免疫实验诊断.ppt

1、免疫学实验诊断、临床免疫学检测及意义、免疫学检测因其与专一性和敏感性而在实验诊断中的应用越来越广泛。 常用于体液免疫、细胞免疫、感染免疫、肿瘤免疫、抗变态反应、移植免疫等相关疾病的诊断和预后观察。 免疫学检查的意义：应用免疫学理论和技术研究疾病的病因、发生、发展和转归，帮助疾病的诊断和防治。安Antigen、B-lymphocyte、phagocyte、T-lymphocyte、Primed TL、cytokine、Plasma cell， antibody NK、complement、Tumor marker，此外，还介绍了进行免疫学检查的观点、专一性、敏锐度、性别、年龄、检查物质的性质、地

2、域性格、时效性、免疫抑制剂等药物的影响、常用免疫学检查方法、凝集沉淀试验，第一节：免疫球蛋白其分泌细胞及特性：IgG IgA IgM IgE特性、IgG IgA IgM IgE病理变化、IgG亚类检测、IgG亚类分为4种，血液中的含量为IgG1 IgG2 IgG3 IgG4、 IgG1缺陷多见于免疫缺乏疾病，反复感染IgG2缺陷多见于IgG亚类缺陷中，多见于小盆友，呼吸机反复感染IgG3缺陷多见于成人反复性呼吸机感染IgG4缺陷，与IgG2和IgA缺陷有关。 IgG4水平上升见于异位皮炎、哮喘和部分寄生虫疾病。 m蛋白检测的临床意义，称为m蛋白或单克隆免疫球蛋白，发生于单克隆b细胞球异常增殖时

3、，无抗体活性。 阳性主要是1 .多发性骨髓瘤2 .巨球蛋白血症3 .重链病4 .半子病5 .淋巴癌6 .良性m蛋白血症蛋白阳离子电泳、第二节：补体检测(complement )，补体主要是从宏命令噬菌体分泌细胞存在的补体是C1-C9 (经典途径)、BF、DF、PF (旁路)和补体调节因子吗临床常行总补体活性(CH50 )和单因子C3、C4、BF及C1q检测。 总补体溶血活性(CH50 )检测，可提高急性感染、急性组织损伤、罹患癌症和风湿病的早期，补体的增加常伴随其他血浆蛋白的变化。 降低自身免疫性疾病SLE活动期急性血管球肾炎冷球蛋白血症等重症肝病的先天性缺乏，SRBC、Ab、c、SRBC、c

4、3、c4、c1q、b因子检查、第三节细胞免疫检查、克拉星空卫视分化抗原cd(clusterofdiiii目前的临床CD4(TH )和CD8(克拉星空卫视分化抗原的检测方法目前多采用流式细胞仪技术进行分析，流式细胞仪免疫分析技术是特异抗体标识牌技术和单细胞球检测。 特点：专一性、灵敏度高，检测精度远高于在先手工作业。流式细胞仪检测概述、淋巴细胞表面标记检测、e玫瑰花形成实验、TC、SRBC、SRBC、SRBC、SRBC、SER、SER、SER CD3(总t细胞球)、e玫瑰花试验的临床意义提高了：甲状腺机能亢进症、淋巴细胞性器官移植后异常反应降低：提高了检测AIDS、胸腺发育不良、联合免疫缺陷、放

5、射性射线治疗和化学疗法及免疫抑制类药物治疗CD4、CD8的临床意义： 自身免疫性疾病CD4下降：细小病毒感染如AIDS、免疫抑制剂治疗、重度创伤、大手术等CD8上升：传染性单核细胞增多症和巨细胞病毒感染急性期、慢性乙型肝炎CD8下降：部分自身免疫性疾病、型糖尿病等b细胞表面标志物检测b细胞表面抗原和表面接纳体检测临床意义表面抗原CD19， CD20、CD21、CD22CD19变高： b细胞系罹患癌症CD19变低：体液免疫缺陷病CD21在EB细小病毒和CD3接纳体CD20在b细胞活力化后CD22在b细胞活力化时SmIg B细胞表面特异性标记SmIg变高。 SmIg下降：体液免疫缺陷相关疾病，CD

6、4/CD8测定临床意义，CD4/CD8测定临床意义上升：多见于自身免疫性疾病，如类风关活动期、多发性硬化症、SLE、脏器移植后异常反应、膜性血管球肾炎等下降： AIDS、肿瘤型、淋巴细胞功能检测、t淋巴细胞转化试验意义细胞生物学功能体外试验如实验要求很高。 转化率上升： Down综合征转化率下降：细胞免疫功能下降或缺陷相关疾病NK细胞活力测定意义无NK细胞球抗原刺激，可以直接杀伤靶细胞，释放IFN-r、TNF-B和GM-CSF，在机体抗肿瘤和抗感染免疫中发挥重要作用上升：感染早期， 由于脏器移植干扰素等免疫增强剂治疗低下、细胞因子检测、细胞因子种类繁多、功能复杂，多种因子可以具有相同的功能，各

7、种细胞因子可以相互作用，细胞因子功能会受云同步细胞因子接纳体功能的影响，选择检测项目和结果分析时一般而言，肿瘤标志物的概念是指存在于肿瘤细胞球内，或肿瘤细胞球表达及脱落的物质，或宿主对肿瘤反应而产生的物质。 肿瘤的发生、发展原因迄今尚未完全解决，暗示肿瘤的标识牌也不完全明确，因此肿瘤标志物的概念尚需补充和修改。 Tumor markers are substances、使用属性、thatareproducedbythebodyinresponsetocancergrowthorbythecancertissueitself.sometume whileothersareseeninsevera

8、lcancertypes.manyofthewell-knownmarkersarealsoseeninnon-cancerous conditions.conse queens thesetumo cancer .第四节：肿瘤标志物的本质，广义上的肿瘤标志物是指与肿瘤的发生、发展、消灭相关的各种物质。 包括癌和抑癌基因等遗传物质、EBV-IgA或鼻咽癌等细小病毒、酶催化剂(NSE )、荷尔蒙激素(HCG )、临床应用广泛的肿瘤抗原(CEA、AFP )等。 肿瘤细胞球自身产生的肿瘤标志物，如果理化、细小病毒、遗传等因素引起正常细胞内基因突然变异而癌变，就会引起癌变细胞球内及其表面所表达的蛋白质

9、等成分的某些改变，形成肿瘤抗原，肿瘤细胞球的表达高，肿瘤不同而组织架构发生改变，肿瘤抗原进入血液或在胚胎组织中的2 )肿瘤细胞球产生的特殊抗原，该抗原与正常细胞表达的抗原性质不同。 癌基因的发现证明了正常细胞中存在癌基因，只是处于不表达的状态，一旦被活性化就会失去正常的控制，导致细胞球癌变。 由于癌基因表达产物与肿瘤抗原的关系迄今尚未完全阐明，因此未见特异性肿瘤抗原(基因理论和动物实验已被证实)。 肿瘤标志物的分类、肿瘤标志物目前有100多种。 没有统一的全面分类标准。 常分为血清/血浆肿瘤标志物和组织肿瘤标志物。 理想的肿瘤标志物要求、TM检查的临床意义、辅助临床早期发现、早期诊断有助于区分

10、良性和罹患癌症的临床肿瘤类型鉴定和肿瘤部位鉴别有助于肿瘤疗效观察、早期复发的判断、一些肿瘤标志物的检查意义、一些肿瘤标志物的检查意义、肿瘤标志物的选择建议、 同一个肿瘤的多种肿瘤标志物的选择、人具有完全的免疫系统，正常情况下，免疫系统具有识别自身和异质的功能，因此能够防止异物侵入，对自身组织不产生极弱的免疫应答反应，被称为自我容忍。 当机体外部或内部因素改变时，会影响免疫耐受性，免疫系统对自身组织产生明显的免疫应答反应。 低限度和非持续性一般影响较小，存在高限度和持续性会引起自身免疫性疾病。 自身免疫性疾病多采用血清学检查方法，专一性差，动态检查有助于观察临床预后和疗效。 第五节自体抗体检测、

11、荧光免疫技术目前常用于免疫组织化和自体抗体检测，特定可用于定位。 PCR和流式细胞术、细胞核、用于常见的自抗体检测和临床意义。 名称临床意义类类风湿因子(RF )类类风湿性关节炎及其他免疫性疾病抗ds-DNA抗体SLE的比较专一性抗体抗Smith抗体SLE的比较专一性抗体抗组蛋白抗体药物性狼疮和其他免疫性疾病抗核酶抗体混合结缔组织病，SLE等抗SS-A和SS-B抗体干燥综合征，SLE， RA等抗Scl-70抗体系统性硬化症等抗腺粒体抗体原发性胆汁性肝硬化等常见自我抗体检测和临床意义名称临床意义Jo-1抗体肌炎和间质性肺间质纤维化抗中性粒细胞胞浆抗体血管炎症， 自身免疫性肝病等抗甲状腺自己抗体乔

12、本氏甲状腺炎等甲状腺疾病抗血小板抗体血小板减少症抗平滑肌抗体自身免疫性肝病抗精子抗体男性不育症抗心磷脂复合物抗体SLE，RA等疾病HLA-B27强直性脊柱炎等第6节感染免疫检测， 由于人体感染病原体后经有会儿产生抗体一般需要数月或持续三年五载，抗体检查可判断现病史感染情况，风湿热是一种过敏结缔组织疾病，常见风湿性心脏病、类风湿性关节炎等。 风湿热常由a组溶血性链球菌引起，该菌产生“o”溶血素具有抗原性，ASLO可检测机体产生的抗溶血素“o”抗体。 链球菌感染后抗“o”的发生一般在1周左右，4-6周达到顶峰。 常见于风湿性心脏病、类风湿性关节炎、急性血管球肾炎、呼吸机感染等。 ASLO动态检查对

13、病程和疗效观察有很大意义，CRP结合ESR检查的临床意义更大。 抗链球菌溶血素“o”检查(anti-streptolysin O ASLO )，伤寒是伤寒杆菌引起的急性肠道感染。 伤寒菌有菌体抗原“o”抗原和鞭毛抗“h”原两种抗原。 肥达氏的反应是检测这些个2种抗原刺激生物产生的抗体。 肥达氏反应用于辅助伤寒和副伤寒感染的诊断，由于抗体生成需要一定时间，第一周阳性率达10%，第二周达60%-70%，第四周达90%。 临床上多根据二次标本(早期和中期或恢复期)的粘聚力价值变化判断有无感染。伤寒患者的“o”抗体出现得比“h”早，存在时间短，“h”则相反。 免疫策略会引起“h”的上升，“o”是正常的

14、。 肥达氏试验、肥达氏试验、结核分枝杆菌主要引起细胞免疫，也可引起体液免疫产生特异性IgG抗体，临床上用ELISA法检测特异性IgG抗体，用PCR法检测结核DNA，两种方法均存在部分假阳性，样品寻找结核分枝杆菌的方法最典型结核抗体和DNA检测、幽门螺杆菌检测、幽门螺杆菌(Hp )感染是人类最常见的慢性感染之一，与胃十二指肠等消化系统疾病密切相关。 由于HP感染具有较大的危害性，近年来HP检测方法得到了高度重视和迅速发展。 诊断幽门螺杆菌感染的方法很多，根据内窥镜检查是否必要大致分为侵入性和非侵入性。 侵入性经常进行尿素酶催化剂试验。 非侵袭性试验除C13或C14呼气试验外，血清学HP是诊断现病

15、性感染的好方法，便于儿童HP感染检查和常规体检检查。 梅毒血感染梅毒螺旋体后，会产生抗脂质抗体和抗螺旋体抗原抗体两种抗体，后者比前者专一性更强。 目前，由于螺旋体的体外培养较难，因此血清学检测是目前临床上常用的检测方法。 常用方法有快速血浆基元反应(RPR )和梅毒螺旋体凝血试验(TPPA )，后者专一性高，一般用于确定试验，RPR一般作过筛试验和既往感染标志物。 TORCH感染免疫学检测、日本血吸虫抗体检测可在生物感染血吸虫后产生特异抗体，能够进行血清IgG、IgM、IgE检测，有助于临床诊断和流行病调查。 常用方法：环卵沉淀试验、ELISA法特异抗体检测血吸虫感染能早期引起肝、脾肿大，晚期

16、发展成门脉高压、巨大脾和腹水。 简介囊虫抗体可检测猪绦虫幼虫寄生现象人体，机体产生特异抗体，寄生虫感染免疫学检测，CRP是急性时相蛋白，可由肝脏合成，促进补体吞噬细胞球等免疫功能。 近年来CRP检查得到了广泛的应用。 CRP升高特点是急性期升高明显，预后降低快，且受其他因素影响小，专一性差。 明显增高：急性细菌性感染、严重创伤、烧伤、大手术、风湿活动期等。 轻度上升：细小病毒感染、罹患癌症、心血管病、肝炎、移植等。 冷球蛋白特征：溶解37C、温度下降凝固循环复合物检测：c反应蛋白、冷球蛋白和循环复合物检测、艾滋病血清血液检查、艾滋病又称获得性免疫缺乏综合征(acquiredimmunodeficiencysyndromeadis )的机体感染HIV后在血清中产生抗体， 实验室常用于筛选试验的酶催化剂免疫法，易感性高，不能假阴性，要求允许少量的假阳性。 像确定试验一样使用蛋白质组研究法，要求易感性高、专一性高。 遇到可疑标本，一般患者3月后复查，我国HIV感染较多。 RNA检测用于检测病毒载量。 HIV和CD4 T细胞球、