生理学实验ppt课件

1、生理学实验、目录、凝血、蛙心期前收缩与代偿间歇、蟾蜍坐骨神经腓肠标本的制备、刺激强度刺激频率与肌肉收缩的关系、小肠运动与吸收观察、脊髓反射、实验一凝血，目的：凝血的理解原理：血液从血管流出后迅速凝血。 凝血是一系列参与多种凝血因子的酶催化剂促进反应的级联反应反应，大致可分为三个主要步骤：凝血酶激活物由凝血酶原到凝血酶，凝血酶由纤维蛋白原到血纤蛋白，最后从血纤蛋白到凝血块。 所有三个这些个步骤都需要Ca2的参与。 材料和设备：试管、试管架、吸管、掌门人手表、3.8%柠檬酸钠、鲜血、1%氯化钙元素、5%草酸钾元素、烧杯、酒精灯、肝素、液体残奥翅片、冰瓶、温度校正等。 方法与步骤： 1、影响凝血的物

2、理因素(1)取3根试管，以一根为对照，另两根分别涂少量棉花和少量液体残奥片。 (2)将1ml新鲜血液放入3根试管中，每隔30s轻轻倾斜试管，记录3根凝血时间。 2、温度对凝血的影响取试管3根，分别放入新鲜血液1ml，然后分别放入37水浴、常温和冰水中，比较3管凝血时间。 3、Ca2对凝血的影响(1)取3根试管，进行对照，另两根分别加入3.8%柠檬酸钠3滴和5%草酸钾元素5%，然后在各管中加入1ml新鲜血液，混合后观察凝血情况。 (2)在加入了柠檬酸钠和草酸钾元素的两管中，分别加入12滴1% CaCl2，并观察结果。 4、肝素的作用取试管放入8单位肝素，放入1ml新鲜血液，摇晃后观察结果。 思考

3、题： 1、凝血包括什么过程？为什么正常动物的血管内血液难以凝固？ 2 .实验中各种因素加速或延缓凝血的原因是什么，实验二蛙心期前收缩与代偿间歇，目的：观察心肌收缩活动不同时期施加额外刺激时所作的不同反应，了解心肌兴奋性的变化和代偿间歇的原理。 原理心肌的最大特征之一是有较长的不应期，有效不应期占收缩期和部分舒张期，因此收缩期不产生任何刺激，心室不反应。 心肌动作电位相对不应期的心室舒张期若给予单一阈值刺激，产生初级节律以外的收缩，称为前期收缩，来自静脉窦的节律性兴奋正下降到前期收缩的收缩期，因此心室不收缩，需要等到下一次静脉窦兴奋传达。 因此，在期前收缩后发生长时间的扩张期，被称为追加收缩的代

4、偿间歇。 材料和设备：蛙或蟾蜍BL-420S生物功能实验系统、张力变换器、刺激电极、心脏支架、双凹回形针、蛙板、蛙系手术器械、蛙心回形针、玻璃小烧瓶和培养皿、吸管、任意氏液、丝。 方法和步骤：1.用探针破坏蟾蜍脑、脊髓，暴露心脏。 在心舒期用青蛙的心夹心尖，连接青蛙心的线与张力振膜式传感器连接，调节张力振膜式传感器的高度，使线保持垂直，松弛适当。 如图所示连接线路，张力振膜式传感器进入生物功能实验系统的对应通道。 打开计算机，启动BL-420S生物功能实验系统。 进入“期前收缩与代偿间歇”计划计程仪。 调节参数，其中G:100倍，T:DC，F:10HZ，扫描速度：1.0s/div。 刺激电极接

5、触心室：刺激残奥仪表刺激，波宽5ms，宽0.5V(0.02V-1V )，脉冲数1，延迟1ms，并进行实验项目。 实验观察(1)记录正常的心率曲线。曲线的哪些部分表示心室收缩，哪些部分表示心室舒张(2)先画一些正常的心率曲线作为对照，然后选择适当强度的阈上刺激，分别在心室收缩期和舒张的早、中、晚期刺激心室，观察心率曲线如何变化(3)心室舒张的(4)连续刺激心室肌，观察心肌是否出现强直收缩。 注意事项1 .实验中，必须经常用任意的氏液使心脏湿润。 2 .置于心室的刺激电极必须避免短路。 3 .心率曲线的上升支代表心室收缩，下降支代表心室扩张。 相反的情况下，请把振膜式传感器颠倒过来。 4 .选择适

6、当的刺激强度时，可以先用刺激电极刺激蟾蜍腹壁肌肉，检查强度是否有效。 思考题1 .探讨期前收缩和代价间歇发生的原因。 2 .心肌的有效不应期长度有什么大姨妈意义？ 3 .如果心率过快或过慢，在期间前收缩后，为什么会有代价的间隙？ 有不应期的实验依据是什么？ 实验三、蟾蜍坐骨神经腓肠标本的制备、目的：学习坐骨神经腓肠肌标本的制备方法，掌握基本操作技术。 原理蛙类离体组织所需的理化条件比较简单，易于控制和掌握。 因此，实验采用蟾蜍和蛙坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的一般规律及骨骼肌的收缩特征等。 材料和设备：蟾蜍或青蛙、任意氏液、蛙板、玻璃板、粗剪刀、组织修剪、眼科修剪、组织大头针

7、定径套、眼科大头针定径套、探针、玻璃针、大头针、吸管、培养皿、亚金属铅铜弓、丝、磁器皿。 方法和步骤：破坏大脑和脊髓：取一只蟾蜍，用水冲洗漂亮地。 右手拿着探针从枕骨的大孔垂直刺入，然后向头盖腔前方刺入，左右搅动脑组织将破坏的探针拔出，从枕骨大孔向脊椎管后方刺入，将脊髓压溃。 此时显示蟾蜍四肢柔软，呼吸消失，脑脊髓完全破坏，否则应用上法破坏(见图a )。 切断躯干上部和内脏：在骶髂关节水平以上051厘米切断脊柱，使蟾蜍头和内脏自然下垂，右手持粗剪刀，沿两侧切断内脏和头胸部(注意不要损伤坐骨神经)，仅保留后肢、骶骨、脊柱和从其中露出的坐骨神经(参照图b )。 剥皮：用左手握住脊柱断段(留心的不要

8、握住神经或触碰)，用右手抓住其上的皮肤边缘，下面剥下所有后肢皮肤，将标本放入装有任意氏液的培养皿。 清洗所有手、使用过的剪刀、大头针定径套等手术器械，然后进入下一步骤。 分离两脚丫子：用大头针定径套从背夹脊柱抬起标本，切取向上突出的骶骨(注意不要损伤坐骨神经)，然后沿中线剪刀把脊柱分两部分，从耻骨联合中央切取两侧大腿，两脚丫子完全分离。 将两个脚丫子放入装有任意氏液的培养皿中。 制作坐骨神经腓肠肌标本：取一条腿放在玻璃板上。 游离坐骨神经：将标本背面朝上放置，切断梨状肌及其附近的结缔组织，沿坐骨神经沟(股二头肌与半膜肌之间的裂缝)找到坐骨神经大腿部分(参见图c )，用玻璃针头小心剥离，神经完全

9、暴露后，用粗剪刀切断与神经相连的脊柱，、() 完成坐骨神经小腿标本：游离洁净的坐骨神经置于腓肠肌上，膝关节周围全部切取大腿肌，用粗剪刀漂亮地切取大腿骨，然后在大腿骨中部切取上段大腿骨，剩馀部分为坐骨神经小腿标本。 ()坐骨神经腓肠肌标本的完成：将上述坐骨神经小腿标本穿扎于阿基里斯腱并切断阿基里斯腱。将腓肠肌游离到膝关节，沿着膝关节全部切下小腿佝偻部，制作带有附着在大腿骨上的腓肠肌、支配腓肠肌的坐骨神经的标本。 亚金属铅铜弓检查标本：用任意氏液浸湿的亚金属铅铜弓迅速接触坐骨神经，使腓肠肌明显并灵敏地收缩，表示标本兴奋性良好，在装有任意氏液的培养皿中装入标本，准备实验。 (如果没有亚金属铅铜弓设备

10、，可以用中强度的单一电刺激检测标本的兴奋性。 注意事项1 .在操作过程中，不要污染、挤压、损伤、过度拉伸神经和肌肉。 2 .经常向神经和肌肉滴任意的氏液，防止表面干燥，保持标本的正常兴奋性。 实验4，观察刺激强度、刺激频率与肌肉收缩的关系，目的：观察刺激强度与肌肉收缩张力的关系。 观察刺激频率与肌肉收缩形式的关系。 原理：腓肠肌由许多肌纤维组成。 刺激支配腓肠肌的坐骨神经时，刺激的强度引起兴奋性不同的肌纤维的不同反应。 刺激强度过小则不会引起肌肉的收缩反应，此时的刺激是阈下刺激。 当刺激强度逐渐增强时，少数肌纤维可能发生收缩反应，这种刺激强度就是阈刺激。 随着刺激强度的增大，兴奋的肌纤维数量增

11、多，收缩幅度逐渐增大，此时的刺激强度为阈上刺激。 所有的肌纤维收缩到云同步后，肌肉收缩幅度变得最大，之后刺激强度进一步增加，肌肉收缩幅度不再增加，此时的刺激成为最大刺激。 一次单一阈上刺激引起的收缩称为单收缩。 对肌肉施加连续的脉冲刺激，肌肉的收缩形态因刺激频率而异。 如果刺激频率低，即下一次刺激在上一次收缩扩张期结束后达到肌肉，则出现连续的单收缩，刺激频率在某种程度上增大，则下一次刺激在上一次收缩的扩张期结束前达到肌肉，肌肉收缩曲线呈锯齿状，如果被称为不完全强直收缩的刺激频率持续增加，则下一次刺激在上一次收缩的扩张期结束前达到肌肉材料和设备：蟾蜍或蛙、任意氏液、BL-420S生物信号采集处理

12、系统、蛙类手术器械、肌槽、张力变换器、铁元素柱信息帧、双凹回形针、任意氏液、培养皿。 方法和步骤：制备1蛙坐骨神经腓肠肌标本。 2连接实验仪器将坐骨神经腓肠肌标本固定在肌槽，股骨残端固定在肌槽小孔，腓肠肌阿基里斯腱通过扎线绑在张力变换器引体向上南朝梁的着力点上，变换器固定在铁元素柱信息帧的双凹夹具上，并连接生物信号采集处理系统的输入通道插孔。 将坐骨神经放置在肌槽的刺激电极上，刺激电极与刺激输出插口相连。实验项目： 1刺激强度对骨骼肌收缩张力的影响1 )刺激残奥表设定单次方式，波幅0.1-0.3ms。 2 )观察记录喀呖声“刺激”按钮，选择最小刺激强度(0.1V )，然后逐渐增大刺激强度，记录

13、阈值刺激和最大刺激值。 3 )测定每个刺激强度的肌肉收缩张力测定最大刺激时的肌肉收缩期和扩张期的时间，比较两者的差异。 2刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响1 )选择连续单刺激，波幅0.3-0.5ms，最大刺激强度，刺激间隔时间大于肌肉收缩时间，记录肌肉的单收缩张力曲线。 2 )选择双刺激(其佝偻刺激残奥表不变)，刺激间隔时间小于肌肉单收缩时间，长于收缩期间时间，记录两个收缩的复合曲线。 3 )选择连续刺激，其佝偻刺激残奥表保持不变，从低到高调整刺激频率，记录肌肉不完全强直收缩和完全强直收缩的张力曲线。不同频率对骨骼肌收缩的影响，刺激强度对骨骼肌收缩的影响，思考问题：1.骨骼肌的收缩和刺激强度的关

14、系如何2 .为什么在达到最大刺激之前骨骼肌收缩随着刺激强度的增加而幅度变大3 .为什么刺激频率增加，肌肉的收缩幅度也变大？ 4 .肌肉受到直接刺激会发生什么现象？ 为什么？ 实验5、小肠运动和吸收观察、目的：观察小肠运动状况及部分药物对肠运动的影响，观察溶液浓度对小肠吸收速度的影响。 原理胃肠道平滑肌自主收缩，但受神经和体液调节后紧张性和运动节律发生变化。 肠内含物渗透压是制约肠吸收的重要因素，同种溶液在一定浓度范围内，浓度越大吸收越慢浓度过高(高渗溶液)，就会发生反渗透现象，水分从血液进入肠腔，当内含物渗透压降低到等渗时被吸收。 材料和设备：兔一只，解剖器具，0.01%肾上腺激素，0.01%

15、胆碱能系统，结扎丝，蒸馏水，0.9%氯化纳金属钍，5%氯化纳金属钍等。 实验步骤： 1、首先用20%戊巴比妥酸钠金属钍麻醉两只兔，仰面固定于手术床，沿腹线切开，暴露小肠，在正常状态下注意观察小肠运动情况。 然后，在一只家兔的小肠上滴0.01%肾上腺激素2滴，在另一只家兔上滴0.01%胆碱能系统2滴，注意观察小肠运动如何变化。 2 .选择小肠一段，将内含物向一侧挤出，用结扎线将内含物部分扎成等长的三段，用注射器分别等量注射蒸馏水、0.9%氯化萘金属钍、5%氯化萘金属钍后，用止血钳封闭腹腔，30分钟后观察结果。 思考题： 1、分析肾上腺激素和胆碱能系统对小肠运动影响的反应历程。 2、3段肠道中的溶液量是怎样变化的？ 为什么？ 实验6、脊髓反射、目的：观察脊髓反射的基本特征屈肌和伸肌反射、刮痧反射。 原理：神经中枢活动的基本方式是反射。 脊髓是神经中枢的最下位部位，因为其功能最简单容易观察，所以以青蛙为受试者。 材料