裂，而年老的动物则相反。因此，一般来说，年轻动物的组织细胞比年老动物的组织细胞更容易培养。同样，组织细胞分化程度越低，增殖能力越强，因此更容易培养。肿瘤组织或细胞正常组织或细胞，扩增-动物组织或细胞培养的困难，年轻组织或

5、细胞的老化组织或细胞，分化程度低的组织或细胞或分化程度高的组织或细胞，2。人类通常保存哪种细胞？为什么？由于其生物学特性没有发生很大变化，最接近体内组织或细胞的生长特性，因此适用于药物检测、基因表达等实验研究。在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶处理被切除的动物组织？动物组织的胰蛋白酶处理可以水解动物组织细胞外的胶原纤维和其他成分，获得单细胞；被阻断的组织细胞彼此靠近，这限制了细胞的生长和增殖。植物组织培养过程会将组织分散成单细胞吗？胰蛋白酶的功能是什么？这可以解释细胞间物质的组成。细胞膜的主要成分是什么？胰蛋白酶能消化细胞吗？既然胰蛋白酶可以消化细胞，当我们将动物组织分散成单细胞时，应该

6、注意什么？胃蛋白酶能代替胰蛋白酶吗？为什么？进一步思考：不，胰蛋白酶水解蛋白质、蛋白质、蛋白质和磷脂，但我们应该注意时间控制，但我们不能，因为两者的最佳酸碱度不同，而正常组织和细胞的生活环境接近胰蛋白酶的最佳酸碱度，多细胞动物和人类细胞都生活在内部环境。据你所知，什么内容的内部环境应该是模拟细胞体外培养？动物细胞培养条件：1 .无菌无毒环境(加入一定量的抗生素，定期更换培养基)；2.必需营养素(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。)，以保证细胞的顺利生长和增殖；3.适宜温度36.5(-0.5)；4.充足的氧气和适当的氧气和二氧化碳(95%的空气和5%的

7、二氧化碳)；问题：1 .培养基类型；(1)天然培养基：营养价值高，成分复杂；(2)合成培养基：成分清晰。与植物组织培养基相比，什么是独特的？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清。其独特之处如下：1 .液体培养基(大多数动物体细胞生活在液体环境中)。组合物中包括动物血清以获得细胞、细胞全能性、细胞株、细胞系、植物、培养结果或细胞产物、无病毒植物的快速繁殖和培养等。培养目的、葡萄糖、动物血清、蔗糖、植物激素、培养基的独特成分、液体培养基等。动物细胞培养、植物组织培养、比较项目、植物组织与动物细胞培养的比较、动物细胞培养的应用、大规模培养和生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)以

8、获得大量的自身皮肤细胞，用于皮肤移植培养的动物细胞可用于检测有毒物质，并判断某些物质的毒性，为癌症等疾病的治疗和预防提供理论依据。动物细胞和组织培养(原理、材料选择和原因、一般过程、培养条件、主要应用)，注意：概念理解：原代培养、传代培养、细胞株、细胞系胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项，动物细胞培养和植物组织培养的区别，思考和探索：如何利用细胞培养技术对烧伤患者进行皮肤移植？取患者皮肤进行细胞培养，获得足够的细细胞，然后移植。1.动物细胞培养过程中遗传物质发生变化的细胞有(a)细胞系、b细胞系、c原代细胞、d传代细胞、2。动物细胞工程技术的基础是：a .动物细胞融合，b .单克隆抗体，c .

9、胚胎移植，d .动物细胞培养，3 .用于动物细胞培养的组织和细胞大多取自胚胎或器官或出生不久的小动物组织。主要原因是这种组织细胞容易产生各种变异，全能性较强，获得材料非常方便。动物细胞工程中的下列工具是：(1)限制性酶BDNA连接酶(2)胰蛋白酶(3)果胶酶(4)，实践(5)。在动物细胞培养的描述中，正确的是()动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白。b动物细胞应在培养前用胰蛋白酶处理以分散细胞。细胞遗传物质的变化发生在原代培养过程中。培养至50代后继续向下传递的细胞是细胞株。6.动物细胞培养中的一些细胞可以在培养条件下无限期地传递下去。这种继代细胞被称为(甲)原代培养物乙继代培养物丙细胞

10、系丁细胞系7。动物细胞培养的正确过程是：(一)原代培养传代细胞系(二)原代培养传代细胞系(三)传代细胞系(四)原代培养细胞系(八)原代培养细胞系(八)。以下关于动物细胞培养的陈述不正确：(1)培养基通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清。原代培养的细胞经过大约10代后通常表现出生长停滞。动物细胞培养可以传到4050代，但是它的遗传物质已经改变了。动物细胞培养可用于检测有毒物质并获得大量健康细胞。下图是动物细胞培养的基本流程图。请根据图片回答：(1)动物器官或组织放在容器a中，一般取自_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)先处理容器A中的动物器官或组织，然后用酶处理，使细胞

11、分散。这样做的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _在此瓶中培养一段时间后，通常会扩散至第一代，许多细胞会因老化而死亡。 这时，这种文化被称为_ _ _ _ _

12、 _ _ _。(4)为了将瓶B中的细胞装入瓶C中，用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(5)在瓶C中正常培养一段时间后，发现所有细胞都死亡。原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。，幼小动物的器官或组织，动物胚胎，切碎的胰腺蛋白，使每个细胞能与培养液，葡萄糖，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清接触，10，原代培养，胰蛋白酶，细胞悬液，细胞无瘤形成，概念：将动物细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中，使其能重组并发育成

13、新的胚胎。通过细胞核移植获得的动物称为克隆动物。核转移是困难的。受体细胞是M期卵母细胞。二是动物体细胞核移植技术和克隆动物细胞分化程度低，全能性容易恢复。在体细胞核移植过程中，卵母细胞被去核，体细胞被去核，两个细胞通过电刺激融合，重组细胞，重组胚胎，新个体，细胞质等。克隆绵羊的繁殖过程，另一只绵羊的子宫，以及在将体细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须首先去除受体卵母细胞的细胞核？为了使细胞核移植的遗传物质，动物都来自有价值的动物提供的细胞。用于核移植的供体细胞通常选择10代以内的细胞。为什么？10代以内的细胞一般保持正常的二倍体核型，无突变。3.体细胞核移植产生的克隆动物能100%复制体细

14、胞供体动物吗？为什么？不，克隆动物的大部分脱氧核糖核酸来自供体细胞核，但细胞核外的一小部分脱氧核糖核酸(如线粒体脱氧核糖核酸)来自受体卵母细胞。4.动物克隆有很多例子。为什么多莉世界闻名？1997年2月，英国罗斯林研究所威尔莫特博士的研究小组宣布，克隆羊多利已经成功培育。胚胎核转移技术取得了很大进展。事实上，多莉的克隆遵循了核移植技术中胚胎核移植的整个过程，但这并没有降低多莉的意义，因为她是世界上第一个通过体细胞核移植出生的动物，这是克隆技术研究的一大突破。这一重大进展意味着，与植物细胞一样，分化的动物细胞核在理论上也是全能性的，体细胞核移植技术的应用前景如下：1 .加快家畜遗传改良进程，促进

15、优良畜群的培育；2.保护濒危物种，增加存活数量；3.克隆动物作为生物反应器来生产医用蛋白质；4.可用作异种移植供体、组织器官移植和体细胞核移植。在研究中，克隆动物基因组重编程的机制仍不清楚，克隆技术效率低下，克隆动物畸形率高，死亡率高，容易过早衰老。这些问题仍在研究中。在应用方面，克隆动物的生产成本很高，距离大规模应用还有一定的距离。“番茄和马铃薯”的理想图景，科学家们通过长期实验，利用体细胞杂交技术获得了“番茄和马铃薯”植株。杂交植物，筛选原生质体与抗体融合，再生细胞壁，去分化，愈伤组织，再分化，植物细胞融合，植物组织培养，植物细胞甲，原生质体乙，原生质体甲，杂交细胞抗体，削皮，削皮，人工诱

16、导，方法？促进融合的方法？融合完成的标志，植物b细胞，植物体细胞杂交的技术过程和原理？原理呢？成就和未解决的问题，成就：克服不同生物的远缘杂交的障碍，出现自然界没有的新品种。未解决的问题：未能使杂交植物根据人们的需要表现出它们父母的优秀。如果你把牛细胞和植物细胞杂交，得到绿色的牛，难道仅仅通过晒太阳就能挤出牛奶吗？动物细胞也能融合吗？动物细胞融合和单克隆抗体。动物细胞融合，1。动物融合的过程。请阅读教科书P52:什么是动物细胞融合？它相当于植物体细胞杂交过程中的哪一步？它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？两种细胞具有不同的脱氧核糖核酸，灭活的病毒诱导细胞融合，融合的细胞进行有丝分

17、裂。1.动物细胞融合过程，失活失去传染性，保留融合活性，动物细胞融合过程，原理和诱导方法，思考问题？1.植物体细胞杂交中去除细胞壁的第一种方法是什么？酶水解，如纤维素酶或果胶酶，2。动物细胞在融合时是否需要去壁？为什么？不需要，因为动物细胞没有细胞壁。3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合的常用方法是什么？物理方法，如离心和电激发；聚乙二醇和其他化学方法。4.动物细胞融合可以使用以上两种方法吗？还有别的办法吗？灭活病毒也可用于诱导。5.在植物体细胞杂交中，原生质体应在组织培养前融合，形成一个完整的杂种个体。动物细胞可以融合形成杂交动物个体吗？你能总结一下什么叫做动物细胞融合吗？2.动物细胞融合的概念，也称为细胞杂交，是指在一定条件下将两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。它主要用于制备单克隆抗体，获得杂交植物，用途，物理和化学方法，(同左)，灭活病毒，物理(离心，振动，电刺激)，化学(聚乙二醇)，诱导。指导原生质体融合，细胞融合方法，细胞膜流动性，细胞膜流动性，植物细胞全能性，原理，动物细胞融合，植物体细胞杂交，比较项目，植物和动物细胞融合的比较，7。你推测动物细胞融合的应用吗？思考问题，利用动物细胞融合技术诱导杂交瘤细胞的形成，8。杂交瘤细胞在生产实践中有什么应用？产生单克隆抗体。1.抗体是由哪种细胞产生的？淋巴细胞(浆细