生化试剂参数ppt课件

1、生化试剂各机种参数确定，1，目录，生化试剂主要参数和意义生化试剂其他参数和意义各机种生化分析器概述各机种参数特性，2，生化试剂主要参数和意义，生化试剂手册各参数(如脂肪酶)，3，项目名称方法类型反应方向测量波长测量温度样品体积测试剂量分析时间生化试剂主要方法类型(assay/Method)(应用于仪器的方法):方法类型主要分为端点法和动力学法端点法1点端点法：样品和试剂混合后反应端点吸光度(例如血糖氧化酶法、总蛋白双轴法、白蛋白甲酚绿法等)。 两点终点法： (也称为固定间接法)将样品和试剂混合一定时间后，先读取吸光度A1，延迟一定时间后读取吸光度A2，将吸光度差与标准比较进行比较，得出结果。肌

2、酐苦味酸法等。可以消除内源性物质的干扰。生化试剂的主要参数和意义，5，动力学法一级动力学法： (两点速度法)样品和试剂反应持续消耗反应物，反应速度减少，吸光度变化减少，在一定时间内监测。在此期间，吸光度升高或与样品浓度成正比。胱氨酸，总胆汁酸等。0级动力学法： (酶活性监测的连续监测法)样品和试剂反应，反应物以恒定速度生成NADH等产品。在特定波长处，吸光度均匀增加或减少，增加或减少的速度与样品浓度成正比。碱性磷酸酶，乳酸脱氢酶等。生化试剂的主要参数和意义，第6，第一动力学法： (两点速度法)，生化试剂的主要参数和意义，第7，0级动力学法： (酶活性监测的连续监测法)，生化试剂的主要参数和意义

3、，第8，反应方向负反应(DOWN)测量温度30、37、25采样体积通常为2-35l，步进为0.1l。“试容量”(regengt volum)通常从20-300l步进到1l。不同型号生化分析仪的样品量和试验剂量限制不同，样品和试剂可以按比例增加或减少。生化试剂的主要参数和意义，9，波长测定：不同生化分析仪的波长不同。可以选择单波长或双波长。“主波长/主波长”(Main Wavelength/Primary Wavelength)根据在特定波长下测量的物质的最大吸收峰选择主波长。次要波长(次要波长sub wavelength/second wavelength)可以不选择设置。副波长消除样品溶血、

4、血清混浊干扰的影响，副波长越接近主波长越好。检测时，吸光度值是主波长的吸光度减去辅助波长的吸光度。生化试剂的主要参数和意义，10，分析时间：孵化时间(incubate time) 1点结束法的孵化时间是样品和试剂开始到反应终点的时间。两点终点法是第一个吸光度反应点开始到第二个吸光度点的时间。通常为5min。“延迟时间”(delay time)是添加第二反应试剂后第一个吸光度监测点开始的时间。样品和反应试剂(第二试剂)混合到第一个吸光度选择点的时间。单试剂一般设定为30s，双底物反应或酶反应一般设定为1-3min。“连续监视时间”(continuous monitoring time)监视延迟时

5、间后0级反应中的至少4点(3个吸光度变化值)，通常为1-2min。利用生化试剂的主要参数和意义、11、校正方法：标准液(校正液)记数法或理论K值法，得到标准曲线。定线标示：标准曲线为直线的两点标示。非线性校正(Spline/4AB/polygonal):标准曲线类似直线的多点校正。理论K值(Factor/MB):主要用于连续监控酶活动，不需要校准曲线，根据摩尔消光系数计算。106 V F=vL，生化试剂的主要参数和意义，V:反应体系的总体积(ML)；v:采样体积(ml):摩尔消光系数(cm2/mol) L:有色杯光光(cm)；106: mol转换为mol，12，生化试剂的其他参数和意义。试剂吸

6、光度上限、下限/试剂吸光度限制(OD Limt)气质耗尽限制(substrate exhaust limit)试剂吸光度线性范围(Linearity)试剂线性范围(Technical Limit)前区域检查限制公式可用于判断试剂的质量。如果测试试剂空白时超出此参数的限制，提示试剂可能失败。在“底物耗尽限制”连续监测法或两点终点法下设置。吸光度上升或下降设置MAX-OD/MIN-OD表明，当吸光度超过设定的限制时，样品酶很高，底物消耗太快，不能表示实际的酶活力。14，生化试剂其他参数和意义，试剂吸光度范围线性度不能超过设定的限度，说明超出时吸光度变化量之间已经没有线性或底物不足，检查结果将降低。

7、“试剂线性范围”(Dynamic Range/Technical Limit)与试剂/取样率相关，超出范围的取样必须在重新测量或取样稀释后增加重新测试。15，生化试剂其他参数和意义，方程式Y=aX b a拦截，B倾斜。用于校准检查结果。一般A为1.000，B为0.000。“小数位数”(Decimal Places)主要基于项目参照范围的小数位数，通常为0-2位。Prozone Check Limt主要用于免疫比浊法项目，根据项目要求选择YES或NO，比较终点法后两种板垄断的差异，后点比前点吸光度低，表明已经存在抗原过剩，稀释样品后再测试，16，生化试剂的其他参数和意义。相同标准液体两次测量吸光

8、度的差异，表示试剂和仪器的重复性。该值越小，试剂和仪器的精度越高，敏感限制能检测到的最小吸光度值，即最小浓度的可靠性，第一标准吸光度限制(S1 Abs.limt)，在端点法和速度法中计算方法不同。17、生物化学试剂的其他参数和意义，反应过程吸光度极限(Absorbance Limit)在动力学反应中因高浓度(活性)样品而耗尽基质，测量的吸光度不再可靠，高浓度样品测量值低得多或变为负值。要正确反映测量结果，必须设置基准耗尽限制(特定吸光度)。这是在反应时间内，反应没有用尽地面时可以达到的最小(在反应曲线下)或最大(在反应曲线上)的吸光度值。此吸光度是吸光度限制。可用于确保高浓度(活性)样品结果的

9、准确性。设置浅蓝色字体尺寸参数通常是机械默认值。，18，按模型列出的生化分析器概述，AU400，AU640，AU2700，AU480，19，按模型列出的生化分析器概述，AU系列，20，按模型列出的生化分析器概述，21，按模型列出的生化分析器概述，hita其他模型分析方法表达方法通用选择cobas asaay rate a/2 pont rate/1 ponit/2 point end Hitachi assay code rate a/2 pont rate/1 ponit/2 point end olyy 波长主波长差波长cobas wave(main/sub)Hitachi wave(main/sub)由型号确定Olympus wavelength pri wavelength sec beck man primary wavelength ，27，特定于模型的参数特性，特定于模型的响应时间：仪器的分析周期中试剂和采样混合最后一