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文档简介
1、血红蛋白的提取和分离,知识点1课题背景,蛋白质是生命活动不可缺少的渡边杏物质。随着人类基因组项目的进展和各种生物基因组测序的进行,人类进入后基因组和蛋白质组时代,首先要获得高纯度的蛋白质,然后进行蛋白质的研究和应用。因此,从复杂的细胞混合物中提取和分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常做的工作,血红蛋白是人类和其他脊椎动物红细胞的主要成分,负责血液中O2和CO2的运输。在牙齿作业中,我们将学习用血红蛋白作为实验材料提取和分离蛋白质的几项茄子基本技术。血红蛋白,含量,成分,分子质量,基本单位,氨基酸连接方式,细胞中最多的有机物,C,H,O,N等高分子化合物,分子量大,氨基酸,结构通识:种类:20
2、种数百,千,排序顺序各不相同多肽链的空间结构千差万别。蛋白质功能的多样性、运输、调节、免疫、催化剂等生命活动的负担和学习目标,主要概念:凝胶色频谱电泳法缓冲溶液的主要原理:凝胶色谱分离蛋白质的原理电泳法分离样品的原理缓冲溶液的构成和作用机理课题重点:凝胶色谱的原理和方法课题难点:样品,1。分离生物大分子的基本想法是什么?蛋白质分离和提取的原理是什么?萃取分离方法?凝胶色谱的概念?凝胶色谱的原理?缓冲溶液的概念,作用?传记神童的原理?聚丙烯酰胺凝胶传记电泳原理?SDS作用机制?1.生物聚合物分离的基本想法是什么?学生显示器,1 .生物大分子分离的基本想法:选择特定的物理或化学方法,分离具有不同物
3、理或化学性质的生物大分子。基础知识,2 .蛋白质的分离和提取原理是什么?萃取分离方法?学生显示器,凝胶色谱,凝胶传记电泳,基础,2。蛋白质分离和提取原理:分子的形状和大小、电荷的性质和多少、溶解度、吸附特性以及对其他分子的亲和力等蛋白质的不同特性,都可以用于分离不同种类的蛋白质。3 .凝胶色谱的概念?凝胶色谱的原理?学生展示,2 .凝胶:大部分凝胶是由多糖化合物(如葡聚糖或琼脂糖)组成的多孔球体,内部有很多贯穿通道。凝胶色谱法是根据分子量大小分离蛋白质的方法之一,又称分子体层,1。概念:(1)凝胶色谱法(分配色谱法),基础知识,3。原理:徐璐其他蛋白质通过凝胶时,相对分子质量相对较小,凝胶色谱
4、分离蛋白质的原理,大、小、垂直向下运动,不规则扩散运动,更快、更慢、更短,先流出,长,后流出,4。缓冲溶液的概念,作用?学生们需要(2)缓冲液,1 .概念:显示在一定范围内抵抗少量强酸或强碱的影响,几乎可以保持原始溶液PH值的混合溶液。能抵抗外界的酸和碱对溶液PH值的影响,几乎保持PH值不变。2 .作用:基础,3。缓冲溶液赵霁:通常由12种缓冲剂溶于水而配制。调整缓冲剂的使用比例,可以制作在其他PH范围内使用的缓冲液。思想:说人类血液中的缓冲液。,NaH2PO4/Na2HPO4,H2CO3/NaHCO3,基础知识,4。问题:牙齿主题中使用的缓冲液为: _ _ _,其目的是利用缓冲液模拟细胞内的
5、PH环境。基本知识,5 .传记神童的原理?学生展示,2 .原则:许多重要的生物大分子,例如多肽、核酸等,在一定的PH时会有正电或负电。在电场的作用下,牙齿带电分子向与电荷相反的电极移动。传记电泳在要分离的样品中,由于各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同,带电分子徐璐产生不同的迁移速度,因此可以从样品中分离各种分子。基本知识,影响蛋白质分子运动速度的因素,聚丙烯酰胺凝胶电泳原理?SDS作用机制?学生们表明,在聚丙烯凝胶中蛋白质的迁移率取决于它拥有的纯电荷的数量和分子的大小等。(威廉莎士比亚、聚丙烯、聚丙烯、聚丙烯、聚丙烯、聚丙烯、聚丙烯、聚丙烯、聚丙烯),1 .聚丙烯酰胺凝胶传记电泳
6、的原理:SDS可以完全变性蛋白质。因为分解成一个钚链,所以测量结果只是单个钚链的分子量。SDS可以形成多种蛋白质和蛋白质SDS复合物,SDS远远超过蛋白质分子的原始电荷。因此,不同蛋白质之间的电荷差异被掩盖,传记电泳迁移率完全取决于分子的大小。2 .SDS官能团:基础,思考:血液中有什么成分?1凝胶色谱法是根据()分离蛋白质的有效方法。a分子的大小B相对分子质量的大小C电荷的D溶解度2缓冲液的作用是在一定范围内抵抗外部影响,()基本不变。a温度B pH C渗透压D氧浓度3传记神童是指在电场的作用下向带电荷的电极移动。A相同B相反C相对D相反B,B,B,目标检验,4,在用凝胶色谱分离蛋白质的过程中,对蛋白质的叙述表明()A相对分子质
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